牡荆水提物对蓖麻油腹泻小鼠的治疗作用研究

【目的】研究牡荆水提物对蓖麻油致小鼠腹泻的治疗作用,评价牡荆提取物的抗腹泻功效,为开发新型天然药物或植物提取物饲料添加剂提供理论依据。【方法】选取48只18～22 g SPF级昆明小鼠,随机分为6组：对照组、模型组、洛哌丁胺组及牡荆水提物高、中、低剂量组,每组8只,雌雄各半。牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠灌胃16、8、4 g/kg BW牡荆水提物,对照组和模型组小鼠灌胃等剂量的生理盐水,洛哌丁胺组小鼠灌胃5 mg/kg BW洛哌丁胺,连续灌胃5 d。第5天给药后0.5 h,模型组、洛哌丁胺组及牡荆水提物高、中、低剂量组小鼠灌胃0.5 mL蓖麻油灌胃造模,对照组灌胃等量生理盐水。造模后的小鼠单笼单只饲喂。连续4 h观察小鼠腹泻情况,4 h后小鼠采血并断颈处死,每组随机取4只小鼠的肝脏、小肠各两份,一份制作组织切片;另一份用以提取RNA,检测空肠通道蛋白和肝脏急性期蛋白mRNA表达情况。【结果】模型组小鼠腹泻评分和腹泻指数均极显著高于对照组(P<0.01),说明蓖麻油腹泻模型造模成功。与模型组相比,洛哌丁胺组和牡荆水提物高剂量组小鼠腹泻评分和腹泻指数均极显著或显著降低(P<0....     

加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠疗效、免疫及肠道菌群的影响

为了研究加味理中汤方(干姜、党参、白术、甘草加茯苓、山药、木香、桂枝、砂仁)对脾虚泄泻小鼠疗效、免疫及肠道菌群的影响,试验将72只小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、泄泻模型组、恩诺沙星组及中药低、中、高剂量组,空白对照组小鼠灌胃生理盐水,其余各组小鼠按体重灌胃30 g/kg番泻叶水提物(每天1次,连续9 d)建立脾虚泄泻模型,试验第10天,空白对照组和泄泻模型组小鼠灌胃生理盐水,中药低、中、高剂量组及恩诺沙星组分别按体重灌胃6.5,13,26 g/kg中药提取物及24.15 mg/kg恩诺沙星水溶液,连用3 d。试验期间每日测定小鼠体重、采食量及饮水量,计算日均采食量和日均饮水量并观察腹泻情况和一般状态,统计稀便率、稀便级及腹泻指数;试验结束后检测血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM质量浓度,统计胸腺指数、脾脏指数及结肠粪便中大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌的菌落数。结果表明：治疗前,与空白对照组比较,其余各组小鼠出现脾虚症状,且稀便率、稀便级和腹泻指数均极显著升高(P<0.01),日均采食量及体重均极显著下降(P<0.01),表明脾虚泄泻模型建立成功。治疗结束后...     

外源MDR鼠伤寒沙门菌对健康小鼠肠道菌群的影响

旨在探究外源多重耐药(multidrug resistant, MDR)鼠伤寒沙门菌进入健康小鼠肠道后对其肠道菌群的影响。将25只小鼠随机分为质控组(C)、灌胃1 d组(G1)、灌胃3 d组(G2)、灌胃5 d组(G3)和灌胃7 d组(G4),每组5只。将携带耐药基因的猪源耐药鼠伤寒沙门菌按10⁶ CFU·mL^-1的浓度对除质控组外的试验组小鼠进行灌胃。分别采集灌胃前第0天和灌胃结束后1～14 d的新鲜粪便样本，采用高通量测序技术分析灌胃后小鼠粪便中肠道菌群多样性变化。结果显示：1)与C组比较，各试验组在灌胃结束后临床上均表现为轻微腹泻，从粪便样本中分离出与灌胃菌同一型的MDR鼠伤寒沙门菌，且分离率差异不大；2)试验组小鼠肠道菌群Alpha多样性中Chao1、Goods＿coverage和Observed＿species指数明显高于C组；3)G2组、G3组和G4组在门及属水平物种丰度上变形菌门(Epsilonbacteraeota)和螺杆菌属(Helicobacteraceae)相对丰度显著低于C组(P<0.05)。在LEfSe分析上变...     

