低氧胁迫对西伯利亚鲟幼鱼生理状态的影响

为探究低氧胁迫对西伯利亚鲟幼鱼的血液基础指标、抗氧化和能量代谢相关酶活力的影响,以体质量为(19.46±4.9)g的西伯利亚鲟幼鱼为研究对象,开展了低氧(2.3mg/L)胁迫3h和自高氧(18.5mg/L)逐渐降至低氧(2.8mg/L)又恢复到正常溶氧(7mg/L),这两种不同情况下的低氧胁迫试验。检测了血液红细胞数、血红蛋白质量浓度,以及肝脏和肌肉的抗氧化酶活力和鳃组织三磷酸腺苷酶活力。结果显示,低氧胁迫下西伯利亚鲟幼鱼血红细胞数升高,血红蛋白质量浓度、血液pH、肝脏和肌肉的超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力以及碱性磷酸酶活力均低于正常溶氧组,而鳃组织钠/钾—三磷酸腺苷酶活力无明显变化。试验结果显示,急性低氧胁迫能较快使西伯利亚鲟幼鱼血液红细胞数目增加,并影响肝脏、肌肉的抗氧化应激及代谢相关酶活力,但是短时间内西伯利亚鲟幼鱼可能还未实现鳃部的能量调节。     

井冈山地区西伯利亚杂交鲟幼鱼流水健康养殖技术

西伯利亚杂交鲟是西伯利亚鲟和施氏鲟的杂交品种。已有研究表明,西伯利亚杂交鲟较亲本有着耐低氧、生长速度快、适应能力强及肉质更鲜美等特点,受到广大养殖户的追捧。近年来,西伯利亚杂交鲟的养殖规模和产量不断扩大,幼鱼期作为西伯利亚杂交鲟生活的关键阶段,养殖效果直接关系到后续成鱼的生长性能。     

MS-222对俄罗斯鲟幼鱼的麻醉效果

通过观测不同浓度下MS-222处理后俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedtii)幼鱼的麻醉深度、入麻时间和复苏时间,初步确定了适宜麻醉浓度,并通过测定呼吸频率、耗氧率、排氨率和露空苏醒弹动时间等指标分析麻醉对鱼体造成的影响,综合评估了MS-222的适宜麻醉浓度范围。试验结果表明,随着MS-222浓度的增加,血液中药物浓度达到动态平衡时俄罗斯鲟幼鱼的麻醉程度逐渐加深,达到相同麻醉程度所需的时间逐渐缩短,且复苏时间出现上升趋势。麻醉剂浓度在200～300 mg/L时,试验鱼20 min内即可进入较为稳定的麻醉状态。MS-222对试验鱼的呼吸频率有极显著影响,也能有效降低鱼体的耗氧率和排氨率。根据试验结果,可认为最适于俄罗斯鲟幼鱼麻醉运输的MS-222浓度范围为50～60 mg/L,适于俄罗斯鲟幼鱼人工操作的MS-222浓度范围为150～200 mg/L。     

MS-222对岩原鲤幼鱼的麻醉效果

在23~24℃水温条件下,观察研究了MS-222对体长(7.58±0.13)cm,体质量(5.59±0.29)g的岩原鲤幼鱼的麻醉效果。根据麻醉和复苏过程中岩原鲤幼鱼的行为特征变化,将其麻醉过程分为5个时期,复苏过程分为4个时期。结果表明:(1)试验条件下MS-222麻醉岩原鲤幼鱼的有效质量浓度为120~220 mg/L,入麻时间和复苏时间均与麻醉剂浓度呈负相关;(2)麻醉过程中,岩原鲤幼鱼的呼吸频率在M_1、M_2期先急剧升高,M_3期缓慢下降,进入M_4期后呼吸频率急剧下降;(3)空气暴露时间与复苏时间呈正相关(F=31.049,P0.01),暴露240 s和300 s两个试验组幼鱼的复苏时间均超过130 s,与其它组存在显著性差异(P0.05);暴露时间在120 s内,复苏率为100%,超过180 s时,只有部分鱼可以复苏,当暴露时间达到300 s时,复苏率仅为50%。     

