猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

采集青海省大通县某养猪场患病仔猪肠道内容物,在血平板培养基上接种采集的病料,于37℃恒温培养箱中培养24 h,血清肉汤中接种单菌落,220 r/min振荡培养12 h,经革兰氏染色后,置于显微镜下观察,同时进行生化鉴定。试验结果表明,生化鉴定结果符合沙门氏菌的生化特性。     

贵州猪大肠杆菌本地株多价灭活疫苗的研制

选择本地分离的3株致病性大肠杆菌O139、O138、O101,分别接种于LB固体培养基于37℃恒温培养箱培养20 h,用0.85%生理盐水洗下菌落,进行活菌计数,3株菌按等量混合,加入0.4%甲醛灭活48 h,再加入20%氢氧化铝胶混匀,制成灭活疫苗置2～4℃冰箱保存。将该疫苗接种无菌的LB固体和麦康凯培养基上37℃培养48 h进行无菌检验,并接种小白鼠进行安全性检验,结果均合格;接种该疫苗14 d后,对小白鼠进行攻毒试验,试验组小白鼠健康无任何异常反应,对照组全部死亡,疫苗的免疫保护率达100%,说明疫苗安全。     

羔羊大肠杆菌的药敏试验

<正>1材料(1)供试菌株的分离鉴定与培养。从丰宁县乐拓牧业公司羊场因腹泻死亡的羔羊中取1只进行试验研究,取肝脏做细菌分离,接种于普通营养琼脂平板,37℃培养24小时,挑取表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明的小菌落,接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养     

分光光度法测定瘤胃厌氧真菌对统糠、麸皮的发酵转化实验

1材料1.1菌液瘤胃厌氧真菌液体培养液,每毫升含孢子108个(经平板记数验证,无锡阿尔宝尔生物工程公司提供)。1.2试物市售统糠和麸皮。1.3试剂DNS试剂、Folin-酚液、氨水、不同pH值的柠檬酸缓冲液。1.4仪器紫外分光光度计、电子天平、冰箱、恒温培养箱、厌氧培养箱、电热恒温干燥     

马玲薯葡萄糖培养基在延胡索酸泰妙菌素菌种选育中的应用

采用涂布法将延胡索酸泰妙菌素生产菌种TMU10—444分离于不同平板培养基上（生产用麦芽浸膏培养基和马铃薯葡萄糖培养基）,置恒温恒湿培养箱中培养成熟后,挑取单菌落、初筛、复筛,采用高效液相色谱（HPLC）法测定效价。结果表明,两种不同平板培养基上的菌落生长有差异,马铃薯葡萄糖培养基上的菌落比对照培养基上的菌落明显长得快;对马铃薯葡萄糖培养基选育的菌株进行了筛选,最终获得4支高于对照生产菌株,分别是2107、2115、2165和2183。此结论为延胡索酸泰妙菌素产生菌菌种选育提供了一种新方法。     

云南鸡源副禽嗜血杆菌的分离鉴定与耐药性分析

无菌棉签深入病死鸡鼻窦腔深部无菌采集病料进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、生理生化试验、革兰氏染色、血凝活性测定、16S rDNA序列测定和药敏试验。结果在富含V因子血琼脂平板上分离到一株灰白色、圆形、边缘整齐的光滑型小菌落,菌落在血琼脂平板、麦康凯等培养基上无明显菌落生长;镜检观察为革兰氏阴性菌,具有血凝活性,符合副禽嗜血杆菌生化培养特性;细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为副禽嗜血杆菌。分离菌株对妥布霉素、阿奇霉素、庆大霉素、阿米卡星具有敏感性。     

杭州地区规模猪场主要细菌性病原微生物的分离鉴定及药敏试验

无菌采集杭州地区规模猪场高热性病死猪病料,分别划线接种于营养琼脂平板、血琼脂平板、巧克力琼脂平板和营养肉汤中,采用厌氧培养和需氧培养方法分离、培养和纯化细菌,利用法国梅里埃公司的ATB细菌自动鉴定和药敏仪进行细菌鉴定,共分离鉴定出25株细菌;采用药敏纸片法对所分离细菌菌株进行药敏试验.     

