鸽新城疫灭活疫苗的研制及免疫效果研究

利用近年来分离到的鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株进行鸽新城疫油乳剂灭活疫苗的研制,并对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验,结果表明制备疫苗的各项指标均符合生物制品通则的要求,对疫苗的最小免疫剂量、抗体产生及免疫持续期、与同类产品的交叉攻毒保护对比效果进行了进一步试验,结果表明疫苗的最小免疫剂量为0.15 mL/只,疫苗以0.3 mL/只免疫剂量进行一次免疫,免疫持续期为3个月,以0.3 mL/只免疫剂量进行二次免疫,免疫持续期可达6个月.交叉攻毒保护对比试验结果表明所制备的鸽新城疫灭活疫苗对鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株和鸡新城疫病毒北京株(CVCC AV1611)的攻毒保护效果均优于鸡新城疫(La Sota株)灭活疫苗.     

新城疫F－Ⅶ型－－鹅源禽副粘病毒灭活疫苗的研制与免疫效力试验

用GPV-SF02株作为抗原液,经福尔马林灭活后,与油佐剂混合,制成SF02灭活疫苗。同时将ND灭活疫苗、ND弱毒疫苗和SF02灭活疫苗按不同剂量分别免疫川白鹅和AA鸡,结果用1羽份SF02灭活疫苗免疫的鹅与鸡,能100%抵抗SF02株和F48E9株的攻击;用1羽份ND灭活疫苗免疫的鸡能100%抵抗F48E9株的攻击,而免疫的鹅对F48E9株的抵抗力为60~80%;用1羽份ND弱毒疫苗免疫的鹅,其保护率在0~50%,免疫的鸡则有100%的保护率。     

VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒灭活疫苗的增效作用研究

试验旨在探究VA5免疫增强剂对鸽新城疫病毒（NDV）灭活疫苗（ND4416株）的免疫增效作用。选取160只健康鸽随机分为4组：ND4416株灭活疫苗组（NDV组）、ND4416株灭活疫苗与免疫增强剂（VA5）混合组（NDV+VA5组）、La Sota灭活疫苗组（La Sota组）及生理盐水空白对照组（C组）,进行免疫效力及免疫持续期试验。采用血凝抑制试验检测各组鸽免疫后不同时间点的血清抗体效价,结果显示,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗血清抗体水平（P<0.05）。脾脏淋巴细胞转化试验结果显示,VA5能够有效刺激免疫鸽的淋巴细胞转化。在免疫后第30、90、180天,各组鸽子采用ND4416株进行攻毒试验,结果显示,NDV+VA5组在3个时间点的攻毒保护率均为100%,均高于La Sota组。免疫持续期试验结果显示,NDV+VA5组血清抗体水平在免疫后第21天达峰值11.20log₂,第180天仍能达到7.50log₂,攻毒保护率达100%,表明VA5免疫增强剂可延长鸽新城疫疫苗的免疫效力持续期至180 d。攻毒后体外排毒检测结果表明,VA5免疫增强剂能够缩短攻毒后鸽的体外排毒周期,减少体外排毒。综上,VA5免疫增强剂能够显著提高鸽NDV灭活疫苗的免疫效果,为研制效果更好的鸽NDV疫苗提供了基础依据,同时也为免疫增强剂的应用增加了试验数据。     

禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗与弱毒活疫苗免疫效果的比较研究

采用28日龄SPF鸡,对禽脑脊髓炎油乳剂灭活疫苗及弱毒活疫苗进行了免疫效果评估。抗体检测结果表明,疫苗免疫后21日,油乳剂灭活疫苗免疫组抗体水平及抗体转阳率优于弱毒活疫苗免疫组。攻毒保护试验结果表明,禽脑脊髓炎油乳剂灭活苗及弱毒活疫苗均具有良好的免疫保护性,对禽脑脊髓炎病毒强毒VR株的保护率分别为100%、90%。综上所述,灭活疫苗和活疫苗均可有效预防禽脑脊髓炎。     

