绿色木霉对土传病原真菌的体外拮抗作用

体外拮抗作用测定表明 ,绿色木霉 [Trichoderma viride Per. ex Fr. ( T0 2 ) ]对土传病原真菌齐整小核菌 [Sclerotium rolfsii Sacc. ( S0 1) ]和半裸镰孢 [Fusarium semitectum Berk.&Rav.( F0 4) ]有明显的拮抗作用 ,在对峙培养中拮抗系数分别为 2～ 3和 2 .在光学显微镜下观察到绿色木霉对半裸镰孢菌丝的缠绕、使细胞质变稀薄、菌丝消解、菌丝断裂或侵入等现象 .绿色木霉对齐整小核菌形成明显的拮抗圈 ,界面处病菌菌丝的细胞质变稀薄、消解或菌丝断裂 ,病菌菌丝停止生长 .绿色木霉还对齐整小核菌菌核形成包围 ,并抑制菌核的萌发 .     

生防菌长枝木霉菌株T6及其代谢产物对立枯丝核菌拮抗作用

为了开发对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）具有较好拮抗作用的生防制剂,采用对峙培养法、含药培养基法和显微观察法,测定生防菌长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum）菌株T6及其代谢产物对立枯丝核菌的抑制作用活性,初步探究长枝木霉菌株T6的作用机制。结果表明,长枝木霉菌株T6对立枯丝核菌生长具有显著的抑制作用,对峙培养5 d时菌株T6不仅对立枯丝核菌营养生长抑制率为66.50%,而且对其菌丝具有明显重寄生作用。菌株T6发酵液及其代谢产物对立枯丝核菌营养生长也具有显著的抑制效果,培养4 d时其对立枯丝核菌的生长抑制率分别为72.29%和71.91%。因此,长枝木霉菌株T6对立枯丝核菌具有显著的拮抗作用,主要通过对病原菌的重寄生作用及其代谢产物发挥拮抗作用。     

康氏木霉对立枯丝核菌7个融合群及3个亚群拮抗作用的研究

将从玉米纹枯病病斑上分离的3株康氏木霉(Trichoderma koningiiOud.),在琼脂玻片上与立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)7个菌丝融合群及3个亚群(AG-1-IA、AG-1-IB、AG-1-IC、AG-2-1、AG-2-2、AG-3、AG-4、AG-5、AG-6和 AG-BI)标准菌株对峙培养,观察其对丝核菌的拮抗作用.结果表明,3株木霉对各融合群的丝核菌均有强烈拮抗作用,融合群间及木霉菌株间的拮抗作用均无明显差异。其拮抗方式表现为缠绕、侵入,断裂菌丝,消解细胞质或使之变稀薄。     

木霉菌T38D对大豆根腐病菌的拮抗机制

利用从土壤中分离出的木霉(Trichoderma spp.)菌株T38D,通过对峙法、对扣培养和圆盘滤膜法对引起大豆根腐病的病菌进行了拮抗作用研究,结果表明:木霉菌T38D对根腐病菌有明显的空间竞争能力,对立枯丝核菌和终极腐霉菌的拮抗系数达到Ⅰ级,对4种镰孢菌的拮抗系数均达到Ⅱ级;木霉菌T38D可以寄生于4种根腐病菌菌丝上,最终导致病原菌解体死亡;T38D的难挥发性代谢产物对立枯丝核菌的抑制率可达100%,对终极腐霉菌的抑制率为87.6%,对燕麦镰孢菌的抑制率为75.2%,对其余3种镰孢菌的抑制率都在40%～50%;T38D的易挥发性代谢产物对立枯丝核菌和终极腐霉菌有一定的抑制效果,对镰孢菌的抑制效果不明显。     

