棉铃虫对氰戊菊酯的抗性机理研究

以羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯（ＴＰＰ）和多功能氧化酶抑制剂增效醚（ＰＢＯ）以及￣（１４）Ｃ－氰戊菊酯为材料，选择对氰戊菊酯具有不同抗性程度的棉铃虫自然种群为试虫，研究其抗性机理。结果表明：棉铃虫对氰戊菊酯的抗性与其体内酯酶活性无关，而与多功能氧化酶活性直接相关；同时，表皮对氰戊菊酯的渗透性降低也是棉铃虫对氰戊菊酯产生抗性的强化因子。     

棉蚜,棉铃虫对氰戊菊酯农药田间抗性动态变化研究

１９８６～１９９３年在新乡、镇平、西华不同棉区进行了棉蚜和棉铃虫对氰戊菊酯抗性研究。结果表明，棉蚜在新乡、镇平两地对氰戊菊酯的抗性达极高抗水平；棉铃虫在新乡、西华两棉区对氰戊菊酯的抗性达高抗水平，而在镇平棉区则处于低抗水平。两虫的抗药性随用药年数的增加而提高，对棉蚜连续使用氰戊菊酯３～５ａ、棉铃虫６～７ａ即显示抗性；对棉蚜连续使用该药５～６ａ棉铃虫９～ｌｌａ时，抗性将有一个较大幅度的突增，抗性倍数可呈数百倍增加。     

山西省棉蚜对常用五种农药抗药性普查与监测研究

应用微量毛细管点滴法，对山西省３个棉区棉蚜进行了抗药性普查和监测研究。结果表明，对氰戊菊酯、氧化乐果、久效磷、呋喃丹和灭多威，临猗县棉蚜抗药性分别属于极高等水平、低等水平、敏感水平、中等水平和低等水平；襄汾县棉蚜除对氰戊菊酯的抗性处于高－极高等水平外，对其他４种农药的抗性与临猗县棉蚜相同；平遥县棉蚜除对氰戊菊酯和灭多威抗性分别处于中－高等水平和低等水平外，对其他３种农药均处于敏感水平。山西省棉蚜抗药性在近１０年中均有增长，尤其对氰戊菊酯的抗性增加很快。目前南部棉区棉蚜抗药性水平大于中部棉区棉蚜抗药性水平，这与南部棉区用药水平高有直接的关系。     

氰戊菊酯、马拉硫磷及其混剂汰选选育棉铃虫抗药性研究

用氰戊菊酯、马拉硫磷及菊马混剂分别汰选棉铃（Heliothis armigera）种群16代,每三代测定1次各种群对相应汰选药剂的敏感水平。结果表明,以上三个汰选种群对相应药剂的抗药性分别增长了68.02、7.76和3.48倍,氰戊菊酯单剂比菊马混剂抗性增长快19.6倍,混剂显示出对棉铃虫抗性显著的延缓作用。用计算机模拟预测混剂使用寿命,若3种药剂均连续使用30次则氰戊菊酯、马拉硫磷、菊马混剂的抗药性将分别提高817.5、14.2和5.2倍;若以抗性上升30倍及每年用药2-3次为标准,菊马混剂比单用氰戊菊酯可延长5倍的使用寿命。笔者认为把增效混剂作为一项措施组装到抗性治理方案（IRM）中去,科学合理地治理棉铃虫的抗药性是一个行之有效的措施。     

棉蚜（Aphis gossypii Glover）对氰戊菊酯、氧乐果及其混剂抗药性的研究

从用药水平较低地区棉田中采集棉蚜,在室内液培棉苗上繁殖,分别用氰戊菊酯、氧乐果及氰戊菊酯+氧乐果（1∶8 AI）混剂以浸蘸法处理试虫16代,氰戊菊酯选育的种群抗性高达4324.4倍,而氧乐果及混剂选育的抗性仅分别为22.3倍及16.5倍。上述三种抗性种群对溴氰菊酯、氯氟氰菊酯和氰戊菊酯均分别表现出显著或高度交互抗性,但对一些有机磷、氨基甲酸酯及有机氯杀虫剂的交互抗性却不明显。用酶抑制剂生测法及离体酶活性测定的研究表明,棉蚜对上述药剂的抗性与羧酸酯酶及氧化酶活力增加有关。     

Comparison of Acetylcholinesterase Characteristics Between Resistant and Susceptible Strains of Helicoverpa armigera (Hübner)

