猪卵巢发育的组织学特点及糖组织化学

运用组织学常规石蜡切片-HE染色和过碘酸-雪夫染色（PAs）方法,分别对3日龄及165日龄育成猪卵巢组织结构、各级卵泡的发育变化特点及其黏多糖分布情况进行了研究。结果显示,3日龄的猪卵巢皮质、髓质界限模糊,皮质部分由外向内依次分布着密集的卵原细胞和卵原细胞巢、共质体样的卵原细胞群,皮质深层与髓质相邻处分布着合胞体样的卵母细胞簇状结构和卵泡。育成猪卵巢中,皮、髓质界限明显,能观察到原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及近成熟卵泡,但是很少能见到黄体的结构。PAS染色结果表明,3日龄的猪卵巢中PAS阳性反应主要分布于卵原细胞周围的基质、卵原细胞巢和合胞体的外膜上,以及原始卵泡周围的基质、初级卵泡的卵泡膜及刚形成的透明带上,此外卵巢的白膜、髓质的结缔组织、血管壁及卵巢网周围也可见到广泛的阳性着色。育成猪卵巢中,PAS阳性反应主要分布于基质、生长卵泡的卵泡膜、卵泡的透明带、次级卵泡的卵泡液、黄体被膜及髓质的结缔组织和血管壁。     

猪卵巢发育的组织学特点及糖组织化学

运用组织学常规石蜡切片-HE染色和过碘酸-雪夫染色(PAS)方法,分别对3日龄及165日龄育成猪卵巢组织结构、各级卵泡的发育变化特点及其黏多糖分布情况进行了研究。结果显示,3日龄的猪卵巢皮质、髓质界限模糊,皮质部分由外向内依次分布着密集的卵原细胞和卵原细胞巢、共质体样的卵原细胞群,皮质深层与髓质相邻处分布着合胞体样的卵母细胞簇状结构和卵泡。育成猪卵巢中,皮、髓质界限明显,能观察到原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及近成熟卵泡,但是很少能见到黄体的结构。PAS染色结果表明,3日龄的猪卵巢中PAS阳性反应主要分布于卵原细胞周围的基质、卵原细胞巢和合胞体的外膜上,以及原始卵泡周围的基质、初级卵泡的卵泡膜及刚形成的透明带上,此外卵巢的白膜、髓质的结缔组织、血管壁及卵巢网周围也可见到广泛的阳性着色。育成猪卵巢中,PAS阳性反应主要分布于基质、生长卵泡的卵泡膜、卵泡的透明带、次级卵泡的卵泡液、黄体被膜及髓质的结缔组织和血管壁。     

二花脸猪卵巢卵泡形成与早期发育

为了研究二花脸猪卵泡的形成和发育特点,取胎儿期50、70和90(日龄)、新生1日龄及生后期20、70和120(日龄)7个阶段猪的卵巢组织样品进行组织学观察。结果表明,生殖细胞在早期卵巢中以卵母细胞巢状结构存在,原始卵泡最早出现在胎70日龄卵巢中,黄体出现在生后120日龄;以Stat3为生殖细胞的标记蛋白,进行免疫组织化学试验,统计出生前期各日龄阶段卵母细胞巢和卵泡的比例。结果表明,从胎70日龄到胎90日龄,卵母细胞巢状结构比例显著降低,单个卵泡比例显著增高,生后70日龄卵巢中出现有腔卵泡,未见黄体出现,生后120日龄卵巢中出现黄体;以PCNA作为细胞增殖的指标,进行卵巢组织的免疫组织化学定位,结果显示,在猪的卵泡形成和早期发育阶段以卵母细胞的快速增殖为主。说明二花脸猪的卵巢原始卵泡开始形成的时间在胎猪70日龄左右,初情期在生后70~120日龄,卵泡激活前以卵母细胞的生长为主。     

牦牛卵巢组织学结构的观察

本试验对牦牛的卵巢结构进行了研究,主要是通过大体解剖和显微结构的观察。通过研究,把牦牛的卵泡分为了原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和囊状卵泡。研究发现,牦牛的卵巢中数量较多的是原始卵泡,它主要分布在皮质的浅表层。原始卵泡是由卵母细胞以及周围单层的扁平卵泡细胞组成。初级卵泡体积增大,透明带开始形成。次级卵泡体积迅速增大,透明带厚度明显增加,卵泡膜增厚。囊状卵泡腔体大,卵母细胞位于卵泡一侧,形成放射冠状的卵丘。     

