杏鲍菇多糖的提取及其对RAW264.7细胞吞噬活性·NO释放的影响

[目的]以杏鲍菇多糖的理化性质作为综合评价指标,提取杏鲍菇多糖,并研究其对RAW264.7细胞吞噬活性的作用及对NO释放的影响。[方法]采用水煎煮提取、超声提取、90℃热水浸提、70℃热水浸提、50℃热水浸提提取杏鲍菇多糖,并采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法以及Lowry法测定其总糖、酸性糖和蛋白质含量;采用PMP柱前衍生化法和HPGPC法测定其组成糖和分子量分布;采用吞噬中性红法和Griess试剂盒法测定其吞噬能力及NO的释放量。[结果]试验得出,50℃热水浸提提取的多糖总糖含量最高,超声提取的多糖蛋白质含量最高,各组提取酸性糖含量相当且均较低,水煎煮提取多糖中的单糖种类最少、分子量最低。综合比较,90℃热水浸提为杏鲍菇多糖的最佳提取方法;在质量浓度为25~100μg/m L,能够极显著地促进细胞吞噬中性红的能力和NO的释放。[结论]90℃热水浸提水煎煮为杏鲍菇多糖的最佳提取方法,一定浓度的杏鲍菇多糖能够提高RAW264.7细胞的吞噬活性,并能促进NO的释放,提示杏鲍菇多糖具有一定的免疫活性。     

不同方法提取海洋硅藻粗多糖的比较

采用不同提取方法(水提法、酸提法、碱提法、超声辅助法、冻融辅助法等)从室外培养的海洋硅藻生物质中提取粗多糖。通过比较不同方法下的粗多糖提取率、多糖总糖、蛋白质及硫酸基含量筛选较优的方法。试验结果显示,水提法的粗多糖提取率最低,浓碱法粗多糖提取率最高。物理法(超声、冻融结合高温法)提取的粗多糖中总糖含量总体比化学试剂法(酸碱法)高,以冻融+90 ℃最高,稀酸法最低;硫酸基含量则以稀酸法最高,浓碱法最低。综合单位质量海洋硅藻生物质粗多糖提取率与单位质量粗多糖组成的结果可知,单位质量硅藻生物质提取的总糖量大小为:浓碱+冻融法>浓碱+冻融+90 ℃法>浓碱法>稀酸法>超声+冻融+90 ℃>稀碱法>超声+冻融>冻融+90 ℃;硫酸基质量以浓碱+冻融法最高,稀碱法最低。这些结果表明,利用浓碱+冻融法可从海洋硅藻中提取出较多多糖并使硫酸基处于较高水平,利于硅藻多糖后续的纯化与利用。进一步利用浓碱+冻融法提取4种海洋硅藻(角毛藻、菱形藻、茧形藻、海链藻)粗多糖,结果表明,单位质量生物质提取的粗多糖总糖含量以茧形藻最高(约24%),海链藻最低(约5%);硫酸基含量则以角毛藻最高(5.05%),茧形藻最低(0.51%)。     

白玉菇等4种食用真菌多糖含量的比较研究

[目的]测定并比较口蘑、杏鲍菇、白玉菇、蟹味菇中多糖的含量。[方法]采用水提醇沉法提取4种食用真菌多糖,通过苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖为对照品,测定这4种食用真菌的多糖含量。[结果]葡萄糖标准曲线方程为:y=7.723 5x+0.026 3,相关系数r=0.997 8,线性关系良好,口蘑、杏鲍菇、白玉菇、蟹味菇中多糖含量分别为15.63%、52.38%、33.57%、31.79%。[结论]该法操作简单、准确,具有较好的稳定性。这4种食用真菌都含有丰富的多糖成分,其中杏鲍菇的多糖含量最高,口蘑的多糖含量最低,白玉菇与蟹味菇的多糖含量相当。     

不同产地山药不同分子量段多糖含量及活性的比较

为了比较怀山药与其他3种产地山药的不同分子量段多糖含量以及各山药多糖的活性,采取一步醇沉和分步醇沉法提取不同产地山药的4种山药多糖YPS_(总)、YPS_(40)、YPS_(60)、YPS_(80);用MTT法测定各山药多糖对PK-15细胞的安全浓度;然后分别从125μg/m L倍比稀释5个浓度,将4种山药多糖以先加山药多糖再加病毒的方式加至PK-15细胞培养体系中,用MTT法检测PK-15细胞活性,实时荧光PCR法检测PPV-SD1含量。结果表明:怀山药多糖各分子量段的多糖含量均高于其他产地山药,均以YPS_(80)分子量段的多糖含量最高,且以怀山药的YPS_(80)的增强细胞活性和抗PPV-SD1感染效果最好。可见怀山药的药效作用优于其他产地山药是有一定物质基础的。     