The sensitivity of a susceptible and two resistant strains of cotton bollworm, Helicoverpa armigera, to phoxim, malathion and methomyl was determined by a topical application of bioassay method. YG strain, collected from field of Yanggu,Shandong Province of China, possessed 7-, 13- and 20-fold of resistance to the above three antiacetylcholinesterases based on the comparison of LD50 values with a laboratory susceptible strain. There were not significant difference of the specific activity and the Vmax value among the three strains. But the affinity of AChE to acetylthiocholine (ATCh), in YG strain was the lowest among the three strains tested. A eDNA encoding partial AChE gene was cloned from the three strains by RT-PCR and there was one nucleotide acid difference between YG strain and other two strains which resulted in no amino acid mutation. This partial AChE gene was used as a probe to perform Southern blot. The results indicated that there was no gene amplification in resistant cotton bollworm. Altered AChE with a decreased sensitivity to inhibitors appeared to be one of important resistance mechanisms in cotton bollworm against OP and carbamate compounds.     

山西省棉麦菜主要害虫抗药性监测及防治技术研究

简要介绍了山西省棉麦菜主要害虫抗药性及防治技术研究（１９９３～１９９５）协作组３年来的研究结果。通过用点滴法对棉铃虫对氰戊菊酯、功夫菊酯、氯氰菊酯、久效磷和对硫磷，棉蚜对氰戊菊酯、氧化乐果、久效磷、呋哺丹、灭多威，小莱蛾对氰戊菊酯、马拉硫磷、敌敌畏，麦蚜对氰戊菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、甲氰菊酯、乐果、氧化乐果、辛硫磷、马拉硫磷、敌敌畏的敏感性的测试，明确了山西省上述害虫抗药性水平，划定了抗药性水平区域。针对山西省主要害虫抗药性现状，提出了包括轮换用药、科学使用方法和生物、农业、物理防治在内的害虫抗药性治理技术措施，并在全省范围内实施，取得明显经济和生态效益。     

甘肃敦煌棉蚜抗药性测定

１９９４－１９９５年,采用浸渍法建立了２２种杀虫剂对甘肃敦煌棉蚜的毒力回归线,可作为今后用浸渍法监测棉蚜抗药性的相对敏感毒力基线,与国内敏感棉蚜种群的毒力基线比较,１９９４年敦煌棉蚜对氰戊菊酯和灭多威处于敏感性水平,对氰化乐果和久效磷达到中抗水平（３１．４２和２７．４５倍）,对溴氰菊酯达极高抗水平（２７４．３９倍）;对联苯菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯等药剂显示出早期抗性的迹象。１９９５年棉蚜对     

山东省阳谷县棉铃虫抗药性监测

采用三龄幼虫点滴法，于１９９０－１９９３年年对位于冀、鲁、豫三省交界处抗性中心区的山东省阳谷县棉铃虫的抗药性进行了系统监测。结果表明：该县棉铃虫对氰戊菊酯的抗性水平最高，对溴氰菊酯、氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、顺式氰戊萝酯和灭多威处于中等抗性水平，对久效磷为低水平抗性。文中还讨论了该县棉铃虫抗药性发生、发展的特点，并就中国棉铃虫抗药性治理策略提出了一些设想。     

海南瓜棉蚜对敌敌畏、功夫、万灵和速灭杀丁的敏感性测定

对海南省崖城、金江、通什和两院地区西瓜上的瓜棉蚜进行敌敌畏（DDV）、功夫、万灵和速灭杀丁的敏感性研究。结果表明,不同地区瓜棉蚜对敌敌畏、功夫、万灵和速灭杀丁的敏感性存在明显差异。崖城和金江两地区瓜棉蚜种群对功夫、万灵、速灭杀丁和DDV均表现出较强的抗药性。以两院地区瓜棉蚜作为敏感品系,崖城和金江两地区瓜棉蚜种群对功夫、万灵、速灭杀丁、DDV的LC50抗性比值分别为21．86、22．78、17．88、13．49和10．91、12．59、11．47和13．49倍。通什地区的瓜棉蚜对功夫、万灵、速灭杀丁和DDV的抗性也相对较高,与两院种群LC50的抗性比值分别为1．58、12．27、4．45和2．28倍。崖城、金江和通什地区瓜棉蚜种群对功夫、万灵、速灭杀丁和DDV抗性种群的异质性很强。     

