减少秋石斛在组织培养中的褐化研究

秋石斛（Dendrobium hybrida）在不同激素配比的MS培养基中,其增殖率和褐化率几乎成正比例,在原球茎增殖、芽分化和生根的3个阶段,培养基中添加AC0.5～1g/L和胰蛋白胨0.5～1g/L,能够降低褐化率。试验结果表明：秋石斛的原球茎增殖最佳培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA0.05mg/L＋椰子水50ml/L＋胰蛋白胨0.5g/L;芽分化培养基最佳为1/2MS＋IBA0.5g/L＋NAA1.0＋AC0.5g/L＋胰蛋白胨0.5g/L;生根培养最佳为改良1/2MS＋IBA1.0mg/L＋AC1.0g/L＋胰蛋白胨1.0g/L。     

杂交兰原球茎增殖及分化研究

[目的]对杂交兰原球茎的增殖及分化进行研究。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究培养基、6-BAI、BA和AC对杂交兰原球茎增殖的影响;设置几种不同培养基对原球茎的分化进行探讨。[结果]培养基和6-BA对原球茎的增殖影响不大,IBA浓度为0.1 mg/L、AC浓度为1.0 mg/L时,原球茎增殖效果最好;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好。[结论]在培养基中添加NAA有利于原球茎的分化。     

蝴蝶兰丛生芽组织培养的研究

采用1/2MS培养基,以蝴蝶兰果荚为外植体进行快速繁殖的研究.对蝴蝶兰快速繁殖各阶段的条件进行了优化,结果表明,最佳外植体为果荚,培养基的最适pH为5.8;各阶段最佳培养基浓度,诱导原球为1/2MS＋ 2.0 mg/L 6-BA＋ 0.5 mg/L NAA,原球茎增殖为1/2MS＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA,诱导原球茎分化为1/2MS＋ 1.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA,诱导生根为1/2MS＋ 0.6mg/L IBA.此外,培养基中还需加入10％的香蕉泥上清液、蔗糖2％、琼脂0.8％、活性炭2.0 g/L效果最好.     

垂花蕙兰种子无菌播种和快速繁殖

以垂花蕙兰种子为试验材料,采用种子→原球茎→完整植株的途径,研究基本培养基、植物生长调节剂、有机添加物和活性炭等关键因素对垂花蕙兰种子萌发、原球茎增殖、分化和生根等各培养阶段的影响,探讨垂花蕙兰无菌播种和快速繁殖的关键技术。结果表明,种子在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋蔗糖20 g·L-1 培养中培养60 d可形成原球茎,种子萌发数可达90粒;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 1.0 mg·L-1 ＋ NAA 0.5 mg·L-1 ＋ KT 1.0 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 培养基上增殖效果好,增殖系数为6.8;原球茎在1/2MS ＋ 6-BA 0.5 mg·L-1 ＋ NAA 0.1 mg·L-1 ＋ AC 0.5 g·L-1 ＋ 蔗糖20 g·L-1 上培养分化效果好,分化率高达89.2%;幼苗在1/2MS ＋ IBA 1.0 mg·L-1 ＋50 g·L-1 土豆泥＋蔗糖20 g·L-1 上培养30 d可生根,生根率为94.5%,苗高可达5.6 cm。     

番木瓜实生苗茎段组培快繁条件的优化

【目的】探讨不同激素对番木瓜实生苗茎段分化的影响,为提高番木瓜繁育效率提供参考依据。【方法】番木瓜种子采用直接接种、无菌水处理18 h后接种等4种方式预处理获得最佳种子处理方式;再以获得的实生苗茎段为外植体进行芽诱导培养基、增殖壮苗培养基、生根培养基的优化筛选。【结果】经6-BA 1.0 mg/L与GA31.0 g/L等体积混合液浸泡18 h后接种的番木瓜种子发芽率高达93.3%,接种培养后污染率低至3.3%;适合番木瓜茎段芽诱导培养基为MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖壮苗培养基为MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L,增殖系数最高达4.3,生根诱导培养基为MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L。【结论】MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L、MS＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖40.0 g/L和MS＋IBA 1.0 mg/L＋KT 0.05 mg/L＋AC 2.0 g/L分别作为番木瓜实生苗茎段芽诱导、增殖壮苗和生根诱导培养基,可提高番木瓜实生苗茎段组培育苗效率。     