假芝子实体粗多糖组成及抗氧化和免疫活性研究

【目的】提取假芝子实体多糖,研究其粗多糖组成及其抗氧化活性等,为假芝资源开发利用提供参考。【方法】以人工驯化栽培的假芝子实体为材料,采用热水浸提法,经脱蛋白、冷冻干燥获得粗多糖,采用 HPLC、GPC、凯氏定氮法等分析多糖组分、分子量和蛋白质、氨基酸组成,检测假芝多糖清除羟基自由基、ABTS 自由基抗氧化活性,用 MTS 法检测假芝多糖对巨噬细胞 RAW264.7 增殖的影响。【结果】假芝子实体粗多糖为棕褐色粉末,当浓度为 1.5 mg/mL 时羟基自由基、ABTS 自由基清除率分别达 90.26%、83.95%,一定范围内能促进 RAW264.7 巨噬细胞的增殖。假芝子实体多糖蛋白质含量为 16.99%,含有 17 种氨基酸,其中必需氨基酸占 28%,以天冬氨酸和谷氨酸含量最高,二者占比超过 30%。多糖组分由半乳糖、岩澡糖等 10 种单糖组成,其中半乳糖、葡萄糖、甘露糖含量最高,3 种单糖含量占 67.87%。假芝粗多糖数均分子量（Mn）为 28.239 ku,重均分子量（Mw）为 57.502 ku,分布系数 α（Mw/Mn）为 2.036。【结论】假芝粗多糖为含有蛋白质的杂多糖,对羟基自由基、ABTS 自由基清除效果好,为更好的推广应用和科学开发假芝提供了科技支撑。     

4种食用菌多糖含量的比较

采用蒽酮-硫酸法测定并比较了银耳、黑木耳、草菇和猴头菇4种食用真菌中多糖的含量。结果表明,4种食用菌中,黑木耳多糖含量最高,达到7.39%,草菇的多糖含量最低,仅为2.5%。     

参豉糖蛋白提取工艺优化及纤溶活性研究

[目的]对参豉中糖蛋白的提取工艺进行考察,并对其纤溶活性进行评价。[方法]以糖蛋白提取率为指标,通过单因素法考察缓冲液、提取温度、料液比、提取时间和提取次数对其的影响,并运用响应面法分析优化参豉糖蛋白的提取工艺,采用蒽酮-硫酸法测定糖蛋白中多糖含量,SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳确定糖蛋白的分子量,利用琼脂糖纤维蛋白平板法测定纤溶活性。[结果]缓冲液、提取时间和料液比对糖蛋白提取率影响较大;响应面法优化获得参豉糖蛋白的最佳提取工艺条件为Tris-Base-NaCl缓冲溶液(pH=8.04)、料液比1∶10(g∶mL),于4℃提取6 h,参豉糖蛋白提取率为4.85%,其中多糖含量为12.34%;SDS-PAGE、Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,参豉糖蛋白分子量为4.1～27.0 kD;与豆豉糖蛋白相比,参豉糖蛋白纤溶活性提高了40.6%。[结论]经验证利用响应面法分析测得参豉糖蛋白与模型预测值接近,可用于参豉糖蛋白的提取,且参豉糖蛋白具有较高的纤溶活性,为其进一步开发利用提供依据。     

4种真菌粗多糖体外抗肿瘤作用研究

[目的]筛选具有抗肿瘤活性的真菌发酵液多糖。[方法]水提醇沉法提取真菌粗多糖,蒽酮-硫酸法测定糖浓度,MTT法测定多糖对体外肿瘤细胞增殖的抑制作用。[结果]在测试浓度范围内,树舌发酵液多糖对人大肠癌细胞SWWC116、人宫颈癌细胞Hela、人肺腺癌细胞NCI-446的最高抑制率分别为80.3%、74.1%、78.5%;榆耳发酵液多糖对NCI-446、SWWC-116、Hela细胞,小刺猴头发酵液多糖对NCI-446细胞的最高抑制率达50%;其余多糖抗肿瘤活性不明显。[结论]树舌发酵液多糖具有抗肿瘤活性。     