西伯利亚鲟和杂交鲟生长的比较

随着鲟鱼养殖业的发展,其苗种供应的矛盾越来越突出。与西伯利亚鲟苗种相比,以小体鲟为母本、西伯利亚为父本的杂交鲟苗种更易得,但由于纯种小体鲟是一种小型鱼类,生长较慢,所以很多养殖户担心此种杂交鲟的生长速度。本试验通过对西伯利亚鲟和以小体鲟为母本、西伯利亚为父本的杂交鲟仔鱼阶段、幼鱼     

温度骤降对西伯利亚鲟心律和鳃动频率的影响

将西伯利鲟（Acipenser baeri）（平均体重为1.09kg,体长60.1cm）从25℃急速降温至1～2℃,然后采用B型超声仪等方法研究其在降温过程中、2℃离水保存过程中和不同复苏时间过程中的心率、鳃动频率和成活率的变化规律。结果表明：温度骤降可使西伯利亚鲟进入休眠状态,2℃离水低温保存30h后可复苏存活,而超过35h后全部死亡。在温度骤降过程中,西伯利亚鲟的心率变化表现为强度减弱和次数逐渐降低。而鳃动频率由75次/min逐渐降低至0次/min,与心率变化不呈线性关系。复苏过程中,受试鱼的心率变化与急速降温的变化规律相同,表现为强度增强后,次数逐渐增加。西伯利亚鲟鱼种的运输实验表明,低温无水运输12h后,西伯利亚鲟（体重为24.69g,体长19.27 cm）的成活率为90%。笔者建议,低温无水方法运输西伯利亚鲟商品鱼时不应超过30h,运输温度应保持稳定,复苏水温必须由低到高递进。     

MS-222麻醉对西伯利亚鲟稚鱼耗氧率与幼鱼血液生化指标的影响

MS-222是一种广泛使用的鱼类麻醉剂,本研究探讨了MS-222对西伯利亚鲟(Acipenser baerii)稚鱼耗氧率与幼鱼血液生化指标的影响.为探明MS-222麻醉剂在西伯利亚鲟苗种运输和生产操作中的适宜浓度,设置10、20、30、40、50 mg/L 5个麻醉组与1个对照组,测定体质量为(1.18±0.49)g...     

电麻醉对珍珠龙胆石斑鱼麻醉效应与血液生化指标的影响

为研究电麻醉工艺对珍珠龙胆石斑鱼麻醉效应与血液生化指标的影响,将暂养24 h后的石斑鱼投入电击箱,采用脉冲直流电压对鱼体进行电击,以未电击组作为对照组,通过计算麻醉率、休眠时间和72 h存活率作为其麻醉效应的评价指标,优选100 V、110 V和120 V 3组电压,通过测定血液中48 h内的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、葡萄糖、乳酸和皮质醇6项血液生化指标,分析鱼体的生理应激情况。结果显示:通电时间一定时,电压越大,麻醉率越高,休眠时间越长,存活率越低;试验鱼在电刺激期与电紧张期停留时间越短;100 V、110 V、120 V电压均能对珍珠龙胆石斑鱼完全麻醉且72 h存活率为100%。100 V试验组平均休眠时间17.0±3.84 min,且各项生化指标均优于其他试验组;与对照组相比,除谷草转氨酶数值较对照组明显上升外,谷丙转氨酶活力、乳酸脱氢酶活力均显著性低于对照组,血清中葡萄糖、乳酸以及皮质醇含量与对照组差异不显著。研究表明,采用100 V标准脉冲直流电电击3 s对鱼体没有永久性损伤,是一种耗时短、伤害小的珍珠龙胆石斑鱼的麻醉方式,可以提升珍珠龙胆石斑鱼保活运输过程中的品质与效率。     

