人参皂苷及其衍生物体外抗MDV的作用

通过透射电子显微镜观察人参皂苷及其衍生物对马立克氏病毒(MDV)感染鸡胚成纤维细胞(CEF)的保护效果,探讨人参皂苷及其衍生物体外抗马立克氏病毒的作用机理。结果表明,人参皂苷及其衍生物均具有较好的抗病毒作用,可以减轻病毒对鸡胚成纤维细胞的损伤程度。     

鸡马立克氏病诊治分析

鸡马立克氏病是一种由马立克氏病毒引起的鸡恶性T淋巴细胞增生性疾病,主要特征表现为病鸡产生免疫抑制,外周神经、各种内脏器官、性腺、虹膜、皮肤和肌肉等组织器官发生淋巴细胞浸润、增生、形成淋巴肿瘤等。马立克氏病流行范围广,发病率和死亡率高,严重困扰我国养禽业事业的发展。鸡马立克氏病可根据临床症状初步判断,在此基础上可以通过制作石蜡切片病理观察和病毒目的基因PCR扩增进行进一步确诊。本文从传染源、传播途径和易感动物3方面重点阐述鸡马立克氏病的防治方法。     

应用羽囊琼脂扩散法检查鸡马立克氏病的试验报告

一、经大体剖检和组织学检查确诊为马立克氏病的病鸡,采其羽囊与确诊为马立克氏病病鸡的血清作琼脂扩散试验,筛选出阳性反应显著的血清,作为鸡马立克氏病阳性血清。用此种阳性血清与其他受检鸡的羽囊作琼脂扩散试验,以检查鸡的马立克氏病。在三批试验中,第一批由马立克氏病鸡群中剔出的病鸡,检出的阳性率为60％(61/102个);第二批四群发生马立克氏病的鸡群共检查284个,阳性率由10％(5/151个)至58％(26/54个);三群无马立克氏病病史的鸡群,共抽查80个,阳性率由0％(0/20个)至6.3％(2/30个)。试验结果表明,应用此法大部分马立克氏病鸡可被检出。二、阳性反应鸡可确诊为马立克氏病。但由于有少数马立克氏病的病鸡应用此法检查并不出现反应,所以呈现阴性反应的鸡则不能完全排除无马立克氏病的感染。本法除可检出有症状的病鸡外,不少无症状的感染鸡,亦可被检出。三、在发病的鸡群中,用此法检查以剔除阳性鸡,初步表明可以减少本病传染的机会,起到缩小或阻止疫情发展的作用。于对防制本病起到显著作用。四、用羽囊浸液或直接用羽囊作琼脂扩散试验检查马立克氏病,敏感度高,方法简单易行,且毋须特殊设备,在基层兽医单位和鸡场内均可进行。因此,是一种较为理想的检查鸡马立克氏病的血清学方法。     

商品蛋鸡群马立克氏病与细菌性混合感染的诊断

对某养殖场送检的8只病死鸡,用琼脂扩散试验检出马立克氏病毒抗原阳性率为62.5%（5/8）;马立克氏病毒抗体阳性率为66.7%（4/6）.从病料中分离出7株细菌,其中4株为大肠杆菌,3株为鸡伤寒沙门氏菌.根据流行病学、临床症状及实验室诊断,判定为鸡马立克氏病和细菌的混合感染.同时对马立克氏病与禽淋巴细胞性白血病进行了鉴别诊断.     

实验性鸡马立克氏病免疫病理学研究 Ⅳ:外周血液淋巴细胞扫描电镜观察

本研究应用扫描电镜,对健康雏鸡和人工感染马立克氏病雏鸡的外周血液淋巴细胞进行了形态观察。结果观察到:健康雏鸡外周血液淋巴细胞的形态和哺乳动物的相似,但缺乏典型的绒毛型淋巴细胞;接种马立克氏病强毒后30～40天,外周血液淋巴细胞几乎全是光滑型淋巴细胞;鸡马立克氏病毒对鸡外周血液淋巴细胞有一定的损伤作用。     

突变型抑癌基因p53在鸡马立克氏病肿瘤组织中的表达研究

[目的]探讨抑癌基因p53在鸡马立克氏病的发生与发展中的作用和意义。[方法]采用免疫组织化学和细胞化学技术,观察抑癌基因p53在鸡马立克氏病肿瘤组织及体外培养感染马立克病毒的鸡胚成纤维细胞中的表达。[结果]在体外培养的鸡胚成纤维细胞(CEF)感染马立克氏病毒后,感染的CEF呈阳性。在马立克氏病的发生过程中,突变型抑癌基因p53在病鸡的肝脏、肾脏、肿瘤、心脏、脾脏、肺脏、胸腺及法氏囊中均可检出中等量的表达。p53发生突变时所产生的p53蛋白突变体的半衰期比未发生突变时要长。[结论]突变型p53基因具有直接转化细胞和阻碍野生型p53发挥作用的特点,致使突变的DNA得以积累,最终导致癌变的发生。     

