重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉免疫效果的研究

为评估重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株)对雉的免疫保护效果,选取30日龄的雉,按照免疫程序首免后21 d,加强免疫1次,分别于接种前和接种后定期采血,分离血清,检测H5、H7亚型HI抗体滴度。结果显示,免疫前,雉血清中H5、H7亚型HI抗体滴度均为0;免疫后14 d,H5和H7亚型抗体平均滴度分别达到7.0log2和7.07log2,49 d后平均滴度达到峰值,分别为8.04log2和9.20log2;H5亚型免疫有效期可达105 d以上,H7亚型可达189 d以上。结果表明,重组禽流感病毒二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对雉具有良好的免疫保护效果且安全性良好,但疫苗免疫49 d后,H5、H7抗体效价逐渐下降,133 d后明显下降,群体免疫合格率低于70%,因此生产中推荐,30日龄首免后,51日龄和5月龄各加强免疫1次。本研究为珍稀禽的禽流感免疫疫苗选择和程序制定提供了参考。     

重组禽流感病毒（H_5+H_7）三价灭活苗的免疫效果评估

为评估新型重组禽流感(H_5+H_7)三价灭活苗对父母代种鸡场的免疫效果,选择了五家公司的禽流感三价灭活苗产品,分别免疫9日龄的SPF鸡,并以厂家进行分组(分别是A、B、C、D、E组),对照组为F组;采集免疫前后血清,检测H_5N_1(Re-11、Re-12、Re-8)和H_7N_9(H_7-Re2、H_7-Re1)抗体效价,分析不同公司疫苗产品在鸡上抗体的消长规律。结果表明,对照组鸡血清H_5N_1(Re-11和Re-12)和H_7N_9(H7-Re2)的HI抗体均为0;免疫1周后所有免疫组鸡的禽流感抗体开始上升,4周左右抗体效价达到高峰;产生抗H_5N_1(Re-11)的HI抗体最好的是A组;产生抗H_5N_1(Re-12)的HI抗体最好的是D组;产生抗H_7N_9(H_7-Re2)的HI抗体最好的是E组;不同厂家禽流感三价苗产生禽流感抗体效价差异不显著。三价灭活苗同时可以产生抗H_5N_1(Re-8)和H_7N_9(H_7-Re1)的有效抗体。本研究对鸡场免疫禽流感三价灭活疫苗提供数据支持。     

禽流感灭活疫苗H5N2 D7株与H5N1 Re-6株对鸭的免疫效果研究

为评价禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)和重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)对鸭的免疫效果,根据兽医流行病学中利用比较率判断疫苗应用效果的样本量计算方法,得出所需的最小样本量;以田间试验的方式,常规养殖白鸭300只、番鸭240只,并对其进行随机分组;按程序免疫,从10日龄首免后2周开始,每周采集血清测定抗体效价,直至出栏(白鸭45日龄、番鸭66日龄)。结果显示,10日龄白鸭和番鸭的母源抗体分别为3.02 log2和0 log2,需进一步开展研究,以确定最佳首免时间。首免后2周,无论是白鸭还是番鸭,H5N2 D7株疫苗组抗体HI效价和抗体合格率均高于H5N1 Re-6株疫苗组;首免后3~5周,两种疫苗对白鸭和番鸭的HI效价均4 log2,抗体合格率均≥70%。二免后1周至出栏,两种疫苗对白鸭和番鸭均产生较好的免疫效果,HI效价均7 log2,抗体合格率均80%。是否采用对应亚型的血凝抑制抗原对抗体的检测结果有较大影响。研究表明:免疫两种疫苗后均能产生较好的免疫抗体,但相对而言,H5N2 D7株疫苗较H5N1Re-6株疫苗更适合于鸭的免疫;在鸭等水禽中推广使用该疫苗将能更有效地防控高致病性禽流感。     