中药联合益生菌对大肠杆菌致小鼠腹泻保护机制研究

【目的】前期研究表明中药联合益生菌对致病性大肠杆菌所致小鼠腹泻具有明显的保护作用,本研究旨在进一步探讨中药联合益生菌对致病性大肠杆菌致小鼠腹泻的保护机制。【方法】选取小鼠60只,随机分为5组,空白组、模型组、中药组、益生菌组及中药联合益生菌组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠通过腹腔注射1×10⁷CFU/kg大肠杆菌分离株菌悬液建立小鼠腹泻模型,空白组腹腔注射等量生理盐水。中药组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖),益生菌组灌胃给予枯草芽孢杆菌悬液(2×10⁸CFU/kg),中药联合益生菌组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖)与枯草芽孢杆菌悬液(5×10⁷CFU/kg)的混合液,1次/d,连续给药7 d。HE染色观察小肠组织病理学变化,扫描电镜观察小肠组织超微结构变化,ELISA法检测小鼠小肠匀浆和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,RT-PCR法检测小肠组...     

酸马奶源酵母菌抗菌复合物灌胃剂量的筛选

为了筛选酸马奶源酵母菌抗菌复合物的最优灌胃剂量,试验采用乙酸乙酯提取法萃取酸马奶源酵母菌抗菌复合物,高效液相色谱法和增强型BCA蛋白检测试剂盒法测定其主要组分。选取昆明系小鼠150只,随机分为15组,每组10只。空白对照组和阴性对照组小鼠灌胃无菌PBS 7 d;阳性对照组小鼠灌胃环丙沙星;抗菌复合物组小鼠灌胃高(500 mg/kg)、中(250 mg/kg)、低(125 mg/kg)剂量的抗菌复合物;除空白对照组外,其他各组于第4天注射大肠杆菌(E.coli)O_8菌悬液。观察小鼠患病症状,采集各组小鼠小肠组织,H.E.染色后观察病理切片,并记录各组小鼠存活率。结果表明:在p H值为2.0和8.0条件下获得酸马奶源马克斯克鲁维酵母菌(K.marxianus)和酿酒酵母菌(S.cerevisiae)的4种抗菌复合物K2、K8、S2和S8,主要成分为有机酸和毒素蛋白。阴性对照组小鼠感染E.coli O_824 h后出现明显患病症状;36~72 h期间小鼠患病症状更加严重,死亡小鼠增多。注菌72 h后阴性对照组小鼠小肠组织损害严重;阳性对照组和K2低剂量组小鼠小肠组织较完整;K2高剂量和中剂量组小鼠小肠组织形态有所好转,但仍有少量上皮细胞脱落。K2、S2、S8低剂量和K8中剂量组小鼠存活率较高。说明低剂量125 mg/kg为酸马奶源酵母菌抗菌复合物的最优灌胃剂量。     

低聚半乳糖对小鼠肠道菌群的调节作用

通过体内和体外试验,分析低聚半乳糖对小鼠肠道菌群的调节作用。体外试验中将低聚半乳糖作为培养基碳源,研究不同添加剂量低聚半乳糖对大肠埃希菌和乳酸杆菌的生长影响;体内试验以小鼠为模型,将小鼠随机分组,试验组连续14d灌胃低聚半乳糖,在第0、7、14天采集小鼠新鲜粪便进行菌群培养,观察菌群数量的变化。研究表明,体外试验中30g/L低聚半乳糖对大肠埃希菌抑制作用最强;体内试验中低聚半乳糖可使小鼠粪便中乳酸杆菌数量增加,大肠埃希菌和产气荚膜梭菌数量减少。试验结果表明,低聚半乳糖具有调节小鼠肠道菌群平衡的作用。     