黄瓜茎基腐病菌拮抗真菌的分离和筛选

[目的]分离和筛选黄瓜茎基腐病菌的拮抗真菌。[方法]从病田土壤采集21个土壤标本,分离得到5种对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌有拮抗作用的拮抗菌,并进行温室盆栽防病试验。[结果]经鉴定,5种拮抗菌分属于长枝木霉、橘绿木霉、康氏木霉、哈慈木霉和绿色木霉,对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌的生长都有强烈的抑制作用。在人工接种条件下,5种拮抗菌对立枯丝核菌引起的茎基腐病的防效在60%以上,对瓜果腐霉引起的茎基腐病的防治效果差些。[结论]该研究筛选出的5种拮抗菌对瓜果腐霉、瓜类腐皮镰孢菌和立枯丝核菌引起的黄瓜茎基腐病均有一定的防效。     

木霉（TR－5）对病原真菌的拮抗机制和防病效果研究

从土壤中分离获得一株木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｓｐ．）菌株（ＴＲ－５），用对峙法和系列稀释法测定其对立枯丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉ），禾谷丝核菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｃｅｒｅａｌｉｓ），西瓜枯萎病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍ∫ｎｉｖｅｕｍ），油菜菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ），昆明腐霉（Ｐｙｈｔｉｕｍｋｕｎｍｉｎｇｅｎｓ）和寄生疫霉（ＰｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａＰａｒａｓｉｔｉｃａ）的拮抗作问。结果表明，ＴＲ－５菌株对６种病原真菌都具有极强的拮抗作用，主要表现为缠绕、附着在病原真菌菌丝上，同时产生吸器侵入病原真菌的菌丝，使菌丝断裂。还能分泌有毒或抗生物质抑制其生长，并具有很强的生长竞争能力。ＴＲ－５菌株对立枯丝核菌，禾谷丝核菌和西瓜枯萎病菌的有效抑制浓度为１０６～１０７个孢子／ｍｌ；对油菜菌核病菌和昆明腐霉菌为１０４～１０５个孢子／ｍｌ；而对寄生疫霉为１０５～１０６个孢子／ｍｌ。用ＴＲ－５木霉的分生孢子制剂在温室条件下对黄瓜猝倒病（Ｐｙｔｈｉｕｍａｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｕｍ）和黄瓜疫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｄｒｅｃｈｓｌｅｒｉ）进行防治试验，效果分别     

木霉菌对五种植物病原真菌的重寄生作用

研究了哈茨木霉（Trichoderma harzianum)T88菌株和深绿木霉（T.atroviride）T95菌株对立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、杨树料皮病菌（Valsa sordida）、杨树水泡溃疡病菌（Botryosphaeria ribis）、苹果树腐烂病菌（V.ceratosperma）、贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型（B.berengeriana f.sp.piricola）的重寄生作用。对峙培养的结果可观察到，多数情况下，接种后2d内木霉与病原菌接触，随后覆盖或侵入病菌菌落，抑制其生长。光学显微镜和扫描电镜观察结果表明，木霉对不同的植物病原真菌重寄生作用方法不同。可观察到木霉菌缠绕病原菌的菌丝，或沿着病原菌的菌丝平行或波浪式生长，或产生铯状分枝、吸器或附着胞吸附于病原菌的菌丝上，或穿透病原菌的菌丝，最终使病原菌的菌丝细胞原生质浓缩，菌丝断裂等现象。     

哈茨木霉T_2菌株耐药性的测定及其对几种病原菌的抑制作用研究

[目的]为提高木霉菌的生物防治效果。[方法]研究了哈茨木霉T2菌株对3种病原真菌(齐整小核菌、立枯丝核菌和香蕉枯萎病菌)的抑制作用,分析其对7种杀菌剂的耐药性,并探讨了哈茨木霉T2菌株与杀菌剂联用对立枯丝核菌和齐整小核菌的抑制作用。[结果]哈茨木霉T2菌株对病原真菌的抑制随处理时间的延长而增强。处理后120 h其对齐整小核菌、立枯丝核菌、香蕉枯萎病菌的抑制率最高,分别为63.10%、65.64%和33.84%。哈茨木霉T2菌株对多菌灵的耐药性最强,EC50为4 345.32 mg/L。在浓度为800 mg/L时多菌灵对哈茨木霉T2菌株的抑制率为13.73%,当浓度在50 mg/L以下时抑菌率几乎为0。哈茨木霉T2菌株对代森锰锌、露星较敏感。[结论]哈茨木霉T2菌株与甲霜灵联用,能明显抑制齐整小核菌、立枯丝核菌的生长。     

