银川产超广谱β-内酰胺酶菌株CTX-M型耐药基因的分布

为了了解银川市部分医院临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型ESBLs基因分布情况,采用微量肉汤法测定分离自宁夏地区两家医院的45株产ESBLs的大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌对10种抗菌药物的最低抑菌浓度,通过聚合酶链反应(PCR)法及克隆测序分析其所产ESBLs的基因型。结果显示45株菌株对美罗培南全部敏感,对头孢噻肟、奈替米星、氨苄西林、头孢噻吩、头孢曲松、磺胺甲噁唑、卡那霉素的耐药率均在64%以上。45株产ESBLs菌株有41株产CTX-M型,其中CTX-M-14最多见,其次为CTX-M-28。     

12株牛源肺炎克雷伯菌ESBLs类抗生素的耐药性与耐药基因检测

为了解重庆地区12株牛源肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶耐药性及ESBLs基因型分布情况,该试验采用纸片扩散法对12株肺炎克雷伯菌进行超广谱抗菌药物的敏感性检测,通过PCR方法检测其所产生的耐药基因类型.结果表明:12株菌对阿莫西林、氨苄西林的耐药率均为100%,头孢噻吩和先锋霉素Ⅴ的耐药率为17%,头孢曲松的耐药率为0%.产ESBLs菌株3种耐药基因TEM,SHV,CTX-M的检出率分别为100%,42%,67%,以TEM的检出率最高.     

猪源大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检测及其耐药性分析

为了解辽宁地区猪源大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药情况,采用纸片扩散法对从辽宁地区分离到的65株大肠埃希菌进行ESBLs检测及耐药性分析,并用PCR方法对确证的产ESBLs大肠埃希菌进行TEM、CTX-M、OXA和SHV基因型检测。结果发现,在65株大肠埃希菌中,20株大肠埃希菌产ESBLs,阳性率为30.77%;在20株产ESBLs大肠埃希菌中,9株为TEM型,1株为CTX-M型,8株为同时携带TEM型和CTX-M型,1株为同时携带TEM型和OXA型,1株为同时携带TEM型、CTX-M型和OXA型。药敏试验结果表明,产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLS菌株,且产ESBLs菌株均为多重耐药菌株。可见,辽宁地区产ESBLs猪源大肠埃希菌的检出率较高,流行的主要基因型为TEM型和TEM+CTX-M型。     

尿培养中产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测与耐药性分析

目的:了解尿培养中产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的发生率和耐药性,为临床合理选择抗生素提供依据.方法:用VITE K-32型全自动细菌分析系统进行细菌鉴定、药敏分析和ESBLs测定.结果:在87株大肠埃希菌、63株肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率分别为44.8%、39.7%,ESBLs产生株对头孢他啶、头孢噻肟的耐药性高达96.9%～97.2%,较非ESBLs产生株高94.9%.对氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类的耐药性最高分别达到80.5%、91.6%、92.5%,所有受试菌对亚胺培南均敏感.大肠埃希菌对阿米卡星耐药率较肺炎克雷伯菌低.结论:治疗产超广谱β-内酰胺酶菌引起的尿路感染,应选用亚胺培南和含β-内酰胺酶抑制剂复合物以及根据药敏试验结果选用抗生素.     

ESBLs在产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中的流行

为了解河南地区超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因(TEM,SHV,OXA和CTX-M)在产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌的流行,分别设计特异性引物对2005～2008年在河南地区病鸡的病料中分离保存的158株16S rRNA甲基化酶阳性鸡源大肠杆菌进行聚合酶链式反应扩增.检测结果显示,在158株产16S rRNA甲基化酶鸡大肠杆菌中,TEM,SHV,OXA和CTX-M检出率分别为94.3%,2.5%,62%和47.5%.在5组CTX-肘组型中,CTX-M-2组型53株,CTX-M-9组型42株,CTX-M-2 & CTX-M-9组型20株.提示ESBI在河南地区产16S rRNA甲基化酶鸡源大肠杆菌中普遍存在,且以TEM,OXA和CTX-M为主.ESBLs和氨基糖苷类高水平耐药16S rRNA甲基化酶基因同时出现在临床分离株中,加重了兽医临床治疗中抗菌药物选择的困难.     