乳酸菌素联合包膜丁酸钠对断奶仔猪腹泻的作用

为了探究乳酸菌素与包膜丁酸钠共添加对仔猪肠道菌群、生产性能、肠道结构及腹泻情况的影响,将90头体重7.53kg±0.49kg的28日龄断奶仔猪随机分为3组,A组为对照组,饲喂基础日粮;B组为乳酸菌素组,饲喂基础日粮+1.5g/kg乳酸菌素;C组为共添加组,饲喂基础日粮+0.3g/kg包膜丁酸钠1.5g/kg乳酸菌素,试验期28d。试验期间,检测断奶仔猪肠道中菌群种类及数量的变化,同时监测并记录各试验组仔猪的日采食量、日增重及仔猪的腹泻情况。结果显示,试验组仔猪肠道有害菌的含量与对照组相比明显降低(P0.05);两个试验组的平均日增重显著高于对照组(P0.05),且呈现共添加组乳酸菌素组对照组的趋势;并且乳酸菌素组、共添组的料肉比均低于对照组且差异显著(P0.05)。仔猪基础日粮中同时添加乳酸菌素和包膜丁酸钠后,腹泻率与腹泻指数分别降低42.72%与46.15%。观察试验后仔猪肠道形态,发现共添加组仔猪肠道形态更为完整,绒毛更长更粗壮。表明仔猪基础日粮中同时添加乳酸菌素与包膜丁酸钠,能够显著提高仔猪的生产性能,保护肠道益生菌的含量,维持肠道完整形态,并降低仔猪腹泻率。     

不同ZEA水平对驴肠道微生物、卵巢发育以及粪便移植后小鼠卵巢细胞凋亡的影响研究

试验旨在研究玉米赤霉烯酮（ZEA）对驴肠道微生态的重塑及肠道微生物结构对其卵泡发育的影响。选取24头母驴,随机分成3组,对照组和试验组分别灌服100μL浓度为0、500、1 000μg/（kg·d）的ZEA溶液,连续40 d。饲喂结束后,分别采集驴盲肠内容物以及驴卵巢用于16S rRNA测序及Tunel检测。利用小鼠模型进行驴盲肠内容物对卵巢发育的验证试验,选取30只昆明母鼠,随机分成3组,将饲喂试验中的驴盲肠内容物制成菌液,每天200μL灌胃移植给小鼠,连续40 d,试验结束后采集小鼠卵巢进行卵巢中相关基因和蛋白表达检测及Tunel检测。结果表明：与对照组相比,500μg/（kg·d）和1 000μg/（kg·d）组驴盲肠中厚壁菌门和拟杆菌门菌群丰度降低（P<0.05）,螺旋体门菌群丰度升高（P<0.05）,且卵巢细胞凋亡数量增加（P<0.05）;在小鼠模型中,与对照组相比,驴盲肠内容物灌胃处理组的小鼠其卵巢中炎症反应相关蛋白和凋亡相关蛋白表达量升高（P<0.05）,且卵巢细胞凋亡数量升高（P<0.05）,小鼠卵巢中抗氧化酶蛋白、趋化因子蛋白表达量降低（...     

低聚果糖对小鼠肠道菌群影响与机体免疫调节关系的研究

为了研究低聚果糖对小鼠肠道菌群影响与机体免疫调节的关系,分别选取18～22 g BALB/C健康清洁级雄性小鼠与清洁级昆明种雌性小鼠进行肠道菌群和免疫指标的检测.受试对象分别以0g/(kg·Bw)、0.69g/(kg·BW)、1.38g/(kg·BW)和4.15 g/k(kg·BW)灌胃低聚果糖,于给药后20 d测定粪便中双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌、产气英膜梭菌的菌数,33 d后测定细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性等指标.试验结果表明,1.38 g/(kg·BW)低聚果糖能够促进乳杆菌的增加并抑制肠杆菌的增幅,4.15 g/(kg·BW)的低聚果糖能够促进乳杆菌和双歧杆菌的增加并抑制肠杆菌和肠球菌的增幅;低聚果糖可以提高小鼠的免疫力,两者之间具有关联作用.     