鸡新城疫油乳剂灭活苗的试验研究

利用Laso ta系鸡新城疫病毒(NDV)接种无特定病原(SPF)鸡胚获取的含毒尿囊液,加入一定比例的矿物油佐剂制成鸡新城疫油乳剂灭活苗,和Laso ta 系弱毒疫苗联合使用免疫不同日龄不同品种的鸡群。获得了抗体滴度上升均匀在体内持续时间长,抗ND 强毒攻击的满意效果。疫苗效价高,免疫原性好,免疫保护率明显高于应用ND—Ⅰ系疫苗免疫的鸡群。对首免用Laso ta 系活苗和油乳剂灭活苗皮下注射0.1ml 的35日龄、70日龄肉仔鸡攻以ND 强毒,保护率为百分之百。对在120日龄免疫用新城疫油苗肌肉注射0.5ml 的蛋用种鸡在免疫后11个月以ND 强毒进行攻击,保护率亦为百分之百。     

禽四种细菌病多联菊粉及油乳剂灭活疫苗的研究

为探讨菊粉对四种常见禽细菌病灭活疫苗的佐剂效应,试验将禽多杀性巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡志贺氏菌和鸡绿脓杆菌分别培养至浓度为2×10~(10)cfu/mL,按等比例混合后以终浓度为0.35%甲醛37℃灭活24 h,分别制备油乳剂和菊粉多联灭活疫苗,以动物试验检测其安全性和效力。结果表明:两种灭活疫苗均具有良好的安全性,免疫后抗体水平均呈现上升趋势,且菊粉疫苗组稍高于油乳剂疫苗组。攻毒试验结果显示两种疫苗均可为试验动物提供80%以上的保护率,且菊粉疫苗组略优于油乳剂疫苗组,说明菊粉具有较好的免疫佐剂效应。     

鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联灭活疫苗的研究

利用Page A型、B型、C型副鸡禽杆菌和新城疫病毒La Sota株,研制鸡传染性鼻炎(三价)和新城疫二联油乳剂灭活疫苗。用3个批次疫苗进行单剂量(0.5mL/次)3次接种和大剂量(2.0mL)单次接种的安全性试验、SPF鸡的免疫效力试验、商品鸡的免疫持续期试验和疫苗的保存期试验。结果表明,3批疫苗对试验鸡安全无副作用;免疫接种SPF鸡只30d后对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥80%,用20μL/只疫苗免疫接种SPF鸡21d后新城疫的平均HI抗体24;商品鸡42日龄首免,110日龄二免,二免后9个月对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,对新城疫病毒强毒100%保护;用4℃~8℃保存12个月和15个月的3批疫苗进行了SPF鸡的近期免疫效力试验,结果对A、B、C型副鸡禽杆菌攻毒的保护率≥70%,用20μL/只疫苗免疫SPF鸡,免疫接种后21d新城疫病毒的平均HI抗体24,对新城疫病毒强毒的攻毒保护率70%。说明研制的疫苗安全有效。     

鸽新城疫(ND)灭活疫苗安全性试验研究

用四批鸡胚尿囊液制备的ND油乳剂(Ⅰ号)灭活疫苗及鸡胚尿囊液、尿囊膜、羊膜、羊水混合制备的油乳剂(Ⅱ号)灭活疫苗和用鸡胚尿囊液制备的ND蜂胶佐剂(Ⅰ号)灭活疫苗及鸡胚尿囊液、尿囊膜、羊膜、羊水混合制备的蜂胶佐剂(Ⅱ号)灭活疫苗分别进行安全性试验观察,15d生长曲线表明,不影响鸽的生长,甚至有提高的趋势.     

禽Ⅰ型副粘病毒各种禽源分离株的免疫原性

分别制备了源于鸡、鹅、鸽、鹌鹑、孔雀、画眉鸟、珍珠鸡的禽型副粘病毒(APMV-1)7个强毒分离毒株和商品弱毒疫苗株克隆30(C30)的灭活油乳剂苗,并用这8种灭活油乳剂苗和C30株的活疫苗分别在鸡、鹌鹑、鹅和鸽进行了免疫及交叉攻毒保护试验。免疫后(PI)分别测定试验禽血清的新城疫病毒(NDV)血凝抑制(HI)抗体的滴度,并于PI 5周用强毒株进行攻毒。结果表明,鸽的HI抗体几何平均滴度(MAT)为9.00~10.0 log2,鸡的为7.13~7.63 log2,鹌鹑的为5.00~5.13 log2,鹅对灭活油乳剂苗的为5.63~6.38 log2、而对C30株活疫苗的仅为3.38log2;除了C30株活疫苗免疫鹅提供的保护率比较低(20%)外,8种油乳剂苗都能对同源或者异源强毒株的攻毒提供比较高的保护率(66.75%~100%)。研究结果表明,经典疫苗株C30与近年来从各种不同禽类分离的致病性APMV-1野毒株之间、不同禽源分离株之间的抗原性,以及各种不同禽源分离株的之间的免疫原性差异均不大。     