新疆阿拉尔地区棉铃虫自然种群对常用杀虫剂的敏感水平

用点滴法和浸叶法测定了新疆阿拉尔棉铃虫田间自然种群３龄，４龄幼虫和初孵幼虫对拟除虫菊酯，有机磷，氨基甲酸酯和有机氯４类１４种常用农药的毒力反应，并与国内外已知敏感基线进行比较。结果表明，该种群处于高敏感水平，３龄幼ＬＤ５０接近内地敏感种群或比内地敏感种群更低；在供试药剂中灭多威，氰戊菊酯，甲基对硫磷，和磷和辛硫磷相对毒力指数仅为０．１６－０．５；与印度，澳大利亚，泰国，印度尼西亚等国的敏感品系相比     

混合微生物对氰戊菊酯的降解作用

[目的]研究混合微生物对氰戊菊酯的降解作用。[方法]以氰戊菊酯为目标污染物,通过富集驯化培养获得对该污染物降解效果较好的混合培养微生物,用该微生物作为降解菌源,研究其对氰戊菊酯的生物降解特性。[结果]该混合培养微生物中氰戊菊酯降解菌在初始pH值为5.5~7.5条件下生长均较好,具有一定的耐酸性和耐碱性;在25~45℃条件下生长较好,最适生长温度为33℃;该混合微生物生长适应时间为84 h,此时氰戊菊酯去除率可以达到55%。[结论]混合培养物能利用氰戊菊酯作为生长的唯一碳源、氮源和能源且对氰戊菊酯具有一定的降解作用。     

对久效磷抗性棉铃虫品系的选育及其乙酰胆碱酯酶的研究

用久效磷对采集于山东聊城抗性地区的棉铃虫Helicoverpa armigera (Huebner)进行抗性品系选育，经过10代的室内选育，抗性倍数达211．88倍，为选育前的6．67倍，发现筛选后对氰戊菊酯，氯氰菊酯和灭多威的抗生分别下降了8．13，7．44和13．36倍，对甲基对硫磷和辛硫酸的抗性基本保持不变，这说明久效磷与其他5种被试药剂之间没有明显的交互抗性，还对抗，感棉铃虫体内AChE进行了研究，对久效磷抑制粗酶液的实验表明，抗性品系锦铃虫体内AChE的交互抗笥，还原抗，感棉铃虫体内AChE进行研究，对久效磷抑制粗酶液的实验表明，抗性品系棉铃虫体内AChE的I50是敏感品系的3．18倍，酶液纯化使抗，感品系AChE的I50分别下降6．69和3．49倍，说明粗提液中存在AChE保护因子，且这种保护因子在抗性品系中更有效，但纯化后，抗，感品系的AChE敏感性之间仍存在1．66倍的差异，此外，两品系AChE的动力学参数也存在显差异，由此认为AChE敏感性降低与其它因子共同组成了棉铃虫对久效磷的抗性机制。     

陕西棉花苗蚜对几种杀虫剂的抗药性测定

１９９０～１９９５年间在陕西渭南、三原、大荔棉区，采用毛细管点滴法测定了棉花苗蚜对九种常用有机磷及菊酯类杀虫剂的抗药性。结果表明，与敏感种群相比，陕西各棉区苗蚜对有机磷类杀虫剂基本处于敏感水平；对久效磷的抗性相对较高，其ＲＲ值为２．５～４．５．对菊酯类杀虫剂则表现出极高的抗药性，１９９５年测定发现，对溴氰菊酯的ＲＲ值高达１３４５７１；而对氯氰菊酯则相对敏感些，三原苗蚜仅为１４．３６；而渭南苗蚜种群则高达１６４．８６     

山西小菜蛾抗药性研究

采用ＦＡＯ推荐的点滴法测定了山西太原、太谷、大同地区小菜蛾（ＰｌｕｔｅｌｌａｘｙｌｏｓｔｅｌｌａＬ）对３种杀虫剂的敏感性。结果表明，对氰戊菊酯，太原和太谷地区，小菜蛾产生了高水平抗性，抗性指数分别为７２．４和５５．８倍。对马拉硫磷和敌敌畏的抗性只有太原地区产生了低水平抗性，其他地区抗性不明显。同时还进行了大量的药剂筛选试验。     

抗三氟氯氰菊酯截形叶螨遗传因子的PCR研究

通过室内模拟抗性汰选出抗三氟氯氰菊酯截形叶螨种群。利用蛋白酶 Ｋ 及十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸钠盐等裂解叶螨细胞,提取基因组 Ｄ Ｎ Ａ。参照有关大鼠、果蝇钠通道的核酸序列,设计２５ 、２７ 个核甙酸的引物对,采用聚合酶链反应分别对抗三氟氯氰菊酯种群和敏感种群进行扩增,产物扩增片段为３００ｂｐ 。由扩增结果得知,引物设计合理,并可推测：截形叶螨对菊酯类农药产生强抗药性的原因并非是由于钠通道基因的突变作用引起     