不同种类禽流感疫苗对番鸭的免疫效果对比试验

为评价重组禽流感病毒灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株、鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗、细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗及水禽专用H5N2亚型D7株灭活疫苗4个产品对番鸭的免疫效果,分别取四种疫苗分别免疫20日龄番鸭,125只/组,免后35日采血测定HI抗体效价。结果表明,4种疫苗免疫后用Re-6抗原检测抗体依次分别为8.1log2、9.3log2、8.9log2、7.0log2,用Re-8抗原检测抗体分别为1.5log2、9.9log2、8.7log2、7.5log2,用D7抗原检测抗体分别为0.3log2、7.6log2、5.6log2、6.5log2。四种疫苗免疫效果由高至低依次为:鸡胚源H5N1亚型Re-6+Re-8株灭活疫苗细胞源Re-6+Re-8株灭活疫苗H5N2亚型D7株灭活疫苗鸡胚源H5N1亚型Re-6株灭活疫苗。     

重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗的樱桃谷肉鸭免疫优化试验

为探究重组禽流感病毒三价灭活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12株,H7N9 H7-Re2株）对樱桃谷肉鸭的免疫特性,同时优化免疫方案以使其尽早产生免疫保护,将300只1日龄樱桃谷肉鸭随机分成3组,每组100只：一免组于7日龄免疫1次,剂量为0.5 mL/只;二免组于1日龄、7日龄各免疫1次,剂量分别为0.2、0.4 mL/只;对照组不免疫。采用血凝试验（HA）及血凝抑制试验（HI）进行抗体检测。结果显示：一免组肉鸭在21日龄Re-11、Re-12和H7-Re2平均抗体水平和抗体合格率均较低,分别为2.8log2和33%,2.6log2和31%,2.5log2和30%;28日龄分别上升至4.5log2和87%,4.1log2和83%,4.0log2和80%;38日龄分别为4.4log2和90%,4.2log2和87%,4.1log2和83%。二免组肉鸭在21日龄各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别达到4.5log2和80%,4.3log2和77%,4.1log2和73%;28日龄分别为6.0log2和97%,5.6log2和93%,5.2log2和93%;38日龄分别为6.1log2和100%,5.4log2和97%,5.0 log2和97%。对照组肉鸭在21日龄母源抗体已很低,各毒株平均抗体水平和抗体合格率分别为1.2log2和3%,1.3log2和3%,1.6log2和7%;28日龄、38日龄抗体水平均为0。结果表明：该疫苗能够有效刺激肉鸭产生免疫保护抗体,适用于禽流感免疫;在1日龄、7日龄各免疫1次的效果更佳,因此在发病日龄较早的高风险区域,建议采用该方案加以防控。     

樱桃谷鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株+Re-8株)的临床效果

为分析免疫质量,及时掌握流行病学动态和免疫效果,对商品樱桃谷鸭接种重组禽流感病毒H5亚型三价灭活疫苗(H5N1,Re-6株+Re-7株+Re-8株),并对该重组疫苗抗体的血清学进行连续性监测,结果表明,7日龄雏鸭禽流感母源抗体值在4 log2以上,7日龄免疫后,28日龄抗体效价达到5log2左右,35日龄Re-6株、Re-7株、Re-8株的抗体值达到高峰,高峰值一直保持到42日龄。     

吕梁地区H5亚型禽流感母源抗体消长规律的分析

吕梁地区某大型种鸡场的海兰褐父母代种鸡注射H5亚型禽流感油乳剂灭活苗后,其孵出的雏鸡随机抽取一部分,检测HI抗体效价。结果显示：H5亚型Re-5株抗体平均效价1日龄为7.40log2,5log2以上一直持续到20日龄,抗体滴度呈缓慢下降;H5亚型Re-4株抗体平均效价1日龄为6.83log2,13日龄为4.90log2,抗体滴度下降相对较快,本试验旨在绘制H5亚型禽流感母源抗体消长曲线,为商品蛋鸡禽流感的首免日龄提供参考依据。     