铁皮石斛茎段类原球茎的诱导及植株再生

以铁皮石斛幼嫩的带节茎段为外植体,通过研究植物生长调节剂对类原球茎诱导、增殖和分化的影响,筛选出适宜铁皮石斛类原球茎植株高效再生的条件。结果表明:类原球茎诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+土豆泥60 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.5 g/L,茎段接种45 d后,类原球茎诱导率为97.78%;类原球茎增殖和分化的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,培养30 d,增殖倍数为7.94,培养至60 d,丛生芽诱导率为97.33%;再生苗在MS+NAA 0.5 mg/L培养基中培养30 d,生根率达到100%。     

基于朱顶红愈伤组织途径诱导形成原球茎的研究

[目的]研究通过愈伤组织途径诱导形成朱顶红原球茎.[方法]以朱顶红(Hippeastrum vittatum)鳞茎作为外植体,通过愈伤组织途径诱导形成原球茎,并建立再生植株.[结果]诱导愈伤组织最佳培养基为MS +6-BA 2.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L,诱导率达到80％;诱导原球茎增殖的培养基为MS +6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,诱导原球茎系数达到15 ～20个;诱导原球茎生长最佳培养基为1/2MS+ 6-BA 4.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ KH2PO480 mg/L+TIBA 0.5 mg/L;诱导原球茎生根培养基为1/2MS+ IBA0.5 mg/L,生根率可达100％.[结论]建立了朱顶红再生植株,实现了朱顶红快速繁殖目标,为朱顶红的种苗生产提供技术支撑.     

纹瓣兰无菌播种快繁技术研究

以纹瓣兰[Cymbidium aloifolium (L. ) Sw]的种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株的途径进行繁殖.结果表明:种子在MS+6-BA 0. 2 mg/L+AC 1.0 g/L+蔗糖30 g/L培养基培养30 d左右,可形成原球茎;原球茎在1/2MS+6-BA 4 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L的培养基上增殖效果最好;原球茎接种于1/2MS+6-BA 0.1 mg/L +NAA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上培养4周后,再转入1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 2.0 g/L+香蕉泥80 g/L的培养基上培养30 d,可诱导形成完整的植株.     

地涌金莲的离体培养与快速繁殖技术研究

[目的]研究地涌金莲（Musella lasiocarpa）的离体培养与快速繁殖技术。[方法]以地涌金莲吸芽为外植体,诱导不定芽分化、增殖和生根。[结果]适宜不定芽增殖的培养基为改良MS＋6-BA3.0mg/L＋NAA0.3mg/L＋AC2.0g/L＋Vc0.1g/L＋蔗糖30.0g/L＋琼脂8.0g/L,增殖系数为4.89;适宜生根的培养基为1/4改良MS＋IBA0.5mg/L＋蔗糖20.0g/L＋琼脂8.0g/L,生根率达100.00%,平均生根数4.60条,平均根长3.40cm;幼苗移栽成活率达91%。[结论]为大面积推广应用地涌金莲奠定了基础。     

三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎,萌发率超过80％以上;诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4．5;原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后,再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100．0％,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖研究

[目的]研究虎雪兰与朱砂兰、蕙兰正反交育种及种子无菌萌发与增殖.[方法]以虎雪兰、朱砂兰、蕙兰‘绿春兰’为亲本,采用正反交杂交法进行育种试验得到果实,对成熟的种子进行无菌萌发试验,并对种子萌发获得的小苗进行增殖研究.[结果]朱砂兰为母本获得杂交种子无菌萌发最适培养基为：1/2MS ＋0.5 mg/L BA ＋0.2 mg/L NAA ＋3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为：1/2MS＋1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L KT ＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.蕙兰‘绿春兰’为母本获得种子萌发最适培养基为：1/2MS＋ 1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA＋ 3％花宝1号＋0.05％碳粉;最佳增殖及生长培养基为1/2MS＋ 1.5 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/LNAA ＋0.5 mg/L KT＋3％花宝4号＋0.05％碳粉.[结论]该方法为虎雪兰的种质资源栽培提供了理论依据.     

杉木茎段不定芽诱导及植株再生条件筛选

【目的】探索广西杉木快繁技术,为杉木组织培养和种苗供应提供参考依据。【方法】以杉木优良树种基部枝条为试验材料,进行茎段外植体消毒、不定芽诱导及植株再生研究。【结果】以75％酒精处理30s＋0．1％升汞消毒6min的效果较理想,污染率为30％;初代培养基为1／2MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA0．6mg／L,第8d即有芽萌动,诱导率可达47％;继代培养基I／2MS＋IBA0．3nlg／L＋6-BA0．4mg,L中加入蔗糖30g／L,25d腋芽增殖倍数可达3．4倍;1／4MS＋IBAO．15mg／L＋NAA0．075mg／L对杉木生根诱导效果较好,生根率为52％。【结论】,杉木外植体用75％酒精和0．1％升汞消毒6min效果较理想,适当减少培养基中矿质元素有利于杉木外殖体芽的诱导和试管苗的增殖生长,NAA可促进试管苗生根。     