上海地区菜青虫对杀灭菊酯等抗药性的调查研究

1987、1988两年内用杀灭菊酯等杀虫剂对上海县七一乡,青浦县青东农场和松江县五里塘乡三地的菜青虫进行室内外试验。室内毒力测定表明三地的菜青虫对杀灭菊酯等已产生了不同程度的抗药性。若与较敏感种群相比,三地菜青虫对杀灭菊酯分别产生了34.2倍、37～50倍和16倍的抗药性,对乙酰甲胺磷产生了2.5～8.5倍抗药性,对敌百虫至少产生了378倍抗药性。芝麻油对杀灭菊酯、氟氰菊酯具增效作用,配比为10∶1时,增效比分别为3.02～4.39,1.18～1.23。田间试验对氟氰菊酯有15%的增效效果。田间试验表明,杀灭菊酯防效中等,亩用量6g(ai),处理后10天药效不到80%。氟氰菊酯防效较好,亩用量4g(ai),10天药效在90%以上。喹硫磷对菜青虫防效高,乙酰甲胺磷和敌百虫防效低。     

生防细菌与黄腐酸绿源宝促进棉花生长及防治黄萎病的效果

分析、测定内生细菌73 a、拮抗细菌JB52和化学药剂黄腐酸绿源宝单独使用、混合使用对棉苗生长、棉花产量的影响以及对棉花黄萎病的防治效果。结果表明:73 a和JB52都具有促进棉苗生长和提高棉花产量的作用,特别是73 a的作用最强,苗期株高可增长29.9%,鲜重增加45.2%,田间试验结果籽棉增产11.5%;73 a菌液灌根对棉花黄萎病的防治效果最好,达到50%;黄腐酸绿源宝对棉苗生长和棉花产量没有促进作用,但对防治棉花黄萎病有一定的效能;内生细菌73 a与拮抗细菌JB52或黄腐酸绿源宝混用都不如单独使用效果好。     

山西省棉铃虫抗药性监测

１９９４～１９９５年，用点滴法测定了山西省不同棉区棉铃虫对常用５种农药的抗药性。结果表明，棉铃虫对氰戊菊酯，临猗县处于中－高抗水平，襄汾县和平遥县处于中抗水平；对功夫菊酯，临猗县和襄汾县处于中－高抗水平，平遥县处于中抗水平；３个县棉铃虫对氯氰菊酯、久效磷和对硫磷的抗性分别处于低－中抗水平、中抗水平和敏感水平。抗性水平有逐年上升趋势，尤以对功夫菊酯和氯氰菊酯抗性上升最为突出。３个棉区棉铃虫抗性顺序是临猗县＞襄汾县＞平遥县，抗药性的大小与用药历史和水平有直接的关系。诊断剂量监测结果表明，抗性个体频率随抗性水平的提高而增加。３个监测棉区对菊酯类农药的抗性个体频率均在５８％以上，敏感个体只占棉铃虫群体的４２％以下，如继续大量单一使用菊酯类农药，可预测棉铃虫对该类农药抗药性将会大幅度上升。     

耐氟喹诺酮类鸡源性沙门氏菌DNA旋转酶gyrA基因序列分析

取临床分离的对5种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、单诺沙星和沙拉沙星)均耐药的9株鸡源性沙门氏菌耐药株,提取其染色体DNA。设计引物gyrAF和gyrAR扩增其DNA旋转酶gyrA基因的氟喹诺酮类耐药决定区(QRDR),对PCR扩增产物进行测序及序列分析。与质控菌株相比,9株临床分离耐药株中只有菌株38和60的gyrA基因发生单碱基突变,菌株38的gyrA基因第371位碱基发生C→T突变,菌株60的gyrA基因第350位碱基发生A→C突变,两处突变均位于QRDR内,其余菌株的核苷酸未发生任何突变。菌株38的碱基突变导致gyrA基因第121位氨基酸发生R→C取代,即Arg→Cys;菌株60的碱基突变导致gyrA基因第114位氨基酸发生M→L取代,即Met→Leu。上述结果提示,gyrA基因QRDR突变并非沙门氏菌耐药性产生的主要原因。