吕梁地区H5亚型禽流感母源抗体消长规律的分析

吕梁地区某大型种鸡场的海兰褐父母代种鸡注射H5亚型禽流感油乳剂灭活苗后,其孵出的雏鸡随机抽取一部分,检测HI抗体效价。结果显示:H5亚型Re-5株抗体平均效价1日龄为7.40log2,5log2以上一直持续到20日龄,抗体滴度呈缓慢下降;H5亚型Re-4株抗体平均效价1日龄为6.83log2,13日龄为4.90log2,抗体滴度下降相对较快,本试验旨在绘制H5亚型禽流感母源抗体消长曲线,为商品蛋鸡禽流感的首免日龄提供参考依据。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗免疫效果评估

2017年7月,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为评价重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株)对家禽的安全性及免疫效果,2017年10—12月以田间试验方式,常规养殖肉鸡(江村黄鸡)、樱桃谷白鸭、黑棕鹅各120只。按程序免疫:肉鸡9日龄首免(剂量0.3 mL),30日龄二免(剂量0.5 mL);樱桃谷白鸭15日龄首免(剂量1 mL);黑棕鹅15日龄首免(剂量1 mL)、50日龄二免(剂量1.5 mL)。定期采集血清测定抗体效价直至出栏,并每日观察禽群临床表现。试验结果显示:鸡首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为4.2 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为7.5 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于8 log2,抗体合格率均大于70%。鸭首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为5.1 log2,抗体合格率均大于70%,H7亚型HI抗体效价为5.6 log2,抗体合格率均大于70%,出栏前(47日龄)H5和H7亚型HI抗体效价均大于6 log2,抗体合格率均大于70%。鹅首免后21 d,H5亚型HI抗体效价为3.9 log2,抗体合格率均小于70%,H7亚型HI抗体效价为5.2 log2,抗体合格率均大于70%;二免后H5和H7亚型HI抗体效价均大于7 log2,抗体合格率均大于70%。通过临床观察,未发现该疫苗有严重免疫副反应。试验结果表明,该二价灭活疫苗安全有效,但对于生长周期超过70 d天的家禽,应免疫两次。     

樱桃谷肉鸭H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)免疫程序研究

选取1日龄健康无免疫的樱桃谷肉鸭600只,随机分成A、B、C、D 4组,每组150只。B、C和D组在7日龄分别免疫H5N1亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)0.5、0.6和0.8 m L/只。A组为非免疫对照组。采用HI方法检测其母源抗体和免疫抗体水平,根据母源抗体和免疫抗体消长规律探讨樱桃谷鸭H5NI亚型禽流感灭活疫苗(Re-6+Re-8)的合理免疫程序。结果表明:樱桃谷鸭Re-6与Re-8母源抗体效价和抗体合格率在1日龄最高,分别为7.8log2和100%、7.6log2和100%,14日龄下降至3.93 log2和53.3%、3.78 log2和50.0%,21日龄之后几乎没有保护力;3个剂量试验组免疫抗体水平和抗体合格率在统计学上差异不显著(P0.05)。建议樱桃谷肉鸭在7日龄免疫,剂量为0.5m L/只。     