人参皂苷抗鸡新城疫病毒的试验研究

为探讨人参皂苷抗鸡新城疫病毒的作用机理,试验用鸡新城疫病毒人工感染雏鸡,采取人参皂苷口服,观察试验鸡只的临床症状及体重变化,测定血清抗体效价的变化情况。结果表明,人参皂苷组可以明显推迟人工感染鸡新城疫病毒(NDV)雏鸡的发病日龄,缩短病鸡的发病过程。试验鸡饲喂人参皂苷后可明显降低发病率和死亡率并促进抗体的产生。说明人参皂苷可以降低病毒对组织的损害程度,增强雏鸡对新城疫病毒的抵抗力。     

浅析鸡马立克氏病免疫失败的原因

鸡马立克氏病(MDV)对养鸡业危害严重.70年代初研制出有效疫苗并广泛应用,发病率大大下降,然而,有一些养鸡(户)在接种了马立克氏病疫苗后,仍频频发生马立克氏病,造成这种免疫失败的原因,笔者认为有以下几个方面:     

聚肌胞治疗人工感染马立克氏病

鸡马立克氏病目前尚无治疗方法,我们用聚肌胞对人工感染马立克氏病的病鸡进行了治疗及预防性治疗试验,获得了较为满意的效果,其治疗组平均有效率为60％;作为预防性治疗效果更好。     

鸡马立克氏病的诊断

2018年10月,广西壮族自治区灵山县某肉鸡场80日龄左右的肉鸡出现疑似马立克氏病,患病鸡消瘦、精神沉郁,剖检病理为肝脏、心脏显著肿大,并有大小不等的灰白色结节,胃肿大,PCR检测为马立克氏病阳性。根据临床症状、病理解剖、PCR检测结果,确诊该场发生的疾病是马立克氏病。本文进一步提出了防控措施,分析了病因,即该批鸡感染马立克氏病,是由于该批次的鸡苗马立克氏病疫苗接种不当(包括疫苗失效)造成的。     

西洋参果化学成分的研究

对西洋参果的皂甙成分进行了提取,分离,从中获得８个单体化合物,经过高效薄层（ＨＴＬＣ）检查和快原子轰击质谱（ＦＡＢ－Ｍｓ）鉴定,这８种人参皂甙中,人参二醇型皂甙４种,即丙二酸单酰基人参皂甙Ｒｂ１,人参皂甙Ｒｂ１,Ｒｇ３和Ｒｈ２人参三醇型皂甙３种,即人参皂甙Ｒｅ,Ｒｇ１,Ｒｇ２;齐墩果酸型皂甙１种,即人参皂甙Ｒｏ,它们的结构已被确定。     

人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物与人参皂苷的增强记忆活性对比

通过建立3种损伤性拟痴呆模型,即东莨菪碱致胆碱能损伤拟痴呆小鼠模型、40%乙醇损伤拟痴呆小鼠模型、氯霉素注射致痴呆小鼠模型,每日给予小鼠受试药物,通过跳台试验和被动回避试验对小鼠进行行为学检测,并对小鼠脑内胆碱能含量进行检测,对比人参三醇型皂苷的黑根霉发酵产物和部分人参皂苷的增强记忆活性。结果表明:人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物3种损伤模型中均显示出增强记忆活性,且与对照组相比差异显著。人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物组和人参皂苷Rg1组小鼠脑内乙酰胆碱转移酶(ChAT)活性明显高于空白对照组(P0.05),乙酰胆碱酯酶(AchE)活性低于空白对照组(P0.05),说明人参三醇型皂苷黑根霉发酵产物不仅能降低AchE活性,而且能增强ChAT活性,并且此活性与小鼠脑内的胆碱能系统具有一定关系。     

人参皂苷Rh2葡萄糖基转移酶活性测定体系的建立

[目的]建立人参细胞中尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）：人参皂苷Rh2葡萄糖基转移酶（UGRh2GT）活性测定体系。[方法]以人参皂苷Rh2为底物,以UDPG为葡萄糖供体,选取合适的温度和pH值,用提取的人参细胞酶液催化Rh2生成Rg3,采用高效液相色谱法（HPLC）测定Rg3的生成量,色谱柱为C18柱（150mm×4.6mm）,流动相为乙腈和水,梯度洗脱。[结果]人参细胞中UGRh2GT活性测定体系的最优pH值是9.3,最优温度是34.1℃。[结论]建立的酶活测定体系能够较好较方便地测定UGRh2GT的比活。     

人参叶皂甙对鸡免疫功能调节的研究

[目的]通过对人参叶皂甙对鸡免疫功能的调节作用的研究,为开发人参在养殖业中的应用提供依据。[方法]采用单因子方差分析进行试验设计、分组。不同途径对鸡给以人参皂甙,同时进行ND油苗免疫与含人参皂甙的ND油佐剂疫苗免疫接种;35日龄时,静脉注射大肠杆菌菌液,采集血液做细菌培养,记数;60日龄时,进行增重及免疫器官重量比较;分离不同阶段鸡血清做血凝抑制试验测定鸡血清中的HI抗体水平。[结果]与对照组相比,人参叶皂甙能促进鸡抗NDV抗体的产生,且高效价抗体维持时间长;各组间增重比较差异不显著;人参叶皂甙对胸腺发育有一定促进作用,对脾脏发育抑制,对法氏囊的影响依给药方式不同而异;血液中细菌总数测定结果表明人参叶皂甙能使鸡单核—巨噬细胞系统吞噬能力增强。[结论]人参叶皂甙能促进鸡体内特异性抗体的产生及激活单核—巨噬细胞系统的吞噬能力。     