38株西藏牦牛源肠产毒性大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析

为了解38株西藏牦牛源肠产毒性大肠杆菌携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因亚型流行及耐药性情况。利用药敏试验、PCR检测技术对实验室保存的38株肠产毒性大肠杆菌携带超广谱β-内酰胺酶基因菌株进行耐药性分析及耐药基因研究。ESBLs检测结果显示,在初筛以及确认试验中,有21株牦牛源肠产毒性大肠杆菌检测为产ESBLs菌株,检出率为55.3%。基因型检测结果表明,38株肠产毒性大肠杆菌中有34株产毒性大肠杆菌携带CTX-M-U,检出率为89.5%;13株产毒性大肠杆菌携带CTX-M-1,检出率为34.2%;4株产毒性大肠杆菌携带CTX-M-9,检出率为10.5%;30株产毒性大肠杆菌携带TEM,检出率为78.9%;所有菌株均未检出OXA及SHV基因型。药敏检测结果显示,38株牦牛源肠产毒素大肠杆菌对万古霉素、四环素、复方新诺明、红霉素、氟苯尼考、头孢噻肟等均表现为高度耐药,对头孢噻肟的耐药率高达100%;对氯霉素、诺氟沙星、青霉素、阿奇霉素的耐药率分别为63.2%、50.0%、86.8%、73.7%;仅对链霉素、丁胺卡那、庆大霉素、头孢唑林、头孢西丁等表现为敏感。说明目前西藏地区产ESBLs菌株的确存在,且产ESBLs菌株的基因型以CTX型为主,TEM型次之。ESBLs的产生能明显增加菌株的耐药性,提示我们在临床用药中,不仅要合理使用抗生素,而且还要注意结合酶抑制剂的联合应用。     

青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析

【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%（207/249）的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著（P＜0.05）,而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%（P=0.035）;CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶状况及耐药性分析

目的 检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)状况及其耐药性.方法 对临床分离出的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌进行检测,确定产ESBLs菌株,并进行常用11种抗生素耐药性分析比较.结果 变形杆菌产ESBLs率为3.9%,低于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌(P＜0.01);变形杆菌与大肠埃...     

医院获得性肺炎中肺炎克雷伯菌分离株的耐药性及超广谱β-内酰胺酶检测

目的 了解医院获得性肺炎中肺炎克雷伯菌(KPN)分离株的耐药性及超广谱β-内酰胺酶(ESBL).方法 收集90株医院获得性肺炎KPN,采用全自动微生物分析仪检测抗菌药物敏感性和ESBL产生.结果 KPN对氨苄西林、头孢唑林、头孢他啶、头孢噻肟和四环素耐药率均超过50.0％.ESBL阳性KPN株占41.1％.ESBL阳性株对头孢唑林、头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星和左旋氧氟沙星耐药率明显高于ESBL阴性株(P＜0.05).结论 本地区医院获得性肺炎中KPN分离株耐药率和ESBL阳性率较高.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

目的:检测临床标本中产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,分析其耐药性,为指导临床合理地选用抗菌素提供可靠的依据。方法:用VITEK-32型全自动细菌分析系统进行细菌鉴定、药敏试验和ES-BLs测定。结果:产ESBLs大肠埃希菌为43.1%,产ESBLs肺炎克雷伯菌为19.4%;2种产ESBLs菌对氨苄西林、头孢唑林等7种抗生素的耐药率为100%,对头孢吡肟、环丙沙星等8种抗生素耐药率为54.5%~85.7%,而对亚胺培南敏感未出现耐药现象。结论:临床标本产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,应限制广谱β-内酰胺类抗生素特别是第三代头孢菌素的使用;亚胺培南可作为治疗产ESBLs菌严重感染的首选药物。ESBLs;大肠埃希菌;肺炎克雷伯菌;耐药性     

一株牛源肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定与耐药基因型检测

从病死犊牛肺脏组织中分离到一株革兰阴性短杆菌,进行了细菌分离纯化、生化试验、16SrDNA测序鉴定、小鼠致病性试验、药敏试验,及碳青霉烯类酶与产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)等7种耐药基因的PCR检测。结果鉴定该菌为肺炎克雷伯氏菌,其16S rDNA扩增序列与GenBank中肺炎克雷伯氏菌同源性达99%。对小鼠致病性强。该菌分离株对氨苄西林、头孢呋辛、复方新诺明、红霉素耐药,而对碳青霉烯类、第四代头孢等受试药物均为敏感。耐药基因PCR检测仅扩增出约862 bp的SHV基因片段,与公布的SHV-1基因序列同源性达99.3%。该牛源克雷伯氏菌分离株耐药表型与耐药基因检测结果一致。     