不同佐剂的重组禽流感病毒灭活痘苗免疫效力试验

禽流感病毒（Avian Influenza Virus,AIv）是禽流行性感冒（简称禽流感,Avian Influenza,AI）的病原。其中高致病性的H5N1亚型AIV可以造成鸡群的大批死亡,对家禽养殖业影响严重,并可引起人的感染和死亡。通过接种疫苗能有效地控制禽流感的传播,专家们认为,选择优质的疫苗佐剂是新型疫苗走向成功的关键。本试验将同一批次的禽流感（H5N1亚型,Re-6株）抗原分别与国产白油佐剂、法国进口白油佐剂及美国进口白油佐剂3种佐剂制备成重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）,进行物理性状、无菌检验,均符合规定标准。将以上三种疫苗分别免疫21日龄SPF鸡,0．3mL／只,在免疫后的一周、两周、三周、四周,每组抽取10只分别采血,分离血清;18日龄蛋鸡0．3mL／只,在免疫后的一周、两周、三周,每组抽取10只分别采血,分离血清,21d后二免O．5mL／只,二免蛋鸡在免疫后的两周、三周、四周、两个月、三个月每组抽取10只分别采血,分离血清;每次连同对照组5只血清用禽流感病毒H5亚型（Re-6株）抗原测定HI抗体,试验结果表明,美国进1：2白油佐剂制备的重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,1Ke-6株）免疫鸡群后,HI抗体效价最高,免疫持续—段时间后,效价仍保持较高,同时做安全检验对比试验,各肌肉注射疫苗2．0mL／只,连续观察14d,试验结果表明,以上三种佐剂制备的疫苗均安全无副反应。     

禽流感H_5和H_9混合疫苗免疫肉鸽的效果试验

将禽流感H5亚型二价灭活疫苗（H5N1,Re-4＋Re-5）和H9亚型（SS株）灭活疫苗等量均匀混合,采用不同剂量不同次数分别注射。用血凝和血凝抑制试验方法检测H5亚型（Re-4、Re-5）和H9亚型（SS株）抗体效价。试验表明：以较小剂量0.5ml/只,间隔21d二免能产生整齐、持久、高滴度保护抗体,据此提出鸽H5和H9亚型禽流感多价混合疫苗的参考免疫程序。     

2009—201O年新疆地区家禽禽流感免疫抗体监测与分析

2009--2010年,对新疆部分地区蛋鸡、肉鸡、家养水禽的养殖场随机采集血清样品10193份,活禽市场采集血清样品1620份。用HI方法对禽流感免疫抗体进行检测,结果表明：蛋鸡的H5免疫抗体合格率为33．33％～100％,其中0效价率为33．33%-80．00％;H9免疫抗体合格率为62．4%-100％,20%-33％蛋鸡场存在100％的0效价现象。肉鸡H5免疫抗体合格率为0％-100％,其中7．69%-69．6％肉鸡群中H5抗体0效价率为100％。水禽的H5免疫抗体合格率为0%-100％,有25％33．33％鸭群全部是0效价。活禽市场H5抗体效价≥410g2的比例为10．59％-83．57％,H9抗体效价至410醇的比例21．70％-67．14％。     

2009—201O年新疆地区家禽禽流感免疫抗体监测与分析

2009—2010年,对新疆部分地区蛋鸡、肉鸡、家养水禽的养殖场随机采集血清样品10193份,活禽市场采集血清样品1620份。用HI方法对禽流感免疫抗体进行检测,结果表明:蛋鸡的H5免疫抗体合格率为33.33%～100%,其中0效价率为33.33%～80.00%;H9免疫抗体合格率为62.4%～100%,20%～33%蛋鸡场存在100%的0效价现象。肉鸡H5免疫抗体合格率为0%～100%,其中7.69%～69.6%肉鸡群中H5抗体0效价率为100%。水禽的H5免疫抗体合格率为0%～100%,有25%～33.33%鸭群全部是0效价。活禽市场H5抗体效价≧4log2的比例为10.59%～83.57%,H9抗体效价≧4log2的比例21.70%～67.14%。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)应用效果研究

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活苗(La Sota株+M41株+Re-9株)(三联苗(Re-9株))为国内首个采用基因重组H9亚型禽流感疫苗株研制的新支流三联灭活疫苗。为研究疫苗上市后的实际应用效果,使用7日龄AA肉鸡和260日龄产蛋期蛋鸡评价三联苗(Re-9株)有效性。结果显示:肉鸡免疫后14 d即可激发抗体,免疫后21 d,新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、H9亚型禽流感病毒(H9 AIV)的血凝抑制(HI)抗体分别达8.6log2、6.2log2、8.3log2,出栏时仍维持在较高水平;于免疫后14 d抽样进行NDV、H9 AIV攻毒,对照组均100%发病或排毒,免疫鸡均可获得100%保护;在蛋鸡上,免疫三联苗(Re-9株)后28 d,NDV、IBV、H9 AIV的HI抗体效价分别达12.0log2、7.8log2、12.2log2,免疫后6个月仍可以维持在较高水平。结果表明:三联苗(Re-9株)在实际应用中免疫效果较好,本研究将为鸡新城疫、传染性支气管炎、H9亚型禽流感的防控提供有力支撑。     