雌雄全蝎中蛋白质及多糖含量的测定与比较

分别采用考马斯亮蓝法和苯酚-硫酸法测定雌雄全蝎中蛋白质及多糖的含量,研究雌雄全蝎中蛋白质及多糖的含量差异。结果表明:雄蝎中蛋白质和多糖含量分别为83.9 mg/g和3.21 mg/g,雌蝎中蛋白质和多糖含量分别为68.3 mg/g和4.45 mg/g,雄蝎中含有较多的蛋白质,而雌蝎中含有较多的多糖。雌蝎、雄蝎中所含蛋白质及多糖的含量存在差异,预测其药效作用也应有一定区别。     

凝胶渗透色谱联用多角度激光光散射测定铁皮石斛多糖分子量及其分布

为研究铁皮石斛多糖的分子量及其分布,采用凝胶渗透色谱-多角度激光散射联用技术,对不同种源地铁皮石斛多糖分子量及其分布进行测定。结果表明,它们的重均分子量、多分散系数和旋转半径分别为:2.975×10⁵~3.741×10⁵ u、1.289~1.502和60.3~61.1 nm。该方法快速、简便,可用于测定铁皮石斛多糖的分子量及其分布,为铁皮石斛的种源优选和质量控制提供了依据。     

猴头菌子实体与菌丝体粗多糖理化性质及抗胃粘膜细胞氧化活性比较

[目的]比较猴头菌子实体、菌丝体粗提物理化性质,以及2组粗多糖对胃粘膜上皮细胞氧化模型保护能力的差异。[方法]采用水提醇沉法提取粗多糖,用苯酚-浓硫酸法测定葡萄糖含量、间羟基联苯法测糖醛酸含量、BCA法测量蛋白质含量。每组分别加入一定浓度的含粗多糖的培养基,分别培养12、24、48 h后加入含过氧化氢培养基。用MTT法测细胞活度。[结果]猴头菌菌丝体、子实体粗多糖中葡萄糖含量分别为49.5%、44.5%,糖醛酸含量分别为22.01%、29.23%,蛋白质含量分别为27.69%、23.54%。菌丝体组12、24、48h抑制率分别为75.1%、68.1%、16.9%;子实体组分别为70.2%、61.8%、16.7%。[结论]猴头菌菌丝体与子实体粗多糖中糖醛酸、葡萄糖、蛋白质含量相近。子实体粗多糖比菌丝体粗多糖抗氧化活性短时间内略强,长时间无差异。     

食用菌多糖及其红外光谱分析

为更好地开发利用食用菌资源,采用热水浸提和乙醇沉淀法纯化得到香菇、金针菇、草菇、平菇、杏鲍菇和茶树菇6种食用菌多糖,苯酚-硫酸法测其多糖含量,其范围为6.80±0.19~31.87±0.27 mg.g-1;红外光谱进一步对多糖结构进行分析,结果表明：6种食用菌多糖具有明显的多糖特征吸收峰,且结构相似。     

天麻多糖的提取工艺及含量测定研究

[目的]对天麻多糖的提取工艺进行研究并测定其各组分中多糖、蛋白质和糖醛酸的含量。[方法]用正交试验对天麻多糖的提取工艺进行优选,然后采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法和考马斯亮兰法分别测定天麻多糖及其各组分中总糖、糖醛酸和蛋白质的含量。[结果]最佳提取工艺条件为A2B2C3,即:提取温度为70℃,提取时间为2.5 h,提取次数为3次;在此条件下,多糖提取率达13.15%。天麻多糖及其各组分中糖含量分别为65.8%、84.6%和87.3%,蛋白质含量分别为2.9%、0.28%和2.7%,糖醛酸含量分别为29.7%、26.3%和39.6%。[结论]该方法简便、快速、准确,灵敏度高,为天麻多糖生产的质量控制提供了依据。     

3种黑木耳营养成分比较分析

为提供营养全面、质量安全的桑枝黑木耳,合理利用桑树伐条修剪产生的大量废弃枝条,提高黑木耳产品质量安全,促进食用菌及蚕桑产业的健康多元化发展,参照食用菌等食品国家标准方法对桑枝黑木耳与野生柞树黑木耳和市场普通黑木耳的常规营养成分、氨基酸、矿物质含量和重金属含量等进行比较分析。结果表明,桑枝黑木耳中粗蛋白、总糖含量均高于野生柞树黑木耳和普通黑木耳;粗脂肪、粗纤维含量低于野生柞树黑木耳和普通黑木耳;桑枝黑木耳中富含17 种氨基酸,包括8 种人体必需氨基酸中的7 种,总氨基酸含量高达10.51%;桑枝黑木耳中硒含量较高,为0.17 mg/kg,符合富硒食用菌的硒含量标准;铅、汞、镉、砷等重金属含量非常低,完全复合食品食用安全规定。桑枝黑木耳具有很好的营养膳食结构组合,是很有开发前景的富硒食用菌;用桑枝屑栽培黑木耳等食用菌,对蚕桑产业的可循环发展、保护生态环境促进食用菌产业发展均具有积极意义。     