鸽新城疫油乳剂灭活疫苗免疫期的试验研究

用四批鸡胚尿囊液制备的鸽新城疫(ND)油乳剂灭活疫苗(0601、0602、0603、0604)分别免疫30日龄非免疫鸽,不定期采血,连续检测HI抗体的动态变化。这四批疫苗免疫后9 d均可检测出抗体,21 d达到最高峰(平均为9.1 log2),6个月的平均HI抗体滴度均在6.1 log2以上。因此,该苗对鸽的ND免疫保护期至少为6个月。。     

鸡大肠杆菌病和新城疫二联油乳剂灭活疫苗研制与应用

本研究采用致病性大肠杆菌O1,O2,O78 三个血清型菌株接种适宜培养基 ,收获菌液 ,经浓缩后 ,与灭活的鸡新城疫Lasota株鸡胚尿囊液混合 ,制备成油乳剂二联灭活疫苗。应用二联灭活疫苗免疫18日龄鸡 ,0.25ml/只 ,皮下注射 ,免疫后21天攻毒测保护力 ,新城疫保护率100 %,大肠杆菌病保护率80 %～100 %,免疫持续期可达4个月 ,产蛋鸡在开产前2～3周免疫二联苗0.5ml/只 ,免疫后6个月ND保护率为100 %,大肠杆菌病保护率为80 %,免疫期可达8个月。安全试验结果 :18日龄雏鸡0.5ml/只 ,120日龄成鸡2ml/只 ,试验鸡全部健活。疫苗在4～8℃保存期为12个月 ,10℃保存期为4个月 ,1998～1999年在全省不同地区、不同品种鸡应用20万羽份 ,取得良好的应用效果     

4型禽腺病毒HLJ1701株灭活疫苗的研制

利用4型禽腺病毒HLJ1701株进行灭活疫苗的研制,并对疫苗的免疫效果进行评价,为家禽4型禽腺病毒的防控提供数据及参考。将HLJ1701株用灭菌生理盐水作10~4倍稀释后,接种9日龄SPF鸡胚,37℃孵育72 h后收获感染鸡胚尿囊液,经甲醛灭活后,加白油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗,对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验。结果显示,制备的3批4型禽腺病毒灭活疫苗(HLJ1701株)均为油包水型,黏度均在50 cP以内,对3批疫苗取样,样品经3000 r/min离心15 min,管底无水相析出。安全性试验结果显示,将疫苗按1 mL/只超剂量接种3周龄SPF鸡,试验鸡在观察期内全部健活,未出现局部或全身不良反应,表明疫苗对SPF鸡具有良好的安全性;免疫效力及攻毒保护试验结果显示,用疫苗按0.2 mL/只的剂量免疫接种3周龄SPF鸡1次,免疫接种后21d试验鸡血清中HLJ1701株的抗体平均效价可达2~8以上,使用4型禽腺病毒(HLJ1701株)接种0.2 mL/只(100 LD_(50))对免疫鸡进行攻毒,疫苗对免疫鸡的保护率均为100%。研究表明,实验室条件下研制的4型禽腺病毒(HLJ1701株)灭活疫苗的各项指标均符合标准。     

IBD油乳剂灭活疫苗对商品蛋鸡的免疫效果研究

1、15日龄时接种 IBD 弱毒疫苗后于25日龄时再接种IBD 油乳剂灭活疫苗的雏鸡,均可产生良好的免疫应答;15日龄接种弱毒疫苗比1日龄接种产生的抗体效价高,维持时间长;只在15日龄接种一次灭活疫苗的雏鸡抗体水平低,维持时间短。商品蛋鸡 IBD 最佳免疫程序为,15日龄接种 IBD 弱毒疫苗,25日龄再接种油乳剂灭活疫苗。     

鸡黄病毒灭活疫苗的研制及免疫效果研究

鸡黄病毒FQ—C1株经SPF鸡胚连续传40代后,检测其尿囊液毒的ELD50达到1×10^-4.33／0．1mL。将该病毒第40代SPF鸡胚液毒灭活后制备成油乳剂灭活疫苗。SPF雏鸡和蛋鸡安全性试验表明,该疫苗的安全性好,无不良影响。以该疫苗一次单剂量（1mI／只）免疫开产蛋鸡,28d后攻以鸡黄病毒强毒测定疫苗的保护效果,结果显示疫苗免疫组较未免疫组蛋鸡的产蛋率高出75．8％,产蛋保护率达93．2％以上。试验表明,本研究制备的鸡黄病毒灭活疫苗安全性好,且具有良好的免疫原性,免疫后可有效抵抗鸡黄病毒所致的产蛋骤降。     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