一株羊源产气荚膜梭菌的分离与鉴定

2013年4月,扬州大学动物医院畜禽门诊接诊一例山羊急性死亡的病例,对其进行剖检,无菌恒温厌氧分离培养,纯化鉴别,革兰氏染色,生化反应,结果表明为产气荚膜梭菌,并对此进行了一定的讨论。     

扬子鳄莫根氏菌和温和气单胞菌混合感染一例

一、病史简介 杨子鳄(Alligator Sinensis)系爬行纲、钝吻鳄科动物,为我国特产,被列为国家一类保护动物。1994年3月本园一条扬子鳄死亡,生前有腹痛、行动迟缓、反应迟钝、缺乏攻击性等症状,临床上曾用过丁卡肌注治疗。根据微生物细菌检验和毒力试验结果确诊为由莫根氏菌和温和气单胞菌混合感染致死。 二、实验室诊断 1、细菌培养:无菌操作采心血种于血平板;肠道内容物种于血平板、SS平板、36℃24小时培养后,种心血的血平板上未长出菌落,以后三天也末长出菌落;种肠道内容物的血平板上长出溶血的较小菌落和较大的灰白色菌落;SS平板上长有圆形、半透明的小菌落。挑取     

山羊"猝死症"病原菌的分离鉴定

对 3只突然死亡山羊的脏器进行了细菌学检查 ,分离到一种革兰氏阳性大杆菌 ,单在或成双 ,多为短链 ,无荚膜 ,有运动力 ;进行厌氧培养 ,在普通培养基上菌落呈不规则网状 ,分枝从中央向四周延伸 ,边缘不齐 ;血液琼脂平板厌氧培养 48h ,形成边缘不整齐、微隆起、淡灰色、周围有β溶血环的菌落 ;经生化鉴定为腐败梭菌。该菌可致死小白鼠 ,对环丙沙星、阿米卡星等药物敏感。     

鹅大肠埃希菌的分离鉴定及系统进化树分析

为对发病鹅感染致病性大肠埃希菌的临床治疗提供指导并防控致病性大肠埃希菌感染,本研究无菌采集腹泻鹅及病死鹅脾脏、肝脏等组织器官进行病原菌分离培养、染色观察、生化鉴定、致病性试验,对菌株部分基因进行测序、构建遗传进化树并进行药敏试验。结果显示,普通琼脂培养基上生长出灰白色、圆形、凸起、边缘整齐菌落,麦康凯琼脂培养基上长出玫红色、光滑圆润菌落;分离菌株经革兰氏染色,镜下可见革兰氏阴性菌,两端钝圆、大小中等,多呈单个存在的杆状菌;致病性试验表明,该分离菌株对小鼠、雏鹅均有较高致死率;遗传进化树结果显示,分离菌株与患者粪便分离株（GenBank登录号：CP024992.1）同源性最高,达99.5%;体外抑菌试验发现菌株耐药情况较严重,对大多数抗菌药均有较强抗性,仅头孢噻呋对该分离株有较强的抑菌作用,合理用药后病情得到有效控制。本研究为有效防治鹅大肠埃希菌病提供了理论依据,对规模化鹅场防控大肠埃希菌等其他细菌性疾病具有重要价值。     