应用Illumina-MiSeq高通量测序技术分析脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠肠道菌群的影响

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对小鼠肠道微生物多样性、物种丰度的影响。选用平均体重为20 g的BALB/c小鼠40只,随机分成对照组(灌胃灭菌生理盐水)和DON组(灌胃1.8 mg/kg BW DON),每组20个重复,每个重复1只小鼠,连续灌服28 d。试验结束后,收集新鲜粪便,每组随机选取3份,用Illumina-Mi Seq高通量测序技术分析微生物群落结构和组成的变化。结果表明,1)与对照组相比,DON组测序数量减少(P0.05)。2)DON组降低了Alpha、Beta多样性,Shannon指数较对照组显著降低(P0.05)。3)在门水平,与对照组相比,DON组显著降低了拟杆菌门(Bacteroidetes)和脱铁杆菌门(Deferribacteres)的物种丰度(P0.05),显著提高了变形菌门(Proteobacteria)的物种丰度(P0.05)。在属水平,与对照组相比,DON组显著降低了副类杆菌属(Parabacteroides)、理研菌属(Rikenella)、Algoriphagus、Mucispirillum、嗜甲基菌属(Methylophilus)、Francisella的物种丰度(P0.05),显著提高了梭菌属(Clostridium)、Robinsoniella、A llobaculum、A kkermansia的物种丰度(P0.05)。4)聚类分析显示,DON组与对照组的肠道微生物相似性降低。由此可见,DON能显著影响小鼠肠道微生物菌群多样性及物种丰度,提示DON致肠道损伤与这些肠道菌群的变化密切相关。     

五味止痢合剂对大肠杆菌致小鼠腹泻的治疗作用

【目的】研究五味止痢合剂对大肠杆菌致小鼠腹泻的治疗效果。【方法】 选择4周龄清洁级ICR小鼠，分为空白对照组(BC)、模型对照组(MC)、五味止痢合剂高(W-H)、中(W-M)、低剂量组(W-L)和盐酸环丙沙星药物对照组(CPFX)。每组20只，除BC组外均腹腔注射大肠杆菌，构建小鼠腹泻模型，建模5 h后，W-H、W-M、W-L组小鼠分别灌胃25、20、15 mL/kg BW五味止痢合剂(相当于生药2.5、2.0、1.5 g/kg BW)，CPFX组小鼠灌胃盐酸环丙沙星20 mL/kg BW，MC组和BC组灌胃等量生理盐水，2次/d，连用5 d。停药后14 d计算腹泻率和保护率。另取100只小鼠按照上述方法分组和给药，分别于给药后第2天，停药后第1、7和14天采集十二指肠和空肠。HE染色观察各组十二指肠黏膜层形态，采用ELISA试剂盒测定空肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和十二指肠α-干扰素(IFN-α)和白介素-4(IL-4)细胞因子的含量，采用免疫组织化学法检测十二指肠黏膜修复因子增殖细胞核抗原(PCNA)和转化生长因子-α(TGF-α)表达情况。【结果】 在停药后第14天，W-H和W-M组腹泻保护率分别高达95%和90%，死亡率均为0，均与CPFX组相当。在治疗过程中，W-H、W-M组小鼠小肠绒毛逐步趋于完整，淋巴细胞浸润逐渐减少，黏膜形态逐步趋于正常。W-H、W-M和CPFX组的空肠sIgA含量均显著高于MC组(P<0.05)。与MC组比较，在停药后第1、7和14天各给药组均能显著抑制空肠黏膜IFN-α的分泌(P<0.05)，显著提升IL-4的分泌(P<0.05);在停药后第14天，W-H组IFN-α和IL-4含量与BC组接近。在停药后第1和7天，W-H和CPFX组肠道修复因子PCNA表达量显著高于MC组(P<0.05);在停药后第1天，W-H和CPFX组肠道修复因子TGF-α表达量显著高于MC组(P<0.05)，在停药后第7天W-H和CPFX组TGF-α表达与MC组相比无显著差异(P>0.05);在停药后第14天各组间PCNA和TGF-α的表达均无显著差异(P>0.05)。【结论】 2.5 g/kg BW五味止痢合剂灌胃给药能显著控制大肠杆菌引起的小鼠腹泻，保护率达95%。其主要通过显著提升空肠灌洗液中sIgA的含量，充分激活免疫细胞，调节肠道黏膜分泌的细胞因子IFN-α和IL-4，有效抑制肠道炎症反应，刺激肠道黏膜修复因子PCNA和TGF-α的表达发挥治疗作用。     

嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌K88所致腹泻的防治作用

本试验旨在研究嗜酸乳杆菌发酵中药对产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）K88所致腹泻小鼠的影响。选取6~8周龄巴比西小鼠（BALB/c）100只,分为4组,分别为空白对照组（Ⅰ组）、大肠杆菌感染模型组（Ⅱ组）、中药发酵组（Ⅲ组）及中药水提组（Ⅳ组）,其中Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组小鼠均用"抗生素+大肠杆菌"模式造模。Ⅰ、Ⅱ组饲喂不含任何药物的基础日粮,Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加10%中药发酵液、10%中药水提液。统计分析各组小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器官指数、肠道菌群及细胞因子IFN-γ、IL-4的含量。结果显示,ETEC K88感染小鼠36 h后,与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组小鼠腹泻指数（P < 0.05）与腹泻率降低,且Ⅲ组腹泻指数显著低于Ⅳ组（P < 0.05）,Ⅲ、Ⅳ组盲肠内大肠杆菌数量较Ⅱ组降低,双歧杆菌及乳酸菌数量提高,且Ⅲ组效果更优;Ⅲ、Ⅳ组的免疫器官指数均高于Ⅰ和Ⅱ组,且与Ⅱ组相比,Ⅲ组的脾脏指数、胸腺指数及肝脏指数分别提高了48.37%、29.57%、36.88%,且差异均显著（P < 0.05）;Ⅲ、Ⅳ组IFN-γ/IL-4比值较Ⅱ组提高,且Ⅲ组高于Ⅳ组。综上所述,乳酸菌发酵中药液具有降低腹泻小鼠腹泻率及腹泻指数,提高免疫器官指数,维持肠道菌群平衡及快速消除体内炎症反应等作用,可为开发防制ETEC所致的仔猪腹泻产品提供参考。     

丁酸梭菌对慢性肾衰竭犬肠道菌群及血清小分子尿毒素含量的影响

本试验旨在研究丁酸梭菌对慢性肾衰竭(CRF)犬肠道菌群及血清小分子尿毒素含量的影响。选取20条2岁左右的雄性贵宾犬,随机分成4组:假手术对照组(CL组)、模型组(MD组)、低剂量丁酸梭菌组(LCB组)和高剂量丁酸梭菌组(HCB组),每组5只。CL组只做腹腔打开手术,其余3组肾动脉结扎制作CRF模型。造模成功后,LCB组和HCB组分别按每天0.5、1.0 g/kg BW的剂量灌喂丁酸梭菌,进行为期4周的干预。检测血清和粪便尿素氮(UN)、肌酐(Cr)和硫酸吲哚酚(IS)含量,并对肠道菌群16S rDNA进行高通量测序。结果表明:1)试验结束时(第4周),LCB组和HCB组的血清UN、Cr和IS含量极显著低于MD组(P<0.01),但极显著高于CL组(P<0.01);与LCB组比较,HCB组的血清UN、IS含量显著降低(P<0.05),血清Cr含量极显著降低(P<0.01)。试验结束时,HCB组的粪便UN、Cr含量均显著低于MD组(P<0.05),CL组的粪便UN、Cr含量均显著低于MD组、LCB组和HCB组(P<0.05)。2)饲喂丁酸梭菌均降低CRF犬肠道菌群的α多样性,HCB组的Chao1指数、Shannon指数显著低于MD组(P<0.05)。主坐标分析(PCoA)结果显示4组样本间发生明显聚类。3)在门水平上,MD组的肠道放线菌门(Actinobacteria)和变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度显著高于CL组(P<0.05),LCB组和HCB组的肠道Actinobacteria、Proteobacteria的相对丰度均显著低于MD组(P<0.05);在属水平上,饲喂丁酸梭菌可降低CRF犬肠道变形杆菌属(Proteus)、埃希氏菌属(Esche-richia)、肠杆菌属(Enterobacter)、普氏菌属(Prevotella)、放线菌属(Actinomyces)和涅斯捷连科氏菌属(Nesterenkonia)的相对丰度。LEfSe分析发现,CRF犬肠道菌群有19个具有差异的生物标志物,主要集中于Actinobacteria、Proteobacteria,饲喂丁酸梭菌可减少CRF犬生物标志物的差异。4)Spearman相关性分析显示,血清UN、Cr和IS含量与Enterobacter、Proteus和Escherichia相对丰度存在较强的正相关关系,与乳杆菌属(Lactobacillus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)相对丰度存在较强的负相关关系。由此可见,CRF犬肠道菌群紊乱与血清小分子尿毒素含量之间存在相关性,丁酸梭菌可通过调节CRF犬肠道菌群结构,促进血清小分子尿毒素的清除,以每天1.0 g/kg BW添加量为宜。     

