模拟运输应激对小鼠小肠黏膜结构及免疫相关细胞数量的影响

为了研究两种不同运输应激对小鼠小肠黏膜结构及免疫状态的影响,试验将健康小鼠12只随机分为3组,即对照组(不处理)、1组(摇床60 r/min处理2 h,作用3 d)和2组(摇床160 r/min处理2 h,作用1 d),采用苏木精-伊红、甲苯胺蓝-乙醇、过碘酸-雪夫氏等染色方法及图像分析法研究不同组小鼠小肠黏膜结构及免疫相关细胞数量的变化。结果表明:除了1组和对照组小鼠空肠绒毛高度与绒毛高度/隐窝深度的比值(绒腺比)差异不显著(P0. 05),且1组小鼠空肠绒毛高度高于对照组外,1组、2组小鼠十二指肠、空肠和回肠绒毛高度与绒腺比均显著低于对照组(P0. 05);与对照组相比,1组小鼠十二指肠和空肠上皮内淋巴细胞数、2组回肠上皮内淋巴细胞数、2组空肠淋巴细胞数均显著增加(P0. 05); 1组、2组小鼠小肠各肠段杯状细胞和肥大细胞数均显著高于对照组(P0. 05)。说明低强度、长时间运输应激和高强度、短时间运输应激对小鼠小肠黏膜结构及免疫状态均有明显影响。     

运输应激对小鼠肠道的病理损伤及Bcl-2和Bax表达的影响

为了探究运输应激对小鼠小肠结构和Bcl-2和Bax表达的影响,本研究以16只ICR小鼠为试验对象,将其随机分为对照组(24℃环境下饲养,除了禁食禁水外不做任何处理)和处理组(人工模拟运输应激,处理条件为35℃、160 r/min摇床处理2h),采集十二指肠、空肠和回肠,HE染色观察小肠病理变化,同时采用免疫组织化学和Western Blot探讨运输应激对小鼠肠道Bcl-2和Bax表达的影响。结果表明:与对照组相比,处理组小鼠小肠组织形态结构损害明显,表现为小肠绒毛断裂、小肠黏膜细胞和隐窝细胞脱落以及淋巴细胞浸润;免疫组化定位发现,对照组Bcl-2和Bax表达强度不高,处理组Bcl-2在损伤的肠黏膜上皮细胞中高表达,Bax在肠腺细胞胞质中高表达;与对照组相比,处理组十二指肠和回肠Bcl-2和Bax的表达量增加(P0.05),十二指肠Bcl-2/Bax比值降低(P0.05),空肠和回肠Bcl-2/Bax比值升高(P0.05)。综上,运输应激会破坏肠道结构的完整性,运输后肠道Bcl-2和Bax蛋白的表达发生变化,表明运输应激对肠道的损伤作用与细胞凋亡途径有关,通过Bcl-2和Bax 2种蛋白进行调节。     

应激宁对HSP70在大鼠应激性溃疡中表达的影响

为了探讨热休克蛋白70(HSP70)在应激性溃疡中表达的变化及应激宁对其变化的影响,选用Wistar大鼠水浸-束缚应激(WRS)4 h的方法,建立应激性溃疡模型.用免疫组织化学方法检测胃黏膜组织HSP70的表达.结果表明,HSP70的表达主要分布在胃腺区,对照组大鼠胃黏膜组织中有散在的表达,应激组中HSP70阳性细胞数目较应激宁组增多,两者具有明显的差异(P＜0.05),而且,应激组和应激宁组中HSP70阳性细胞数目均比对照组明显增多(P＜0.01).表明应激宁对WRS后胃黏膜组织HSP70的表达具有调节作用,这也表明应激宁具有抗应激的作用.     