母犬出生后生殖器官发育的显微结构研究

为了研究母犬出生后生殖器官发育的组织学变化,试验采集了从初生至18月龄Beagle母犬的卵巢、输卵管和子宫,并采用石蜡切片、光学显微镜方法检查。结果表明:初生犬卵巢皮质部含有大量原始卵泡,且扁平卵泡细胞排列在卵母细胞周围,3月龄出现初级卵泡,6月龄出现次级卵泡,9月龄出现成熟卵泡和黄体。犬卵巢中有多卵卵泡,数量随年龄增长呈下降趋势。初生时,子宫腺体体积小、数量少,以后不断发育增生,腺体周围的基质也逐渐密集。初生至9月龄的输卵管黏膜仅有初级皱襞,12月龄后开始出现较多次级皱襞。     

休情期银黑狐卵巢形态和卵泡发育的显微结构观察

研究休情期银黑狐卵巢形态和卵泡的显微结构,以揭示银黑狐卵巢发育的一般规律。本试验于2012年12月份采集5只健康一岁龄银黑狐卵巢10枚,用游标卡尺测量其长、宽、厚,用电子天平测量其重量,并对其表面可见卵泡数量进行统计,然后利用光学显微镜对各级卵泡分别观察1~3个,共计原始卵泡30个,初级卵泡20个,次级卵泡15个,三级卵泡12个,成熟卵泡10个,并进行拍照。结果表明:随银黑狐卵巢体积不断增大,其中80%的卵巢重量也随之增大;可见卵泡数量与卵巢体积及重量没有相关性;卵巢由被膜、皮质和髓质构成,髓质位于卵巢内层,分布着较多血管,皮质位于卵巢外层,内有不同发育阶段的卵泡;原始卵泡由卵母细胞和颗粒细胞构成,初级卵泡开始出现透明带物质,到次级卵泡阶段发育完整,三级卵泡出现卵泡腔,卵泡及卵母细胞直径在有腔卵泡阶段比腔前卵泡阶段增长速度快,成熟卵泡的直径及透明带厚度达到最大,各级卵泡均有闭锁现象。     

水牛胎儿卵泡细胞和卵母细胞凋亡的特征

选择5月龄胎儿水牛的卵巢，采用石蜡切片、HE染色的光镜观察和DNA末端原位标记技术（TUNEL）进行了研究。结果表明：5月龄胎儿卵巢上分布着大量的凋亡细胞；在皮质部存在的大量腔前卵泡中，均匀分布有单个凋亡的卵泡细胞和卵母细胞，凋亡细胞的主要组织学变化是细胞缩小，核浓缩；DNA末端标记变化主要显示出TUNEL阳性。上述结果提示：水牛卵泡细胞和卵母细胞凋亡在胎儿时期已经存在，细胞凋亡是启动水牛腔前卵泡闭锁的潜在机理。     

猪卵巢颗粒细胞和黄体细胞凋亡的调控机制研究进展

母猪卵巢皮质上存在大量卵泡，卵泡由原始卵泡向初级卵泡、次级卵泡逐步发育为排卵前的成熟卵泡时，伴随着卵泡闭锁的发生。目前认为颗粒细胞凋亡是导致卵泡闭锁的主要因素，并且已经证实。卵泡成熟后会破裂排卵，如果卵子未受精，则黄体会发生萎缩并退化，形成称作白体的结缔组织，最终被组织吸收。细胞凋亡受到多基因严格控制，随着分子生物学技术的发展，已经证明存在多个信号通路。本文以猪卵巢为模型，综述了卵泡闭锁期间颗粒细胞凋亡和黄体退化过程中黄体细胞凋亡的调控机制，以期为深入研究卵巢细胞凋亡提供理论基础。     