兔源产ESBLs大肠杆菌耐药性与优势基因型研究

【目的】对四川地区兔源大肠杆菌(Escherichia coli)产ESBLs菌株的耐药特征及ESBLs流行基因型和基因亚型进行研究,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供参考。【方法】采用K-B纸片扩散法对97株兔源大肠杆菌进行药物敏感性试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测,同时采用PCR方法及序列分析,确定其基因型和基因亚型。【结果】兔源大肠杆菌产ESBLs菌的检出率为71.13%(69/97);产ESBLs菌对12种药物的耐药率均高于非产ESBLs菌株,其中对头孢西丁、头孢唑啉、头孢他啶、阿米卡星和诺氟沙星的耐药率在产ESBLs菌和非产ESBLs菌中差异显著(P0.05);产ESBLs菌多重耐药程度极显著高于非产ESBLs菌(P0.01),其多重耐药率分别为100%和85.71%。TEM、CTX-M和OXA型基因的检出率分别为62.32%,63.77%和23.19%,未检测到SHV型基因;产酶菌分属于10个基因亚型,其中TEM-1、CTX-M-14和OXA-1亚型分别是各基因型的优势基因亚型。【结论】四川地区兔源产ESBLs菌多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌;产ESBLs大肠杆菌中的流行基因型与国内其他地区一致,为TEM型和CTX-M型,但基因亚型存在差异,TEM-1、CTX-M-14和OXA-1亚型分别是各基因型的优势基因亚型。     

鸭大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测(ESBLs)及药物敏感性测定

对国内7个省份临床分离的32株鸭大肠杆菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测及药物敏感性研究。结果表明,32株分离的鸭大肠杆菌中产ESBLs菌株7株,阳性检出率为21.87%;产ESBLs菌株对常用头孢三代及半合成青霉素类药物的敏感率低于42.9%,耐药率则高于28.6%,对阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋的耐药率高达100%。产酶菌株和非产酶菌株对新型头孢四代产品头孢吡肟及碳青霉烯类药物亚胺培南、美罗培南的敏感率高于96%。加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素如阿莫西林/棒酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦等对产酶菌株和非产酶菌株的敏感率全部高于未加酶抑制剂的单方药物。产ESBLs菌株存在多重耐药现象,酶抑制剂能够部分解决此类耐药性问题。     

重症监护病区肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶的检测

目的：了解重症监护病区(ICU)患者感染肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的检出率及对13种抗生素的耐药情况。方法：收集ICU病区呼吸道感染患者痰标本中分离出的肠杆菌科细菌218株．用标准纸片扩散法检测ESBLs,用K—B琼脂扩散法做药敏试验。结果：218株肠杆菌科细菌中,共检出产ESBLs菌56株,检出率为25．7％,其中肺炎克雷伯菌为35．4％,大肠埃希菌为30．2％。亚胺培南对ESBLs全部敏感．头孢哌酮／舒巴坦耐药率较低．其余抗生素耐药率均较高。结论：ICU病区呼吸道感染患者痰中肠杆菌科细菌产ESBLs情况严重,临床实验室有必要建立制度．常规检测ESBLs．亚胺培南和头孢哌酮／舒巴坦是治疗由产ESBLs菌株感染的有效抗生素。     

禽致病菌ESBLs和AmpC酶的检测及药敏分析

用全自动微生物鉴定系统(VITEK-32)鉴定了禽分离致病菌,分别进行了β-内酰胺酶(BLA)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的检测,并用试管两倍稀释法测定了各种抗生素对非产酶菌、产ESBLs菌及产AmpC菌的抗菌活性。结果表明,鉴定分离的20株致病菌有大肠埃希菌15株、阴沟肠杆菌1株、铜绿假单胞菌1株、法氏柠檬酸杆菌1株、肺炎克雷伯菌1株及鹑鸡肠球菌1株,其中法氏柠檬酸杆菌、肺炎克雷伯菌及鹑鸡肠球菌系兽医上首次检出。报道所分离的20株致病菌均产β-内酰胺酶,其中产ESBLs 9株,同时产ESBLs和AmpC酶1株。产酶菌株对抗生素的耐药性严重,而抗生素/抑制剂联用能降低药物对细菌的MICs。     