不同树龄武夷水仙茶多糖抗氧化活性研究

为探明不同树龄武夷水仙茶叶中主要生化成分及其茶多糖的抗氧化活性的差异,以树龄为6、30、60a的武夷水仙茶叶为试材,测定了主要生化成分含量,通过水提醇沉淀法提取茶多糖,分析了茶多糖的基本组分,并研究了3种茶多糖清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的活性。结果表明:3种水仙茶叶中茶多酚、游离氨基酸和黄酮类含量随着树龄的增长逐渐降低,可溶性糖含量随树龄的增长而升高;3种武夷水仙茶多糖的得率及其组分中的中性糖、蛋白质、糖醛酸、茶多酚的含量存在明显差异,茶多糖的得率随树龄的增长而提高,得率较高的老丛水仙茶多糖组分中的中性糖、蛋白质的含量也较高;3种茶多糖清除DPPH自由基的能力较为接近,其IC50分别为:0.051、0.055、0.060mg·mL-1;3种茶多糖清除超氧阴离子自由基的能力存在明显差异,其IC50分别为:1.131、1.121、0.431mg·mL-1,树龄为60a的老丛水仙茶多糖清除超氧阴离子自由基活性明显高于树龄为6和30a的水仙茶多糖,具有较强的抗氧化活性。     

不同灭菌方法对蟹味菇培养料中氨基酸含量的影响

[目的]筛选适合蟹味菇培养料的灭菌方法。[方法]分析3种灭菌方式(常压灭菌、普通高压灭菌、阶梯式高压菌灭)对蟹味菇培养料中氨基酸含量的影响。[结果]阶梯式高压灭菌培养料中氨基酸总含量最高(27.87%),而常压灭菌的氨基酸总含量最低(21.41%)。3种灭菌方式处理后的培养料中谷氨酸含量最高,天门冬氨酸和亮氨酸含量次高。[结论]阶梯式高压灭菌在工厂化规模化食用菌栽培中是一种比较好的灭菌方法。     

铝胁迫下豌豆根边缘细胞和根细胞壁多糖组分含量的变化

 【目的】明确根边缘细胞与根对铝敏感性差异及其与细胞壁多糖组分含量的关系。【方法】以中豌五号为材料,采用雾培法,研究铝胁迫下豌豆根边缘细胞和根细胞壁多糖组分含量的变化。【结果】在4.0 mmol?L-1AlCl3处理24 h后,边缘细胞活性显著降低,细胞活性抑制率达到了19.2%,根系相对伸长的抑制率为10.1%。无铝条件下,边缘细胞的细胞壁果胶、纤维素糖醛酸和总糖含量显著高于根段细胞壁。4.0 mmol?L-1 A1C13处理后,豌豆0～10 mm和10～20 mm根段细胞壁果胶糖醛酸含量提高,边缘细胞提高幅度尤为明显;边缘细胞果胶总糖含量显著提高,半纤维素和纤维素总糖显著降低,而2个根段细胞壁果胶、半纤维素和纤维素总糖含量提高。边缘细胞果胶、半纤维素和纤维素的铝含量显著高于0～10 mm和10～20 mm根段,0～10 mm根段铝含量高于10～20 mm,且在4.0 mmol?L-1 A1C13处理24 h后边缘细胞果胶1铝含量分别是0～10 mm、10～20 mm根段的14.4和17.4倍;同时,边缘细胞细胞壁半纤维素和纤维素多糖较果胶高,且含有相当量的铝。【结论】豌豆根边缘细胞细胞壁果胶含量显著高于2个根段,与铝含量呈显著正相关,显示果胶含量高的边缘细胞与根尖相比对铝毒更为敏感,同时,边缘细胞细胞壁多糖(包括果胶,纤维素和半纤维素)可能与铝的结合有重要作用。     

花生烘烤食用品质评价及指标筛选

[目的]探索花生烘烤食用品质评价方法,筛选评价指标,建立预测模型,为花生食用品质育种提供依据.[方法]以51个不同品质类型花生品种(系)的籽仁为试验材料,测定烘烤籽仁的食味指标、外观指标、质构指标和营养指标等食用品质相关指标27项,运用相关分析、主成分分析对花生烘烤食用品质进行综合评价,通过聚类分析对51个花生品种(系...