棘孢木霉对水稻纹枯病病原菌立枯丝核菌生物防治的研究

为了检测棘孢木霉T12对立枯丝核菌的生防效果,测定了T12对立枯丝核菌RS02菌株竞争性抑制作用,T12挥发性代谢物对RS02菌核萌发和菌丝生长的影响,T12的发酵液对RS02菌核萌发、菌丝干质量和侵染相关酶活力的影响。结果显示,培养4d的T12通过空间竞争对RS02生长产生抑制,抑制率达78.7%;T12产生的挥发性物质对菌核萌发和菌丝生长抑制率分别为10.3%、12.2%;大于10%浓度T12发酵液对菌核萌发、菌丝干质量均表现出显著或明显的抑制效果,50%浓度发酵液对菌核萌发、菌丝干质量的抑制率分别为65.7%、88.2%;培养5 d,10%、30%、50%浓度发酵液处理的RS02纤维素酶活力分别降低了17.4%、55.0%、76.8%,果胶酶活力分别降低了21.8%、53.9、69.5%。综合试验结果可知,棘孢木霉T12能够显著抑制立枯丝核菌的生长并降低其侵染能力。     

松苗猝倒病(Rhizoctonia solani Kuhn)生物防治的研究

八种供试菌和制霉菌素在平板拮抗测定中发现,23～16,49～10,绿色木霉,疣孢漆斑菌和制霉菌素对立枯丝核菌均有拮抗作用,并以23～16最明显。 苗期试验的结果表明,23～16,扩展青霉,49～10,绿色木霉防治以立枯丝核菌为主要病原的松苗猝倒病有较好的效果。23～16防效最佳,扩展青霉次之。 23～16防治松苗猝倒病的作用机制主要是阻止病原菌丝的入侵,其次是对已侵入的菌丝产生抑制作用。     

土壤中木霉的分离纯化以及对植物病原真菌的拮抗研究

从土壤中分离纯化获得3个木霉集合种:哈茨木霉(Trichoderma harzianum),绿色木霉(Trichoder-ma viride)和绿木霉(Trichoderma virens)。用这3种木霉菌分别与小麦纹枯病菌(Rhizoctonia solania)和番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)作平板对峙培养及显微观察,测定木霉菌对病原菌的抑制作用。结果表明:3种木霉菌对供试的2种病原菌抑菌强度不同,其中绿木霉对小麦纹枯病菌和番茄灰霉病菌都具有较好的拮抗作用;显微观察到木霉菌对病原菌菌丝的缠绕、使病原菌菌丝细胞质变稀薄、菌丝解体等现象。     

用木霉培养物防治温床蕃茄苗猝倒病

用玻璃纸对峙法测定了57株从西南四省区获得的木霉对蕃茄倒病原菌(Pythium sp.)拮抗作用。结果表明:有37株对 Pythium sp 有明显拮抗作用,占测定菌株的64.9%,其中又以 Trichoderma aureoviride、T.citrinoviride 和哈茨小霉(T.harzianum)居多。木霉对 Pythium sp 的拮抗作用主要表现为菌丝消解和断裂,与木霉对 Rhizoctonia solani 的拮抗现象明显不同。用一株对Pythium sp 有较强拮抗作用的哈茨木霉制成麦麸砂子培养物,防治温床育苗的蕃茄苗猝倒病获得满意的防效,与化学农药敌克松和五氯硝基苯的防效相当,甚至略优。酿热物温床有利于木霉的生长和营养物竞争作用,因此用木霉防治早春蔬菜温床育苗中猝倒病是很有希望的。     