致肉牛运输热溶血曼氏杆菌的分离鉴定及部分生物学特性研究

为探明一起肉牛运输热的病原及生物学特性,本研究无菌采集病死牛心血、肺脏、肝脏和脾脏,对其进行细菌分离、生化试验和PCR鉴定,并对分离株进行毒力基因检测、致病性研究。结果显示,7株分离菌均为革兰氏阴性短杆菌,具有微弱的β-溶血,瑞氏染色可见两极浓染及明显的荚膜。生化试验结果显示,分离菌能发酵葡萄糖、麦芽糖、阿拉伯糖、甘露醇、甘露糖、木糖等碳水化合物,不发酵脲酶、MR-VP和吲哚,产生少量酸而不产气,结果符合溶血曼氏杆菌生化特性。PCR鉴定均为荚膜血清A2型,分离菌均含有四型菌毛相关基因ptfA、参与复制相关基因dnaN、白细胞介素相关基因LktC3种毒力基因。分离菌对小鼠的LD50值在107.83～108.50 CFU/mL之间,不同菌株间小鼠LD50值存在一定差异,但差异不明显。结果表明,引起该批肉牛运输热的病原为携带毒力基因的荚膜血清A2型溶血曼氏杆菌,本研究结果为进一步研究溶血曼氏杆菌的致病机制提供参考。     

3株猪源绿色气球菌的分离鉴定

为确定云南省不同地区3个猪场仔猪发生四肢运动障碍的病原因素,无菌采集病死仔猪内部组织样品,采用血琼脂分离培养病原菌,随后对分离菌株做形态观察、生化试验、药敏试验及16S rRNA基因测序分析。结果：从3个猪场病料中均分离到菌落及个体形态一致的细菌,其16S rRNA基因序列与NCBI中7株绿色气球菌参考菌株的同源性均在99%以上,据此判定为绿色气球菌(Aerococcus viridans);3个分离菌株均对克拉霉素、头孢曲松和青霉素敏感,对复方新诺明、庆大霉素和卡那霉素耐药。鉴于病死猪有检出其他病原体感染的情况和未见该菌单独有强致病力的报道,研究结果提示绿色气球菌是危害猪健康养殖的重要机会致病菌。     

黄牛阿氏肠杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为查明广西某牛场病死黄牛的病死原因,提供科学的综合防治措施,用细菌分离、生化鉴定、细菌16S rRNA测序、体外药敏试验、常见病原的PCR检测等方法对送检的病料进行检测。结果显示,化脓隐秘杆菌、多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、肺炎克雷伯菌、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛支原体和牛传染性鼻气管炎病毒PCR检测结果均为阴性。而从出血肺组织中分离到1株能引起小鼠致死的短杆状革兰阴性菌,该细菌在血琼脂平板上呈灰白色菌落,不溶血;在麦康凯培养基上呈圆形灰色、轻度隆起、光滑湿润、边缘整齐、直径为0.2 mm^0.3 mm的针尖状小菌落;在营养肉汤中生长呈絮状物浑浊。生化鉴定发现其符合阿氏肠杆菌的生化特性,16S rRNA测序结果显示该菌与阿氏肠杆菌的基因序列同源性为99%。体外药敏试验结果显示该菌仅对头孢类药物敏感,头孢类药物作用效果强度为头孢曲松钠>头孢地嗪钠>头孢哌酮钠舒巴坦钠。     

一株鸭源维氏气单胞菌的分离鉴定与致病性的初步研究

江苏某养殖场种鸭突然发生散发性死亡,为了探究其死亡原因,本研究通过临床解剖观察、病原分离、生化试验、药敏试验、雏鸭人工感染试验和致病性试验对分离菌株进行检测。结果显示该分离菌为革兰阴性短杆菌,在麦康凯培养基和LB培养基中呈现圆形灰白色菌落,在血琼脂培养基中呈现出β溶血;16S rRNA基因序列分析结果显示该菌为维氏气单胞菌(A.veronii);药敏结果显示该菌对头孢氨苄、氨苄西林等10种抗生素敏感;人工感染试验显示该菌可造成雏鸭的死亡;小鼠的致病性试验显示该菌对小鼠的LD50为5.0×10^6.5cfu。总之,本实验从病鸭中分离到1株A.veronii,并筛选出敏感药物,为A.veronii病的诊断和治疗提供了参考依据。     