东北梅花鹿卵泡发育的显微结构

为揭示雌性东北梅花鹿的生殖机理提供组织依据,利用光学显微镜观察7只成年东北梅花鹿卵巢的组织结构和卵泡的发育过程,同时利用目镜测微尺和显微照相技术分别对60个原始卵泡、60个初级卵泡、25个次级卵泡、34个三级卵泡和3个成熟卵泡及透明带厚度进行测量和拍照。结果表明,东北梅花鹿卵巢组织也是由生殖上皮、白膜、皮质和髓质构成;皮质部在卵巢的外周,但间质腺不发达;髓质位于皮质深层,分布有较多的血管。卵泡在发育过程中,各级卵母细胞和卵泡的直径差异较大,卵泡和卵母细胞的生长呈双向生长;透明带物质出现于3~4层卵泡细胞包围卵母细胞时;卵泡闭锁发生于卵泡生长的各个时期,主要表现为卵母细胞和卵泡细胞的形态变化,有两种形式;三级卵泡的闭锁过程分为早期、中期和后期3个阶段。     

柠檬酸对小鼠卵泡组织形态的影响

通过观察小鼠卵泡形态结构的变化,研究柠檬酸对雌性小鼠卵泡发育的影响。将60只20~22g昆明小鼠随机分为生理盐水对照组和柠檬酸低、中、高剂量处理组,各组小鼠每天每只依次分别腹腔注射0.2mL的0.9%生理盐水、7.5mg/mL、15mg/mL及30mg/mL的柠檬酸。第21天在乙醚麻醉条件下,每组随机取10只小鼠断颈处死,摘取卵巢浸泡于4%的甲醛溶液中固定24h,制作常规石蜡切片,HE染色,光学显微镜进行组织切片观察。结果表明:对照组小鼠各级卵泡的形态正常,7.5mg/mL、15mg/mL柠檬酸处理组可观察到正常形态的原始卵泡、初级卵泡,30 mg/mL柠檬酸处理组因原始卵泡、初级卵泡退化,使原始卵泡、初级卵泡的数量显著减少;15mg/mL柠檬酸处理组主要使次级卵泡发育受阻,某些小的有腔卵泡部分颗粒细胞凋亡,卵泡膜细胞分化障碍,大的有腔卵泡的卵母细胞和卵泡内膜细胞退化,以及卵泡膜层血管数量减少或消失;30mg/mL柠檬酸处理组卵母细胞发育周期阻滞或退化、消失,导致原始卵泡和初级卵泡数量显著减少,以及次级卵泡、有腔卵泡的闭锁。结果提示:低、中剂量的柠檬酸对原始卵泡、初级卵泡的发育无影响;中剂量柠檬酸使次级卵泡发育受阻,有腔卵泡退化;高剂量柠檬酸对各级卵泡的发育均有显著影响,造成卵泡的闭锁。     

母猪性早熟卵巢的组织学及其PCNA和Caspase-3表达特性

为研究性早熟对母猪卵巢功能的影响,随机选取江苏某猪场同一批洋三元育肥断奶小母猪8头,在60日龄屠宰取卵巢和子宫,根据屠宰结果分成卵巢发育正常组和性早熟组,进行组织学观察和免疫组织化学分析。结果表明:60日龄卵巢发育正常组与性早熟组卵巢重差异极显著(P0.01),子宫重差异显著(P0.05)。通过HE染色观察,60日龄卵巢发育正常组以原始卵泡、初级卵泡为主兼少量次级卵泡,60日龄性早熟组卵巢出现多个三级卵泡,这些三级卵泡发育正常。免疫组化结果显示,增殖细胞核抗原(PCNA)、Caspase-3在原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡颗粒细胞中都有广泛的表达。在性早熟组卵巢三级卵泡中,PCNA在颗粒细胞中较强表达而在闭锁卵泡中不表达。而Caspase-3表达不变但在闭锁卵泡中也不表达。结果提示:洋三元育肥断奶小母猪普遍存在卵巢过早发育现象,需进行有效管理。     

BMP15-FAT1对猪卵丘细胞凋亡的影响

猪卵丘细胞位于卵母细胞外周,作为一种特殊的颗粒细胞,参与卵母细胞发育、卵泡发育与闭锁以及胚胎的生存和发育等重要生殖生理过程。为探求BMP15通过调控卵丘细胞增殖与凋亡,进而影响卵母细胞生长及成熟的作用机制,本研究通过体外添加BMP15,利用RNA干扰技术、实时荧光定量PCR、流式细胞术等方法,分别检测了添加BMP15后,猪卵丘细胞凋亡情况及凋亡相关通路基因的m RNA表达变化。结果表明:猪BMP15由卵母细胞特异性分泌,可抑制猪卵丘细胞凋亡,同时也可促进FAT1基因的表达;沉默FAT1基因后,BCL2/BAX比率下降,进而影响猪卵丘细胞的凋亡。     