2009-2010年新疆地区活禽市场肉鸡禽流感H5抗体监测与分析

为了解新疆地区活禽市场中肉鸡禽流感H5抗体的情况,对2009-2010年新疆五个地区八个大型活禽批发市场采集的37批次1225份血清样品进行了AIH5抗体监测。结果表明,AIH5抗体效价≥4.0log2样品占总样品率的32.5%,0效价样品率达到54.5%;不同地区和不同市场的样品AIH5抗体效价存在较大差异;在37批次样品中有9批次样品来自于免疫鸡群,抗体效价≥4.0log2样品率达到99.2%以上;28批次样品来自于非免疫鸡群,0效价样品率高达71.3%。     

H_5亚型禽流感病毒灭活疫苗免疫效果评价试验

选取我省中标的两种类型6个批次的H5亚型禽流感病毒灭活疫苗,双盲条件下,在黄羽肉鸡中进行免疫效果比对试验。于14、35天龄进行两次免疫,在21、28、35、42、49、56、63、77、91、105和113 d进行抗体检测,结果全期平均免疫抗体水平超过6l og2,各批次疫苗间的免疫抗体水平略有差异。本次试验初步明确了H5亚型禽流感灭活疫苗接种后的抗体消长规律,为疫苗选择和免疫程序的制定提供依据。     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)免疫鸡抗体消长规律及免疫程序的初步研究

研究新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对种鸡和肉鸡的免疫原性,并对雏鸡母源抗体和免疫后的抗体进行动态观察,根据试验结果推荐该疫苗对鸡的免疫程序。用HI方法检测种鸡、肉鸡的母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄。结果表明种鸡的母源抗体约能维持10 d多;0.3 mL/羽首免后10 d HI抗体就可达到6.40 log2,3-5周达到高峰期,至免疫17周后(19周龄)HI抗体水平仍然维持在4.88 log2;19周龄时0.5 mL/羽进行二免,有效抗体能维持约20周;280日龄0.5 mL/羽三免后抗体水平均一,下降缓慢,至种鸡淘汰时(三免后29周)抗体水平仍能维持在5.32 log2。肉鸡母源抗体约能维持7d,10日龄时0.3 mL/羽免疫,有效抗体能维持到上市。新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸡的免疫原性确实。     

鸽禽流感免疫防制程序的探讨

对不同龄期鸽进行疫苗免疫和采用不同免疫间隔进行疫苗免疫后抗体消长动态及母源抗体的检测结果:在7～35日龄初免,7天后产生抗体,28～35天抗体滴度达到较高点,效果较好;首免后间隔20～90天二免,效果较优,当母鸽为高抗体水平(8.1log2)时产下的子代母源抗体至15日龄时已衰减至3.7log2。据此,提出了鸽场禽流感的免疫程序。     

蛋鸡卵黄与血清中H5N1亚型禽流感病毒Re-4株抗体效价相关性研究

用卵黄样本和血清样本监测H5N1亚型禽流感病毒Re-4株HI 抗体效价,对2种样本监测结果进行相关性研究。对115日龄蛋鸡群免疫重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-4株,禽用）,免疫后20～260 d对固定鸡群采样（血清样本和卵黄样本）,进行免疫抗体监测。结果表明,115日龄鸡群免疫后20～260 d卵黄和血清HI 抗体效价呈强相关,相差在1 log2以内的占绝大多数,均值t检验差异不显著。因此,用卵黄样本监测禽流感 HI 抗体效价是可行的。