4味常见中药对免疫抑制小鼠免疫功能及肠道菌群的影响

试验旨在研究4味中药对免疫抑制小鼠免疫功能和肠道菌群的影响,选取70只6周龄雌性昆明小鼠(18～20g),随机分为7组,分别为空白对照组、模型组、玉屏风组、乌梅组、蒲公英组、党参组、石榴皮组。采用环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)构建免疫抑制病理模型,从喂药的第3天起,2～7组以75mg/kg体重腹腔注射Cy,每隔1天注射1次,共注射4次,注射期间正常给药,模型组灌胃0.9%生理盐水,直至停止注射Cy的第2天,共给药7d。检测4味中药对免疫抑制小鼠体重、脾脏和胸腺指数、血液指标、分泌型免疫球蛋白A(sIgA)、IgG及肠道菌群的影响。结果显示,与模型组相比,党参、乌梅、蒲公英、石榴皮可显著提高免疫抑制小鼠体重(P<0.05),其中乌梅组效果最好;显著提高免疫抑制小鼠免疫器官指数(P<0.05),但不能达到正常水平,其中蒲公英组脾脏指数最高;各中药组可提高白细胞数目(WBC)、显著提高红细胞数目(RBC)(P<0.05),但不能达到正常水平;各中药组可显著提高免疫球蛋白数量(P<0.05),党参组sIgA、IgG显著高于空白对照组(P<0.05),且和玉屏风组差异不显著(P>0.05);各中药组可显著降低大肠杆菌数量(P<0.05),显著增加双歧杆菌和乳酸杆菌数量(P<0.05),提高免疫抑制小鼠肠道菌群的丰富性和多样性,其中党参和蒲公英组小鼠肠道菌群的丰富度和多样性较好。综上说述,乌梅、蒲公英、石榴皮、党参均能够颉颃Cy对小鼠体重、免疫功能及肠道菌群的影响,可用于免疫增强类药物的开发。     

抗菌肽NZ2114对多重耐药2型猪链球菌感染小鼠的治疗效果评价

为探究抗菌肽NZ2114对猪链球菌感染小鼠模型的体内治疗效果,本试验以NZ2114和2型猪链球菌CVCC 3928为研究对象,利用小鼠模型评价NZ2114治疗猪链球菌感染的效果。36只ICR雌鼠随机均分为6组：空白对照组（不感染,腹腔注射0.2 mL PBS）、阴性对照组（感染,腹腔注射0.2 mL PBS）、试验Ⅰ和Ⅱ组（感染,分别腹腔注射0.2 mL 2.5和5.0 mg/kg NZ2114）、阳性对照Ⅰ和Ⅱ组（感染,分别腹腔注射0.2 mL 7.5和15.0 mg/kg头孢曲松钠）。结果显示,空白对照组和5.0 mg/kg NZ2114试验组小鼠存活率均为100%,而15.0 mg/kg头孢曲松钠阳性对照组小鼠存活率仅为50%。治疗1 d后,5.0 mg/kg NZ2114试验组小鼠肺脏和肝脏荷菌量分别下降59.41%（P < 0.01）和69.19%（P < 0.01）;而15.0 mg/kg头孢曲松钠阳性对照组中小鼠肺脏和肝脏荷菌量分别下降43.94%（P < 0.01）和19.60%（P < 0.05）。与阴性对照组相比,2.5 mg/kg NZ2114治疗组中抑制炎性因子TNF-α和IL-1β的释放分别下降85.83%（P < 0.01）和56.20%（P < 0.05）,5.0 mg/kgNZ2114试验组分别降低84.02%（P < 0.01）和43.86%（P < 0.05）,而15.0 mg/kg头孢曲松钠阳性对照组TNF-α及IL-1β的下降率均不显著,分别为24.49%和8.82%。另外,5.0 mg/kg NZ2114试验组1 d后即可明显减轻小鼠肺组织间质弥漫性炎细胞浸润等炎症症状,抑制肝细胞产生肿胀及空泡性变化,促进脾小结恢复正常;治疗7 d后各器官组织临床症状评分基本恢复正常。上述结果表明,NZ2114能有效提高猪链球菌感染小鼠的存活率,显著降低病原菌在小鼠肺脏和肝脏的移位及血清中TNF-α和IL-1β的水平,并有效缓解肝脏、脾脏和肺脏的急性损伤,治疗效果优于头孢曲松钠,具有作为治疗临床猪链球菌病抗生素替代品的潜力。     