杂交相思组织培养研究初报

【目的】筛选杂交相思组织培养不同培养阶段的培养基配方,为实现杂交相思工厂化育苗提供技术参考。【方法】用杂交相思嫩茎为外植体,探究生长调节剂6-BA、NAA、IBA对其诱导出芽、继代增殖和诱导生根的效果。【结果】在不添加6-BA的情况下,添加0.2mg/LNAA时芽诱导率为60.0%,当添加0.2mg/L的6-BA后,诱导率为42.0%。当NAA为0~0.5mg/L时,随着6-BA的增加,增殖系数随之增加,6-BA为0.8mg/L时,增殖系数为4.2;当6-BA为1.0mg/L以上时,继代苗的增殖系数为1.0。以改良MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下添加0.5、1.0mg/L的IBA生根诱导率分别为17.5%、24.0%;以改良1/2MS为基本培养基,在NAA1.0mg/L的条件下,添加0.5mg/L的IBA生根率为91.7%,当添加IBA为1.0mg/L时,生根率降到50.0%;生根苗移栽基质以黄心土与河沙或蛭石混合较好,移栽成活率在85.0%以上。【结论】改良MS＋NAA0.2mg/L培养基是较适宜芽诱导的培养基;改良MS＋6-BA0.8mg/L＋NAA0.5mg/L培养基较利于继代苗的生长;改良1/2MS＋NAA1.0mg/L＋IBA0.5mg/L培养基较改良MS培养基有利于诱导生根。     

红花白千层茎段离体培养研究

【目的】对红花白千层进行离体培养,为红花白千层的工厂化育苗提供技术支持。【方法】以红花白千层茎段为外植体,探讨不同激素组合对不定芽诱导、丛生芽增殖、生根诱导的影响。【结果】带茎段的萌发腋芽进行增殖培养,可直接诱导形成不定芽,并可形成丛生芽。在MS培养基中添加6．BA0．1～2．0mg／L＋NAA0．01mg／L和6．BA0．1-1．0mg／L＋IBA0．01mg／L组合,芽增殖系数均呈先升高后降低的趋势;培养基MS＋6．BA0．5mg／L＋IBA0．01mg／L最适宜芽增殖,增殖系数达2．2倍。在1／2MS培养基中添加0．1-0．5mg／L的NAA或IBA后,芽苗生根率明显提高,分别为100．0％和56．0％-90．0％,平均生根数为12．6～14．8和3．1-4．8条,以NAA的生根效果明显优于IBA。适宜的生根培养基为1／2MS＋NAA0．1～0.3mg／L。在培养基中添加300mg／L活性炭均不利于芽增殖和生根诱导。以泥炭为栽培基质,采用常规管理的试管苗移植成活率可达99．0％。【结论】茎段离体培养是红花白千层快速繁殖的有效途径。     

钩状石斛组织培养技术研究

[目的]解决钩状石斛的快速繁殖和提高组培苗成活率。[方法]在基本培养基MS无菌播种下,获得大量无菌幼苗,增殖过程分别采用不同配比的植物生长激素6-BA和NAA组合,筛选出钩状石斛无菌幼苗增殖最佳浓度配比;壮苗生根培养过程中采用不同浓度的植物生长激素IBA和IAA,观察不同因素对生根的影响。移栽技术研究,采用3种不同基质花生壳、刨花和树皮椐末混合,观察不同基质对钩状石斛组培生根苗移栽成活率的影响。[结果]钩状石斛种子萌发最佳配方:MS+6-BA 0.5 mg/L+香蕉10%+白糖20 g/L+琼脂5 g/L+AC 2 g/L。钩状石斛幼苗增殖最佳培养配方:MS+6-BA2 mg/L+NAA 1 mg/L+香蕉10%+白糖20 g/L+琼脂5 g/L。钩状石斛壮苗生根最佳培养配方:1/2MS+IBA 2 mg/L+香蕉10%+白糖20 g/L+琼脂5 g/L+AC 2 g/L。3种基质均对钩状石斛组培苗根生长情况和苗的成活率都有明显的促进作用,其中花生壳为最适宜基质。[结论]该研究为以后工业化快速生产钩状石斛,及钩状石斛的合理开发和可持续利用提供参考。     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。