木霉菌对棉花黄萎病菌拮抗的作用

以绿色木霉(Trichodermaviride)、康氏木霉(Trichodermakoningii),以及二株未知种名的木霉菌株(Trichodermaspp.)为供试菌,采用对峙培养测定其对棉花黄萎病菌(Verticilliumdahliae)的抑制作用,并研究了四种木霉菌产生的非挥发性代谢物对菌丝干重的影响。结果表明:在对峙培养中,木霉菌对棉花黄萎病菌均有明显抑制作用,木霉菌产生的非挥发性代谢物可以强烈抑制棉花黄萎病菌生长,明显降低其菌丝干重,并具有热稳定性。光学显微镜下观察,木霉菌丝在棉花黄萎病菌丝上平行或波浪式生长且棉花黄萎病菌丝出现细胞原生质浓缩和菌丝断裂等现象。     

木霉菌株Td31代谢产物对立枯丝核菌的拮抗作用

为了明确木霉菌株Td31代谢产物对植物病原真菌的拮抗作用,利用液体深层发酵法发酵木霉菌株Td31,过滤除菌制备代谢产物,采用生长速率法、显微观察法和盆栽试验法,研究了木霉菌株Td31代谢产物对立枯丝核菌的菌抗作用.结果表明:木霉菌株Td31的代谢产物可抑制立枯丝核菌菌丝的生长及菌核形成和萌发.其中以代谢产物稀释1倍处理的抑菌作用最强,菌丝生长抑菌率高达87.7%,并可完全抑制菌核的形成,菌核萌发抑制率为56.7%.随着木霉菌代谢产物浓度的降低其抑菌效果也随之下降,差异极显著.经木霉菌株Td31代谢产物处理的菌丝原生质浓缩、细胞质外溢、空胞化、细胞壁消解、菌丝斛体.盆栽防病试验结果表明,木霉菌株Td31代谢产物浸种可以有效地防治茄子立枯病,用发酵液原液浸种,防病效果可达69.8%.代谢产物浓度越高,防病效果越好.代谢产物经121℃处理20min后,对抑菌活性和防病效果无明显影响,代谢产物中的主要抑菌活性物质可能是耐高温的抗生素.     

芽孢杆菌两菌株对香蕉炭疽病菌的抑制作用及其机制*

 分离了两个芽孢杆菌（Bacillus sp.）菌株25-1和25-17,均对香蕉炭疽病菌（Colletotrichum musae Berket Curt.）有较强的拮抗作用。平板对峙培养出现明显的抑菌环;以凹玻片法,用两菌株培养滤液处理病原菌分生孢子,其孢子萌发率降低53%~ 69%;将细菌培养滤液和孢子悬浮液涂布于PDA平板上,则两者均能抑制香蕉炭疽病菌分生孢子的形成。普通光学显微镜和扫描电子显微镜观察显示,两菌株均可抑制香蕉炭疽病菌菌丝生长,造成菌丝分支增多,顶端和中央膨大,随着时间的延长畸变结构增加,菌丝成念珠状或菌丝分支显著增多,且顶端细胞变形膨大聚集成簇,菌丝壁穿洞,内含物质泄漏,终使细胞崩解和消融,变成球状的空泡。     

Antifungal Activity of Chitosan on Fusarium sulphureum in Relation to Dry Rot of Potato Tuber

The antifungal activity of chitosan on Fusarium sulphureum in relation to the inhibitory effect on dry rot of potato tuber was investigated. The results showed spore germination and mycelial growth of F. sulphureum were inhibited by chitosan treatment and the inhibitory effect was highly correlated with chitosan concentration used in this study. Morphological changes such as intertwisting hyphal, distortion, and swelling with excessive branching were observed by scanning electron microscopy （SEM） observation. Transmission electron microscopy （TEM） observation further indicated the ultrastructural alterations of hyphae. These changes included abnormal distribution of cytoplasma, non-membraneous inclusion bodies assembling in cytoplasm, considerable thickening of the hyphal cellular walls, and very frequent septation with malformed septa. Application of chitosan at higher concentration caused serious damage to fungal hyphae, including cellular membrane disorganisation, cell wall disruption, and breaking of inner cytoplast. New hyphae （daughter hyphae） inside the collapsed hyphal cells was often detected in the cytoplasm of chitosan-treated hyphae. In vivo tests showed that chitosan treatment at 0.5 or 1% effectively controlled the dry rot of potato tuber inoculated with a spore suspension ofF. sulphureum. However, the chitosan treatment at 1% caused phytotoxicity to potato tuber. This study suggests that the use of chitosan could be a promising handling as a natural fungicide to partially substitute for the synthetic fungicides in potato tuber.     