表达H9亚型禽流感病毒血凝素的重组HVT活疫苗免疫效力评价

为在SPF鸡和商品蛋鸡上评价一株表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素基因的重组HVT(r HVT-H9)活疫苗的免疫保护效力,试验将1日龄SPF鸡分为r HVT-H9疫苗组、灭活疫苗组和空白对照组,共3组(n=60,每组20只);1日龄商品蛋鸡除上述三组外另增加r HVT-H9疫苗与禽流感灭活疫苗(H9亚型,F株)联合免疫组,共4组(n=80,每组20只)。免疫后,通过血凝抑制试验检测血清中针对H9亚型AIV的抗体效价;并于免疫后28 d,将全部试验组及空白对照组以H9亚型AIV F株进行静脉注射攻毒。攻毒后第3、5天分别采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况;并于攻毒后第10天将全部试验鸡进行剖检。结果显示:SPF鸡r HVT-H9疫苗组能达到100%免疫保护,而灭活疫苗组仅能达到80%保护;商品蛋鸡r HVT-H9疫苗组保护率为40%,灭活疫苗组保护率为70%,但联合免疫组能达到100%的免疫保护。因此,该重组病毒r HVT-H9疫苗可作为H9亚型禽流感的有效疫苗候选株,与现有商品化禽流感H9亚型灭活疫苗联合使用,效果更佳,为其防控提供一定的技术支持。     

ND不同免疫程序诱导鸡体的免疫动态比较

用鸡新城疫（ND）IV系，I系冻干苗，由NDV强毒制成的蜂胶灭活疫苗、油乳灭活苗，组合成不同的免疫程序对鸡群分别于20，27，35日龄进行免疫，以探讨ND疫苗弱毒苗和灭活苗诱导鸡体的免疫动态，为临床上合理地安排ND的免疫程序提供理论依据。试验结果表明：弱毒苗加油乳剂苗诱导免疫应答效果较为优越，也较为实用。     

鸡传染性喉气管炎油乳剂灭活疫苗的研究

分别将3株鸡传染性喉气管炎病毒(标准强毒株J株、山东分离株N株和L株)经甲醛灭活后制成油乳剂灭活疫苗。免疫效力试验结果表明，以N株鸡传染性喉气管炎病毒制备的油乳剂灭活疫苗免疫效果较其它几种疫苗好，免疫鸡AGP抗体阳性率高达83％，免疫保护率高达100％。     

重组新城疫病毒HN与F蛋白免疫保护作用的初步研究

95只1日龄SPF鸡随机分成5组,1～4组分别于10日龄接种φT4、φT4-Z1-HN、φT4-Z1-F、φT4-Z1-HN φT4-Z1-F油乳剂疫苗,第5组接种ND弱毒疫苗,25日龄加强免疫一次.结果表明,重组HN和F蛋白均能诱导ND抗体产生,但抗体水平显著低于用弱毒疫苗免疫的第5组.60日龄时用100LD50NDV强毒株攻毒,第1组鸡100%发病和死亡,φT4-Z1-HN和φT4-Z1-F免疫组的死亡率分别为50%和15.8%;用φT4-Z1-HN φT4-Z1-F和ND弱毒疫苗免疫的第4、5组鸡无一死亡.     

鸡新城疫/传染性支气管炎二联油乳剂 灭活疫苗试验研究报告(Ⅱ)——疫苗制备及其免疫效果试验

根据NDV、IBV二种病毒混合毒种的最适稀释比例,将混合毒种接种9~10日龄鸡胚尿囊腔内(简称同胚培养),使接种鸡胚96h二种病毒毒价同时达到高峰,0.1ml尿囊液含:NDV≥10~8EID_(50)、IBV≥10_7EID_(50).收获同胚培养的胚毒,制备油乳剂灭活疫苗.用三批疫苗分别免疫18日龄雏鸡,免疫后4周二联疫苗的有效抗体分别为:ND血凝抑制抗体(HI)≥1:16、IB中和抗体(VNT)≥1:8,抗体持续时间可达16周;攻毒保护率分别为:ND 8/8、IB 6/8以上,获得十分理想的效果.