高压电场法转化人参总皂苷产物Rg2的纯化

[目的]纯化高压电场转化的人参茎叶皂苷降解物。[方法]利用高压电场对人参茎叶皂苷进行转化,以Rg2含量为指标,分别用HPD100、HPD200A、HPD200B、HPD300、D101、AB-8树脂对高压电场转化产物进行纯化,用RP-HPLC对高压电场降解产物进行检测。[结果]在合适的高压电场条件下人参皂苷转化成人参皂苷Rg2的转化率达90%以上;AB-8树脂的纯化效果最好,Rg2的纯度可达70%以上。[结论]得到了纯度较高的人参皂苷Rg2,为人参皂苷Rg2的工业化生产提供了依据。     

鸡马立克氏病二次免疫的效果

70日龄鸡在发生马立克氏病初期,紧急接种CVI988疫苗,收到较好效果。死亡率、高峰产蛋率、马立克氏病病死率均极显著(P<0.01)优于未接种疫苗的鸡群。     

利用HPLC／MS对野山参和林下参皂苷的分析

为了明确野山参和林下参中人参皂苷的组成特征及差异所在,利用高效液相色谱-质谱联用仪对野山参和林下参中电苷进行分析测定。结果表明：野山参和林下参中均含有常见的9种人参皂苷（Re、Rg1、Ro、Rf、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rd）,野山参中还检测到三七皂苷R1、R2和R3以及丙二酰基人参皂苷Rb1和Rc,林下参仅检测到了丙二酰基人参皂苷Rh1、Rc和Rd,没有检测到三七皂苷R1和R3;林下参中Re含量显著高于野山参,平均含量为5．042g／mg,二者达到极显著差异（P〈0．01）,野山参和林下参中其它8种人参皂苷含量差别不大。     

连作西洋参根际土壤化感物质筛选及化感效应分析

为了筛选西洋参连作过程中的化感物质,采用基于液质联用（LC-MS）的非靶向代谢组学技术对蒸馏水（CK）、4 a生西洋参水提液（GT）及其根际土壤浸提液（ST）浇灌的西洋参幼苗栽培土壤进行分析。结果显示,44种差异代谢物被质谱鉴定,其中22种差异代谢物VIP>1.4且P<0.001。这些差异代谢物包括皂苷、生物碱、酮及黄酮、有机酸、萜、醇和香豆素等。进一步采用HPLC对差异代谢物Ginsenoside Rg3、Ginsenoside Rg2、Indole-3-acetic acid、Methyl indole-3-acetate、Marmesin、Cytisine和Senecionine进行验证,发现这7种代谢物含量变化与代谢组学检测的结果一致。与CK相比,GT组Ginsenoside Rg3、Ginsenoside Rg2和Methyl indole-3-acetate含量显著增加;ST组Indole-3-acetic acid、Methyl indole-3-acetate、Marmesin、和Senecionine含量显著增加,Cytisine含量显著下降。化感作用分析发现,这7种代谢物对白菜种子萌发、白菜根和茎的生长均有不同程度的化感抑制作用。这些结果表明西洋参在重茬过程中分泌到土壤的次生代谢物质积累可能是导致西洋参连作障碍发生的潜在化感物质。     

人参单体皂苷对桃蚜取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性的影响

以人参单体皂苷Rg1和Rb1为试验材料,以同翅目桃蚜为试验昆虫,测定了桃蚜取食单体皂苷后解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性,比较了Rg1和Rb1对酶活性的影响。结果表明:Rg1和Rb1对桃蚜取食有显著抑制作用,在较低浓度时对桃蚜体内解毒酶活性有抑制作用。处理24 h后,Rg1对桃蚜体内谷胱甘肽-S-转移酶、多功能氧化酶、羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶有显著抑制作用。处理48 h后,Rb1对桃蚜体内的多功能氧化酶、羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用;且Rg1对桃蚜解毒酶的抑制作用比Rb1显著;Rg1和Rb1有诱导酶活性增强的作用,打破了桃蚜体内解毒酶活性均衡。研究结果可为植物害虫的生物防治及新农药开发提供参考。     

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R_1、R_2及人参皂苷Rg_1有效部位群的方法

从三七根、茎中快速批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。三七根、茎经70%乙醇提取得三七粗皂苷,粗皂苷用D101大孔吸附树脂分离得三七总皂苷。三七总皂苷经硅胶柱"氯仿-甲醇-水"溶剂梯度洗脱过柱获得纯度为60%的三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。此法适合于批量分离提取三七皂苷R1、R2及人参皂苷Rg1有效部位群。