小麦品种对条锈病低反应型抗性的组织学和超微结构研究

 采用荧光显微镜、微分干涉显微镜和电子显微镜技术 ,系统研究了非亲和组合中小麦对条锈病低反应型抗性的组织学和超微结构特征。非亲和组合分别由小麦品种牛朱特与条中 2 8号小种、杂种 4 6与条中 2 9号小种、天选 882与条中 2 9号小种组成 ,对照亲和组合由小麦品种辉县红与条中 2 9号小种组成。观察结果表明 ,小麦条锈菌在感病品种和抗病品种上发育的组织学和超微结构特征有明显差异。病菌在抗病品种上表现为菌丝生长受抑 ,菌落形成延迟或败育 ,病菌吸器母细胞和吸器数量明显减少。寄主细胞的坏死与条锈菌的发育受阻密切相关 ,免疫组合中病菌的受抑程度高于近免疫组合的。电镜观察发现 ,在抗病品种上 ,病菌胞间菌丝、吸器母细胞、吸器在细胞和亚细胞水平 ,均发生了一系列异常变化 ,其中包括原生质的电子致密度加深、液泡增多变大、菌丝细胞壁不规则增厚、细胞器排列紊乱及解体、吸器母细胞及吸器丧失其生理功能、病菌最终畸形坏死。同时发现抗病品种受病菌侵染时可迅速产生结构防卫反应 ,新形成胞壁沉积物和吸器鞘等结构 ,以阻碍病菌进一步的扩展与发育。就小麦品种与条锈菌非亲和组合中表现出的组织学和细胞学特征与小麦抗锈性表达的关系进行了讨论。     

Histology and Ultrastructure of Incompatible Combination Between Puccinia striiformis and Wheat Cultivars with Low Reaction Type Resistance

The incompatible combinations between races of Puccinia striiformis and wheat cuitivars withlow reaction type resistance were examined by means of fluorescent microscopy, differential interference con-trast microscopy and electron microscopy. The incompatible combinations consisted of wheat cultivar Niuzhuteplus CY28, Hybrid46 plus CY29 and Tianxuan882 plus CY29, while the compatible combination was wheatcultivar Huixianhong plus CY28. The observation revealed a striking difference in the fungal development andthe host responses between susceptible and resistant wheat cuitivars following infection by the pathogen. Themain histological manifestation of the pathogen development in the resistant wheat cultivars include inhibitionof hyphal growth, delay of hyphal branching and colony formation, decrease of formation of haustorial mothercells and haustoria, and occurrence of host cell necrosis. The observation by electron microscopy demonstratedthat a series of abnormal changes occurred in intercellular hyphae, haustorial mother cells and haustoria dur-ing pathogen development in the resistant wheat cultivars. The cytoplasm became more electron-dense and vac-uoles in the cytoplasm increased in number and size. The cell walls of hyphae, haustorial mother cells werethickened irregularly. The organeiles were disorderly distributed in the cytoplasm and the haustorial mothercells and haustoria lost their physiological function. In the final stage of the pathogen development, the inter-cellular hyphae, haustorial mother cells and haustoria became necrotic and collapsed. The structural defensereactions such as formation of cell wall apposition, collar and encasement of haustorium were essentially morepronounced in the infected wheat leaves of the resistant cultivars than in the susceptible one. In addition, therelationship between the host resistance expression and the histological and cytological features occurred in theincompatible combination was discussed in this paper.