红芪多糖-1-1的分离纯化及其调节抗生素诱导小鼠肠道菌群失调的最佳剂量分析

旨在筛选红芪多糖-1-1（Radix Hedysari polysaccharide-1-1,RHPS-1-1）调节小鼠肠道菌群失调的最佳剂量。将红芪粗多糖分别用DEAE-52和Sephadex G-100进行分离纯化得单一多糖RHPS-1-1,采用高效阴离子交换色谱法及甲基化和红外光谱法鉴定其单糖组成与结构。将C57BL/6小鼠90只随机分为正常对照组、模型组、自愈组和不同剂量RHPS-1-1（12.5、25、50、100、200和400 mg·kg^-1）给药组,每组10只。通过连续14 d灌服抗生素鸡尾酒（氨苄西林、新霉素、甲硝唑、万古霉素）的方法建立小鼠肠道菌群失调模型,造模结束后,模型组小鼠处死采样,各给药组灌服不同剂量RHPS-1-1进行治疗,正常对照组与自愈组给予等量生理盐水,连续14 d。应用16S rDNA高通量测序法分析各组小鼠盲肠内容物的肠道菌群变化特征,并观测正常对照组、自愈组和25 mg·kg^-1 RHPS-1-1组主要脏器的器官指数和组织病理变化。结果表明,经纯化得到单一多糖RHPS-1-1,重均分子量为19.420 ku,主要由葡萄糖组成,主链连接方式为1,4-D-Glcp,并具有植物多糖的特征吸收峰。灌服抗生素鸡尾酒使小鼠出现了严重的肠道菌群失调,拟杆菌门、厚壁菌门和放线菌门等优势菌丰度极度减少,变形菌门相对增多,且不能自然恢复;经RHPS-1-1给药后肠道菌群的多样性和丰富度发生改变,25 mg·kg^-1 RHPS-1-1治疗组Chaol指数显著升高（P<0.05）,PCA和UPGMA聚类分析结果均显示,25 mg·kg^-1的RHPS-1-1给药组与正常对照组肠道菌群结构最接近,有害菌Muribaculaceae_unclassified相对丰度降低,有益菌Ruminococcaceae_UCG-014和Clostridiales_unclassified相对丰度增加。自愈组相比正常对照组仅肝脏指数显著减小（P<0.05）,经25 mg·kg^-1的RHPS-1-1治疗后显著升高（P<0.05）。但正常对照组、自愈组及25 mg·kg^-1的RHPS-1-1治疗组的心、肝、脾、肺、肾和脑均无明显病理变化。结果证明,所获RHPS-1-1是一种分子量约为19.420 ku的植物葡聚糖,治疗剂量为25 mg·kg^-1时,促进抗生素所致小鼠肠道菌群失调恢复的效果最佳,且可改善肝脏指数下降,本研究为红芪多糖调节肠道菌群的临床应用提供依据。     