微生态制剂对幼兔生长及HPA轴5-HT能细胞的影响

本文旨在研究微生态制剂对幼兔生长和下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴5-羟色胺(5-HT)免疫反应细胞的影响.选用108只雄性幼兔随机分为4组:对照组饲喂基础日粮,益生素组在日粮中添加 0.1%蜡样芽孢杆菌PAS38制剂,益生元组在日粮中添加0.2%甘露聚糖制剂,合生元组在日粮中添加0.1%蜡样芽孢杆菌PAS38制剂和0.2%甘露聚糖制剂.其中48只兔(每组12只,每4只为1个重复)用于全程观察生长性能,其余60只家兔饲喂至60、75和90日龄时每组宰杀5只,采用免疫组化法检测HPA轴5-HT阳性细胞数量和表达.结果表明,益生素组和合生元组日增重极显著高于对照组(P<0.01),益生元组显著高于对照组(P<0.05).益生素、益生元、合生元组的料重比分别比对照组下降了13.8%、10.9%、14.9%(P>0.05).微生态制剂对HPA轴5-HT阳性细胞数量变化不显著(P>0.05);75日龄和90 日龄时,益生素和合生元组HPA轴5-HT阳性细胞的表达显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于对照组,益生元组90日龄时HPA轴5.HT阳性细胞的表达显著高于对照组(P<0.05).结果提示,微生态制剂能促进幼兔生长,增强HPA轴中5-HT阳性细胞的表达.     

情绪表露对大鼠脑组织脂质过氧化作用及5-HT的影响

采用冷冻加束缚大鼠,观察情绪的表露对应激性大鼠脑组织脂质过氧化作用及5-羟色胺(5-HT)的影响.结果显示,大鼠正常冷冻束缚后,脑组织丙二醛(MDA)和5-HT含量显著升高,谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降.而情绪的表露处理的大鼠可使应激时脑组织中MDA和5-HT含量显著降低,GSH-Px和SOD活性接近于正常室温下的对照组水平.上述结果提示,紧张情绪和行为的变化可增强脑组织的脂质过氧化作用,而情绪的表露能有效抵御这种脂质过氧化作用,增强脑组织对自由基的清除能力,且情绪与行为的变化和脑组织中5-HT的变化直接相关.     

急性应激后小鼠空间学习记忆及脑内HIF-1α表达的变化

目的研究急性应激强度下小鼠学习记忆能力的变化以及海马和前脑皮层HIF-1α的表达。方法采用电击足底方式对小鼠急性应激处理,通过Morris水迷宫实验检测小鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组织化学方法检测小鼠海马和前脑皮层缺氧诱导因子(HIF-1α)的表达。结果急性应激组小鼠在水迷宫实验中的空间学习记忆能力比正常对照组小鼠明显增强(P<0.05);脑内海马CA1区、CA3区、齿状回和前脑皮层HIF-1α的表达显著增加(P<0.01)。结论急性应激后,HIF-1α在海马和前脑皮层表达增加,可能参与应激引起小鼠学习记忆功能的增强。     

谷氨酰胺对免疫应激仔猪肠道指数的影响研究

本试验采用2×2析因设计,选用96头(28±2)d的(大白×长白)断奶仔猪[平均体重(7.24±0.36)kg],按体重相近原则随机分为4组,第Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮;第Ⅱ组为脂多糖(LPS)免疫应激组,在试验开始7d后注射100μg/kg的LPS;第Ⅲ组为谷氨酰胺(Gln)组,饲喂含Gln浓度为1.2%的日粮;第Ⅳ组为Gln+LPS免疫应激组,饲喂含Gln浓度为1.2%的日粮,7d后注射100μg/kg的LPS,研究谷氨酰胺对免疫应激仔猪肠道指数的影响。试验期14d。结果显示:LPS免疫应激极显著降低了免疫应激仔猪的小肠指数(P0.01),添加Gln极显著提高了免疫应激仔猪的小肠指数和大肠指数(P0.01)。日粮类型与应激的交互作用对仔猪的小肠指数和大肠指数的影响均不显著(P0.05)。     