绵羊肺脏中溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其药物敏感性分析

为了对引起绵羊肺炎的病原进行分离、鉴定和耐药性分析,本研究通过无菌采集绵羊肺脏并对细菌进行分离纯化、生化试验和PCR鉴定,然后对所得到的溶血性曼氏杆菌分离株进行药物敏感性研究。结果显示,分离纯化得到的细菌为革兰氏阴性短杆菌,具有弱溶血性,经生化试验和PCR鉴定为溶血性曼氏杆菌;耐药性分析显示该菌株对恩诺沙星、庆大霉素、四环素等大部分药物敏感。本研究为绵羊溶血性曼氏杆菌感染的有效防制提供有用的信息和数据。     

Survival of Mannheimia (Pasteurella) haemolytica in tracheobronchial washings of sheep and cattle

The growth, morphology and long-term survival of a representative isolate of Mannheimia haemolytica serotypes A1 and A2 were monitored in ovine and bovine tracheobronchial washings. Both strains survived for at least 244 days in ovine tracheobronchial washings and 156 days in bovine tracheobronchial washings. The addition of fresh washings at these times prompted an increase for serotype A2 but no change in viability for serotype A1 in ovine tracheobronchial washings and an increase for both serotypes in bovine tracheobronchial washings. When growth and survival was compared using tracheobronchial washings from ruminant and non-ruminant species there was a trend towards longer survival in ruminant fluids.Long-term survival was associated with temporary or permanent change from normal size colonies to 'micro-colonies' on sheep blood agar. Subculture allowed reversion to normal colony morphology. Analysis showed these micro-colonies to consist of chains of elongated bacteria. M. haemolytica serotype A2 was more robust in its ability to withstand nutrient deprivation for long periods of time. These survival mechanisms may have important implications for pathogenesis.     

Characterisation of a novel Mannheimia sp from Australian feedlot cattle

OBJECTIVE: To characterise eight isolates of a Gram-negative organism obtained from the upper respiratory tract of cattle showing evidence of mild upper respiratory tract disease. DESIGN: The isolates were compared with the five recognised species within the genus Mannheimia - M haemolytica, M glucosida, M granulomatis, M ruminalis and M varigena--using a range of phenotypic and genotypic methods. RESULTS: Phenotypic characterisation indicated that the isolates belonged to the trehalose-negative [Pasteurella] haemolytica complex. This complex has recently been reorganised into five species within the new genus Mannheimia. Ribotyping performed using HindIII and a computerised analysis system indicated that the eight Australian isolates formed a distinct cluster that was related to, but different from, the five recognised species of Mannheimia. The 16S rRNA sequence of one isolate (BNO311) was determined and a phylogenetic analysis performed. Isolate BNO311 was distinct from the five named Mannheimia spp but did join a larger cluster consisting of rRNA cluster IV (M varigena) and the unnamed rRNA cluster V of Mannheimia. DNA:DNA hybridisation between isolate BNO311 and M haemolytica NCTC 9380T, M granulomatis P411 and Actinobacillus ligniersii NCTC 4189T all suggested similarities of approximately 30%. CONCLUSIONS: These phenotypic and genotypic characterisation studies suggest that the eight Australian isolates represent a new species of Mannheimia. Until further characterisation studies are performed, we are unwilling to propose a name for this taxon, preferring to refer to this possible new species as Bisgaard taxon 39 of cluster V of Mannheimia.     

西藏绵羊溶血性曼氏杆菌分离鉴定及药敏特性研究

为探究西藏自治区山南市某地农户饲养的绵羊大批死亡的原因,采集病死羊心脏、脾脏、小肠、肺脏、气管等病料,进行细菌培养、分离鉴定、PCR检测、血清型鉴定、毒力基因检测及药敏特性分析。结果显示:从病死羊肺脏病料中分离出一株溶血性曼氏杆菌,血清型为2型;特异性PCR检测为阳性,证明分离菌株为溶血性曼氏杆菌;药敏试验结果显示,分离的溶血性曼氏杆菌对大多数临床常用抗生素敏感;主要毒力基因lktA检测为阳性。该研究首次从西藏绵羊分离出溶血性曼氏杆菌,并研究了其药敏特性,为该病的诊断与治疗提供了参考。