雷州黑鸭早期卵巢卵泡发育规律及减数分裂基因表达研究

为了揭示雷州黑鸭早期卵巢发育规律及开产期早的特性,试验采用H.E.染色法对雷州黑鸭0～120日龄卵巢组织形态学进行观察,并通过荧光定量PCR对0～28日龄卵巢组织中减数分裂相关基因Str8、Sycp3、Spo11、Dmc1的表达量进行测定分析。结果表明:雷州黑鸭0～28日龄卵巢发育与前人对鸡卵巢研究结果基本一致,但在雷州黑鸭21日龄时有卵泡闭锁现象,推测14～21日龄由初级卵泡向次级卵泡发育中存在卵泡选择过程。Sycp3、Dmc1和Spo11基因在0日龄表达量最高且在0～28日龄呈下降趋势;Str8基因表达呈现一个波动,在7日龄时表达量最高,推测该基因参与诱导原始卵泡的发育和启动初级卵泡的减数分裂。说明雷州黑鸭开产期早的原因可能是在14～21日龄的卵泡选择过程中使28日龄后的次级卵泡发育速度快于其他品种;此外,Str8可能通过调控原始卵泡和初级卵泡的分裂时间影响雷州黑鸭开产期。     

母牛卵巢的卵母细胞及卵泡的生长和发育

有关卵子发生的现有文献是十分丰富的,但主要是试验动物的材料。对人、猪和骆驼的卵子发生及母牛卵子发生的某些阶段做了研究。在哺乳动物界里,甚至连卵巢组织结构也具有特殊性。对卵母细胞和卵泡进行体外培养时,应对正常发育的卵巢进行全面的形态生理学过程的分析。我们的工作是专门研究母牛卵巢上的卵母细胞和卵泡的生长。其卵巢是来自肉联加工厂屠宰的母牛,挑出病理性卵巢(囊肿,出血多的卵泡以及卵泡数量较少者等)。卵巢上的卵泡和卵母细胞的活动性闭锁及排卵后和妊娠时的卵巢也除去。余下的卵巢,即能够供给卵母细胞及卵泡在体外培养的卵巢作研究用。曾研究了五个卵     

胎牛卵巢组织学结构研究

获体长8～15cm黑白花奶牛雌性胎犊5头,用光镜和电镜对其卵巢的组织结构进行了观察.生殖上皮呈单层或复层住状,其增殖能力极强,细胞突破基膜进入卵巢深部,与卵巢间质细胞相混.在光镜下,卵原细胞在卵巢的外区,分为由卵巢间质包围成大包囊状共质体、合胞体状细胞群和小包囊细胞簇以及密集裸露的卵母细胞,它们可明显地分出明暗两类.卵巢间质细胞核具有两种形态:一种为长梭形,数量较多;一种为纺锤形,数量较少,常见具纺锤形核的细胞包围的卵母细胞,而形成典泡.常见1～3个卵泡上皮细胞包围的卵母细胞形成原始卵泡;另一种是极性分布成帽状包围的卵母细胞卵泡.电镜下观察,有具共质体状结构和膜相隔的卵原细胞群两种情况.共质体状卵原细胞内的细胞器位于核旁;有膜相隔的卵原细胞核大,胞质少,胞质中膜泡结构明显.     

FOXL2基因与蛋鸡卵巢发育的相关性研究

试验采集120、160、220、330、480日龄海兰褐蛋鸡的卵巢,通过石蜡切片观察卵泡发育情况,采用荧光定量PCR检测FOXL2基因在卵巢的表达情况。结果显示:120~480日龄,卵巢重量呈现先增加后减少的趋势,220日龄达到最大;卵巢的初级卵泡数逐渐减少,而次级卵泡数先增加后减少,160日龄次级卵泡数最多;蛋鸡卵泡萎缩率增加,闭锁卵泡数逐渐增多;FOXL2基因的m RNA水平在120~480日龄呈下降趋势,暗示其可能与蛋鸡卵巢和卵泡的发育存在相关性。     