桑叶黄酮对凡纳滨对虾肠道黏膜形态和肠道菌群的影响

本试验旨在研究桑叶黄酮对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道黏膜形态和肠道菌群的影响。选用初始体重为(1.32±0.01)g的凡纳滨对虾800尾,随机分为5组(每组4个重复,每个重复40尾),分别饲喂在基础饲料中添加0、50、100、150和300 mg/kg桑叶黄酮的试验饲料。饲养周期为50 d。结果显示:1)饲料中添加桑叶黄酮可促进凡纳滨对虾肠道肠绒毛发育,增加肌层厚度,添加100 mg/kg桑叶黄酮组绒毛高度最高且显著高于其他组(P<0.05),添加50 mg/kg桑叶黄酮组肌层厚度最高且显著高于其他组(P<0.05)。2)饲料中添加桑叶黄酮可增加凡纳滨对虾肠道菌群多样性,添加50 mg/kg桑叶黄酮组Shannon指数显著高于未添加组(P<0.05),Simpson指数显著低于未添加组(P<0.05)。3)与未添加组相比,添加100和150 mg/kg桑叶黄酮组弧菌属(Vibrio)与添加50、100和150 mg/kg桑叶黄酮组希瓦氏菌属(Shewanella)的相对丰度显著增加(P<0.05),各桑叶黄酮添加组红球菌属(Rhodococcus)与添加100、150和300 mg/kg桑叶黄酮组乳球菌属(Lactococcus)的相对丰度显著降低(P<0.05)。由此得出,饲料中添加50 mg/kg桑叶黄酮可促进凡纳滨对虾肠道发育,增加肠道菌群多样性。     

Effect on Humulus scandens Alcohol Extract on Secretory Diarrhea of mice

To explore the therapeutic effect of Humulus scandens alcohol extract on secretory diarrhea in mice,we used lavage of senna to produce diarrhea mice mode.The mental state,body weight,colon intestinal wall thickness and histopathological changes were observed daily during the experiment period and the disease activity index was detected to evaluated therapeutic action of Humulus scandens alcohol extract on diarrhea.The results showed that compared with model group,the treatment group had significant effects on metal state,body weight and small intestinal villus recoveries;Compared with model group,body weight of treatment group had a rising trend but still couldn't reach the normal level.The DAI of treatment group decreased compared with model grope,there was no significant difference between blank group and treatment group (P>0.05).Compared with model group,intestinal wall thickness of treatment group were significant differences (P<0.05),the treatment effect was remarkable.Histological examination showed that in blank group,small intestinal villus was neatly,the hierarchical structure was clear,and there was no small vessel hyperemia and no villous intestinal edema.While small intestinal villus of model group disordered,most of the villus fell off,there was inflammation exudation on the surface of villi,villous edema and congestion of small blood vessels.Compared with model group,symptoms of treatment group significantly changed,which showed greatly reduced cell inflammatory exudation,there was no obvious edema and congestion in villi interstitial,small intestinal structure was roughly the same as normal tissue,the treatment effect was obvious.Humulus scandens alcohol extract had significant therapeutic effect on diarrhea in mice,and could provide a theoretical basis for the treatment of secretory diarrhea.     

葎草醇提物对小鼠分泌性腹泻作用的影响

为了探讨葎草醇提物对小鼠分泌性腹泻的治疗作用,本试验采用番泻叶灌胃法制作小鼠腹泻模型,通过观察小鼠精神变化、体重变化、DAI评分、结肠肠壁厚度及小肠病理切片变化的情况,评价葎草醇提物对小鼠的抗腹泻作用。结果显示,与模型组相比,葎草醇提物对治疗组小鼠精神恢复、体重及小肠绒毛恢复等均有明显的作用;治疗组相对模型组体重有上升趋势,但仍不能完全恢复至正常水平;治疗组与模型组相比DAI评分明显降低,且与空白组相比DAI评分差异不显著(P>0.05);治疗组肠壁厚度较模型组差异显著(P<0.05),治疗效果显著。病理组织学观察,空白组小鼠小肠绒毛排列整齐,各层次结构清晰,绒毛间质无水肿、无小血管扩张充血,而模型组小鼠小肠绒毛排列紊乱,大部分绒毛脱落,绒毛表面有炎性渗出,绒毛间质水肿,小血管扩张、充盈。治疗组与模型组相比症状明显改变,小肠绒毛排列整齐,绒毛表面炎性渗出大部分消失,绒毛间质无明显水肿、无小血管扩张、充血,小肠结构与正常组织大致相同,治疗效果明显。研究结果表明葎草醇提物对小鼠腹泻有明显的治疗效果,可为分泌性腹泻的治疗提供理论依据。