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。     

CIRP对冷应激小鼠血清生化指标、相关细胞免疫因子及能量代谢的影响

将45只6周龄体质量(18±2)g SPF级雄性SD小鼠随机分为5组(n=5),常温对照组5只(A组);低温对照组冷刺激4、8h各5只(B组);冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA binding protein,CIRP)过表达组冷刺激4、8h各5只(C组),注射CIRP过表达慢病毒液0.1mL;CIRP干扰组冷刺激4、8h各5只(D组),注射CIRP干扰病毒液0.1mL;阴性对照组冷刺激4、8h各5只(E组),注射空载体病毒液0.1mL。A组置于常温(21±0.1)℃条件下饲养,后4组置于低温(4±0.1)℃环境饲养,分别在4h及8h后通过摘除眼球的方法采取血液。采用ELISA法检测血清中IL-1、IL-2、IL-6、GSH-PX、SOD、T-AOC、MDA、丙酮酸、PFK-1、LDH的含量。结果显示:(1)冷应激处理后,小鼠血清中相关细胞因子水平出现明显变化,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关细胞因子的影响差异显著(P0.05);(2)冷应激处理后,小鼠血清中氧化还原指标GSH-PX、SOD、T-AOC、MDA变化非常明显,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关氧化还原指标的影响差异极显著(P0.01);(3)冷应激处理后,血清当中能量代谢相关指标无明显变化,人为的致使CIRP在小鼠体内出现不同的表达对血清中相关能量代谢指标的影响差异不显著(P0.05)。结果表明:在不影响动物机体能量代谢的情况下,CIRP可以有效地抑制细胞内氧自由基的生成,从而提高小鼠抗氧化能力,以及调节动物机体的相关免疫因子,对小鼠抵抗低温应激起到积极地保护作用。     

灵芝多糖硫酸酯对记忆障碍模型小鼠学习记忆能力的影响

为探讨灵芝多糖硫酸酯(GLPS)对D-半乳糖致衰小鼠学习记忆能力的影响,本试验对灵芝多糖(GLP)进行硫酸酯化修饰,将50只昆明系小鼠随机分为5组:空白对照组、模型对照组、阳性对照组(吡拉西坦片50 mg/kg体重·d)、GLP给药组(50 mg/kg体重·d)、GLPS给药组(50 mg/kg体重·d),建立D-半乳糖致衰小鼠模型。进行跳台试验,并检测小鼠脑组织SOD活性和MDA含量的变化;免疫印迹检测小鼠海马组织Bcl-2和Caspase-3的影响。结果发现,GLP和GLPS组均能够明显延长小鼠跳台潜伏期,减少5 min内出现的错误次数,且均可升高SOD活性、降低MDA含量,但GLPS组效果明显优于GLP组;免疫印迹结果表明,GLPS组能够明显降低Caspase-3的表达,增强Bcl-2蛋白的表达,而GLP组影响不明显。说明GLPS可以显著改善D-半乳糖致衰小鼠的学习记忆能力,其机制可能与增强Bcl-2的表达及抑制Caspase-3的表达,抑制海马组织凋亡相关。     

BDNF在急性应激所致小鼠空间学习记忆功能改变中的作用

目的研究急性应激对小鼠空间学习记忆功能及脑内BDNF表达的影响。方法采用足底电击急性应激动物模型,通过Morris水迷宫实验检测试小鼠空间学习记忆能力;以免疫组织化学方法检测脑源性神经营养因子(BDNF)在海马和前脑皮层的表达。结果与正常对照组小鼠比较,急性应激组小鼠在水迷宫实验中的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),而在目标象限的停留时间显著延长(P<0.05);急性应激组小鼠海马CA1、CA3区,齿状回和前脑皮层BDNF的表达明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论急性应激导致小鼠空间学习记忆功能增强,这可能与海马和前脑皮层BDNF表达的上调有关。     

不同营养状态大鼠胃和小肠ERα的表达

为探讨不同营养应激对大鼠胃和小肠内雌激素受体α(ERα)表达的影响,本试验用免疫组织化学SP法分别对标准营养、高营养和低营养条件下健康雄性SD大鼠胃和小肠内ERα阳性细胞的分布和数量变化进行研究.结果发现,ERα阳性细胞在大鼠的胃和小肠内均有分布,以胃的黏膜固有层胃底腺区和小肠的固有层及黏膜下层分布为主.低营养组ERα的表达量显著低于其他组(P＜0.01);低营养恢复标准营养后,胃中ERα的表达量无明显变化,小肠中ERα的表达量极显著升高(P＜0.01);高营养组恢复到标准营养后,胃中ERα表达量显著减少(P＜0.05),十二指肠和空肠中ERα表达量极显著减少(P＜0.01),回肠无明显变化.表明ERα参与食物应激反应中胃肠道的消化和吸收和免疫调节活动.     