猪人工授精和繁殖疾患的防治(续一)

第二讲母猪的生殖生理第一节母猪的内生殖器官母猪的生殖器官主要有内生殖器官(卵巢和生殖道—输卵管、子宫和阴道)和外生殖器官(包括尿生殖前庭、阴唇、阴蒂),还有副性腺体(位于子宫颈以及阴道的一些腺体)共同构成母猪的生殖器官。一、卵巢在卵巢表面皮质部有一层生殖上皮,其中发育着卵泡。卵泡由原始卵泡开始经初级卵泡发育为次级卵泡,再继续发育形成卵泡细胞,再和卵丘上的卵泡壁相连,发育为三级卵泡,最后发育为成熟卵泡。发情期卵泡体积增大,卵泡中通常只有一个卵母细胞。未成熟的卵泡退化为闭锁卵泡。发情前夕,卵泡不断增长,卵泡液增多,…     

Ube2s在小鼠卵泡发育和黄体形成过程中的表达研究

本研究旨在通过原位杂交、免疫组织化学和实时荧光定量PCR检测在小鼠性成熟、孕马血清促性腺激素(PMSG)诱导的卵泡发育、人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的排卵以及黄体形成过程中,卵巢组织中泛素结合酶E2 S(Ube2s)的表达变化。结果表明:在不同日龄小鼠卵巢中,Ube2s在原始卵泡和初级卵泡的卵母细胞中表达强,在次级卵泡和有腔卵泡的卵母细胞中表达减弱;Ube2s在原始卵泡的颗粒细胞中有表达,在初级卵泡和次级卵泡的颗粒细胞中表达增强,在有腔卵泡的颗粒细胞表达减弱。给21日龄雌性小鼠注射PMSG诱导卵泡发育模型,并利用hCG诱导排卵模型,结果显示Ube2s的表达与不同日龄小鼠卵巢中Ube2s的表达规律一致,提示Ube2s可能与卵泡发育有关。在小鼠黄体形成与退化过程中,Ube2s在新生黄体中呈强表达,在退化黄体中表达减弱,提示Ube2s可能与黄体的形成与退化有关。综上,Ube2s可能在小鼠卵泡发育和黄体形成过程中发挥作用。     

双峰驼卵巢的组织结构

应用组织学方法对双峰驼卵巢的形态结构进行了显微与亚显微观察。结果显示 ,双峰驼卵巢表面被覆单层立方至单层扁平的生殖上皮 ,无排卵窝 ,上皮下为致密结缔组织白膜 ,卵巢实质由外周的皮质和中央的髓质构成。皮质中原始卵泡和初级卵胞数量稀少 ,其分布位置更靠近皮质中层 ,偶见同一卵泡内含 2个卵母细胞。体积大小和发育阶段不同的次级卵泡与三级卵泡闭锁时 ,所发生的形态变化不一致 ,可出现实心和囊状 2种闭锁卵泡。黄体中以粒性黄体细胞占优势 ,其细胞质中含大量脂质泡而呈海绵样。卵巢髓质中除含大量血管外 ,还见卵巢网分布     

早期猪胎儿卵巢的组织学观察

母猪怀孕后33-61d期间,是胎猪卵母细胞发生的关键阶段。为掌握这一时期卵巢上组织细胞的发育变化,试验采集妊娠33、40、46、54、61d的雌性胎猪卵巢进行苏木精-伊红染色。结果表明,妊娠33d胎猪卵巢表面上皮由1-2层细胞构成,实质见到卵原细胞和髓质索结构;妊娠40d时出现卵原细胞共质体结构和前细线期卵母细胞,髓质索状结构断裂;妊娠46d共质体样结构增多,卵母细胞进入前细线期和细线期。髓质索断裂成片段;妊娠54d时表面上皮由单层细胞构成,卵巢皮、髓可分,皮质中层见到合胞体样卵母细胞群,髓质相邻的皮质深层有一些原始卵泡正在形成;妊娠61d胎猪卵巢皮、髓界限清晰,皮质中层是大量合胞体样卵母细胞群,皮质深层出现了较多的原始卵泡,髓质中卵泡结构退化,卵母细胞发生核固缩。