不动杆菌产酶耐药表型分析

目的:探讨不动杆菌院内感染株的菌型分布、产酶与耐药率,以指导临床合理用药.方法:按临床检验操作规程进行菌株分离鉴定,以Nitrocefin法检测β-内酰胺酶,用三维试验与K-B法进行酶型分析与药敏试验.结果:在212株不动杆菌中,鲍曼不动杆菌175株占82.5%、洛菲不动杆菌25株占11.8%、醋酸钙不动杆菌12株占5.7%.β-内酰胺酶阳性占63.7%,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)40.7%、AmPC酶54.1%、金属酶(MBL)4.5%、同时产ESBL与AmPC酶0.7%.对常用抗菌素耐药率:产酶菌株高于不产酶株;鲍曼不动杆菌高于其它不动杆菌.亚胺培南(IPM)敏感率97.2%、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)敏感率65.6%,其它抗菌素敏感率均未超出50%;IPM除对产MBL菌株耐药外,对其它产酶株与不产酶株均保持敏感.结论:不动杆菌的菌型分布以鲍曼不动杆菌为主;产AmPc与ESBL是主要耐药机制;除对IPM比较敏感外,不动杆菌对其它常用抗菌素普遍耐药.     

大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的检测与耐药性分析

目的通过对临床上分离出的大肠埃希菌株和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测及其耐药性分析。方法临床上用API20E自动细菌分析仪分离出232株大肠埃希菌,经过鉴定确认ESBLs菌株,并用纸片扩散法做药敏试验。结果共检出产ESBLs108株。产ESBLs菌呈多重耐药,其耐药率明显高于非产ESBLs菌,对产ESBLs菌具较高抗菌活性的抗生素有亚胺培南或美洛培南。结论临床上出现的产ESBLs大肠埃希菌的耐药率较高,应引起临床高度重视。     

鸭大肠杆菌耐酶抑制剂β-内酰胺酶(IRBLs)的检测及耐药性分析

根据耐酶抑制剂β-内酰胺酶(IRBLs)的耐药表型特点,应用纸片扩散法(K-B法)检测40株鸭大肠杆菌产IRBLs情况并分析产IRBLs菌的耐药性。结果表明:产IRBLs阳性株4株,阳性率为10%,其对阿莫西林、阿莫西林/棒酸、氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、替卡西林/棒酸、氟苯尼考、庆大霉素、新霉素、多西环素耐药,说明IRBLs产生菌已在我国兽医临床上出现,且呈现多重耐药的特点。此外,2株产IRBLs菌对哌拉西林/三唑巴坦敏感,表明三唑巴坦对哌拉西林有一定的保护作用。再者,1株产IRBLs菌对三代头孢耐药,该菌株可能同时产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)或AmpC酶,这提示IRBLs发展的新趋势。     

猪鸡致病菌β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶检测与药敏试验

 对分离的猪鸡致病菌，分别进行了?－内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测，并用试管二倍稀释法测定了β－内酰胺环类抗生素或β－内酰胺环类抗生素与抑制剂舒巴坦联用对非产酶菌、产?－内酰胺酶菌、产ESBLs菌的抗菌活性。结果表明，43株分离菌的大多数可产生?－内酰胺酶，3株鸡志贺氏菌为ESBLs阳性菌株。30株分离产酶菌均对阿莫西林、氨苄西林耐药（MIC≥32 ?g/ml），16株非产酶菌（标准菌株及分离株）中的15株对阿莫西林、氨苄西林敏感，只有一株非产酶分离菌耐药。氨苄西林与舒巴坦以2∶1、4∶1配比联用时，其对分离产酶菌的MIC值分别降低10~40倍、10~20倍。临床致病菌对三代头孢均敏感，与舒巴坦以2∶1、4∶1配比联用时，三代头孢的MIC值不变。当头孢噻呋、头孢曲松与舒巴坦以2∶1配比联用时，其对产ESBLs菌的MIC值降低2～4倍。     

CTX-M型超广谱β-内酰胺酶研究进展

产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)是细菌对β-内酰胺类抗生素最重要的耐药机制。近年来,随着抗菌药物尤其是头孢菌素类药物在临床的广泛应用,CTX-M型ESBLs菌株的蔓延势头愈发强劲,在许多国家和地区流行与传播,逐渐成为ESBLs流行的主要类型,给人类和动物的健康带来了很大威胁。鉴于此,就近年来CTX-M型ESBLs的发现、种类、生化特性、流行特点及治疗措施等方面进行综述,并对CTX-M型ESBLs基因的突变、转移及与之相关的转位因子、基因转移的遗传背景等方面进行综述,以期为产酶多重耐药菌的控制提供参考。