牛磺鹅去氧胆酸对热应激小鼠免疫功能的调节作用

为探讨牛磺鹅去氧胆酸(taurochenodeoxycholic acid,TCDCA)对热应激小鼠免疫功能的调节作用,试验将50只小鼠随机分成5组,分别为对照组、热应激组和低、中、高剂量TCDCA组(剂量分别为50、100、200 mg/kg)。热应激组和低、中、高剂量TCDCA组小鼠置于(35.5±0.5) ℃、相对湿度60%环境下连续热应激7 d。结束后分别检测小鼠脾脏指数、血清IgG、小肠sIgA的含量及外周血T淋巴细胞亚群和B淋巴细胞的变化。结果表明,热应激引起小鼠脾脏指数显著下降(P＜0.05),血清IgG、肠sIgA显著升高(P＜0.05),外周血CD8⁺、CD19⁺百分率显著下降(P＜0.05),CD4⁺百分率下降不显著(P＞0.05),CD4⁺/CD8⁺比值显著升高(P＜0.05),表明热应激导致小鼠机体免疫功能发生紊乱。TCDCA对热应激小鼠脾脏指数无显著影响;但能显著抑制热应激引起的血清IgG含量、小肠sIgA含量升高(P＜0.05)和显著提高外周血CD8⁺、CD19⁺百分率(P＜0.05),同时能够调节CD4⁺/CD8⁺ 比值到正常水平。因此,TCDCA对热应激导致的小鼠免疫功能紊乱具有显著的改善作用。     

百香果果壳提取物对热应激小鼠的保护作用

为研究百香果果壳提取物对热应激小鼠的保护作用,本试验选取健康清洁级ICR雄性小鼠40只,随机分为对照组、热应激组、低剂量组和高剂量组共4个组,每组10只。所有小鼠饲喂基础颗粒饲料,正常饮水。低剂量组和高剂量组分别按100和200 mg/(kg·bw·d)剂量灌胃百香果果壳提取物,对照组和热应激组小鼠每天灌胃等量生理盐水。持续灌胃14 d后,除对照组外,其余3个组小鼠每天热处理2 h,连续7 d,期间持续给药。试验结束时,空腹称量小鼠体重;分析小鼠体重变化;采集血液检测血清中谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和热休克蛋白70(HSP70)生化指标,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)细胞因子含量;收集小鼠肝脏和肾脏,观察其组织病理学变化。结果显示,热应激结束后,4个组小鼠体重无显著差异(P>0.05),但热应激组减重最多;与对照组比较,热应激组血清生化和细胞因子各指标均显著升高(P<0.05);与热应激组相比,低剂量组和高剂量组小鼠血清生化和细胞因子各指标均...     

预热诱导HSP70表达对高温引致胚胎损伤的保护作用

用37℃2 h条件下体外培养的小鼠囊胚作为对照,将体外培养至囊胚期的小鼠胚胎分别施以38℃2 h、39℃2 h、40℃2 h的预热应激处理,以观察热休克蛋白70(HSP70)表达对高温所致胚胎损伤的影响。用W estern-b lot技术检测小鼠胚胎内HSP70的表达,然后分别将预热胚胎和对照组胚胎置于42℃高温下处理3 h,用台盼兰拒染法检测胚胎存活率,判断HSP70表达对胚胎抵抗高温损伤有无保护作用。结果显示:39℃热应激处理2 h后,HSP70表达量达到最高水平,与对照组差异极显著(P<0.01);38℃热应激处理2 h和40℃热应激处理2 h组HSP70表达与对照组相比均有显著(P<0.05)增加;预热诱导组胚胎存活率明显(P<0.05)高于对照组,其中以39℃2 h组最高。提示HSP70的高表达可以抵抗胚胎对外界不良因素的刺激。     

运输应激对小鼠心脏和肝脏的病理损伤及对Bcl-2和Bax表达的影响

为了探究运输应激对小鼠心脏、肝脏组织的损伤以及对Bcl-2和Bax表达的影响,试验将小鼠分成对照组和处理组,处理组模拟短途运输环境处理2h,处理完毕后处死所有小鼠,采取心脏、肝脏组织,采用H.E.染色、免疫组织化学和Western-blot等方法检测运输应激对小鼠心脏、肝脏组织的病理损伤及对Bcl-2和Bax表达量的变...     

细胞凋亡抑制基因免疫对小鼠生长及生长激素的影响

本实验用细胞凋亡抑制基因 (bcl- 2 )JLV重组质粒 (JLV -bcl)免疫小鼠 ,测定免疫后小鼠的生长及血浆GH浓度。结果表明 ,经bcl- 2免疫后实验组小鼠体重均低于对照组 ,在 7～ 8周龄时实验A组小鼠体重与对照组存在显著差异 (P <0 .0 5)。用RIA双抗法检测血浆中生长激素 (GH)浓度 ,发现在首免后 3周实验A组小鼠的GH浓度显著低于对照组 (P <0 .0 5)。这些结果均提示bcl- 2基因与小鼠生长有关 ,如果用基因治疗的方法增加bcl- 2基因表达量可以增加小鼠的生长速度     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪小肠黏膜免疫应激的影响

研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激仔猪免疫应激的影响。选取18头健康仔猪,随机分成3个处理(对照组、LPS组和NAC组),每个处理6个重复。对照组和LPS组饲喂基础日粮,NAC组饲喂基础日粮+500 mg/kgNAC。试验期为20 d。LPS组和NAC组于试验第10、13、20天腹膜注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水。第10、20天注射LPS后3 h采血,第21天屠宰,取小肠黏膜。结果表明:NAC缓解了LPS刺激导致的血浆和小肠黏膜中TNF-α、IL-6、PGE2含量的升高(P<0.05),缓解了小肠黏膜HSP70相对表达量的升高(P<0.05)。由此可见,日粮中添加500 mg/kg NAC可有效抑制LPS刺激导致的血浆及小肠黏膜中炎性因子的升高,缓解免疫应激。     

冷热应激对小鼠应激激素含量的影响

为研究冷热应激对神经内分泌系统的影响,试验随机选用30只雌性ICR小鼠,构建慢性冷热应激模型,采用酶联免疫吸附法测定血清中的皮质酮、肾上腺素及生长激素含量,并测量应激前后小鼠体重。结果显示,与对照组相比,冷热应激组小鼠体重显著降低(P<0.05);冷热应激组小鼠皮质酮与肾上腺素含量极显著升高(P<0.01),冷热应激组之间无显著差异(P>0.05)。冷热应激组小鼠血清中生长激素(GH)浓度极显著降低(P<0.01),且冷应激组GH浓度极显著低于热应激组(P<0.01)。结果说明,冷热应激激活机体下丘脑—垂体—肾上腺皮质系统和交感神经—肾上腺髓质系统,致使其分泌更多的皮质酮与肾上腺素来调节并完成对应激的适应,较好地维持内环境的相对稳定,且冷热应激可抑制生长激素的分泌,影响小鼠的生长发育。     

热应激对小鼠心肌的影响及其机制研究

为探讨热应激时间对小鼠心肌损伤的影响及其具体作用机制,本试验通过不同的高温(41℃)时间(0、1、2、3 h)处理小鼠,通过酶联免疫、放射免疫、组织学方法以及Western Blot,检测小鼠血清生化指标、心肌组织病理变化以及内质网应激蛋白的表达。结果表明:随着热应激时间的延长,血液中的CK、CK-MB、LDH和COR都呈上升趋势,热应激组显著高于常温对照组,且应激组间差异显著(P<0.05);光镜和电镜发现热应激小鼠心肌纤维、肌细胞等都不同程度地受损,心肌细胞凋亡、线粒体空泡化、内质网肿胀等程度加剧。Western Blot结果表明,内质网应激蛋白BiP和CHOP随着热应激时间延长表达量逐渐升高。综上,内质网应激可能参与了热应激导致的小鼠心肌损伤。