电麻醉对珍珠龙胆石斑鱼麻醉效应与血液生化指标的影响

为研究电麻醉工艺对珍珠龙胆石斑鱼麻醉效应与血液生化指标的影响,将暂养24 h后的石斑鱼投入电击箱,采用脉冲直流电压对鱼体进行电击,以未电击组作为对照组,通过计算麻醉率、休眠时间和72 h存活率作为其麻醉效应的评价指标,优选100 V、110 V和120 V 3组电压,通过测定血液中48 h内的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、葡萄糖、乳酸和皮质醇6项血液生化指标,分析鱼体的生理应激情况。结果显示:通电时间一定时,电压越大,麻醉率越高,休眠时间越长,存活率越低;试验鱼在电刺激期与电紧张期停留时间越短;100 V、110 V、120 V电压均能对珍珠龙胆石斑鱼完全麻醉且72 h存活率为100%。100 V试验组平均休眠时间17.0±3.84 min,且各项生化指标均优于其他试验组;与对照组相比,除谷草转氨酶数值较对照组明显上升外,谷丙转氨酶活力、乳酸脱氢酶活力均显著性低于对照组,血清中葡萄糖、乳酸以及皮质醇含量与对照组差异不显著。研究表明,采用100 V标准脉冲直流电电击3 s对鱼体没有永久性损伤,是一种耗时短、伤害小的珍珠龙胆石斑鱼的麻醉方式,可以提升珍珠龙胆石斑鱼保活运输过程中的品质与效率。     

丁香酚对俄罗斯鲟的麻醉效果

为明确丁香酚麻醉不同规格俄罗斯鲟所需合适浓度,采用净水法,测定了不同质量浓度的丁香酚在不同麻醉时间条件下对俄罗斯鲟的麻醉效果。实验结果表明,随着丁香酚的质量浓度从40 mg/L提高到160.06 mg/L,平均完全麻醉时间从30.50 min减少至1.50 min,平均完全复苏时间从1.12 min增长到10.66 min。而完全麻醉后继续麻醉不同时间实验结果显示,当丁香酚的质量浓度不高于80.02 mg/L时,继续麻醉10 min内复苏率达100%;而质量浓度不低于100.82 mg/L时继续麻醉10 min则出现复苏率下降。相同浓度丁香酚对不同体重俄罗斯鲟麻醉效果实验表明,相同浓度的丁香酚对不同体重的俄罗斯鲟麻醉效果相差不大。结果提示,丁香酚用于俄罗斯鲟麻醉时,应掌握好麻醉浓度及麻醉时间,避免麻醉过度造成损失。     

流速、温度对西伯利亚鲟幼鱼生长的影响

在90 d的饲养实验中,研究了集约化室内储水池养殖条件下,流速和温度对西伯利亚鲟幼鱼生长的影响。按照流速,实验鱼分为4组：即流速分别为 V1组(0.12 m·s-1),V2组(0.16 m·s-1), V3组(0.20 m·s-1),和V4组（0.5 h流速为 0.20 m·s-1, 0.5 h流速为 0 的间隙式水流组）。水温在13.8 ～24.7 ℃变化。 在16.7～22.5 ℃的温度段内,随着流速增大,幼鱼的最终体重、体长、生长效率、净增重、每日生长率及日增重等指标均逐渐增大,饵料系数逐渐降低,其中西伯利亚鲟鱼的生长效率(GE)与流速(V)之间存在显著正相关性,其关系式为GE＝52.5 V + 69.567 (R2 = 0.997, P< 0.05)。尽管高流速V3组的特殊生长率(DGR)是最大的,但V3组在22.5～4.7 ℃之间和13.8～16.7 ℃之间时DGR是最小的。间隙式水流V4组(0.5 h流速为0.20 m·s-1,0.5 h流速为0)DGR和净增重(NY)不是最高,但其饵料系数(FC)和生长效率(GE)分别是各组中最低和最高的,而且在高温和低温段DGR均有比其他组升高的趋势。另外,水流因子与温度交互作用影响西伯利亚鲟幼鱼的生长,本次四组流速组西伯利亚鲟幼鱼的最适生长水温各不相同,在20.2～20.7 ℃之间。结果显示在设施集约化养殖中,V4组能够产生较好的效益。图2表2参22 关键词：西伯利亚鲟; 生长; 集约化养殖; 流速; 温度     

苦草-附着生物复合系统对水体磺胺降解的贡献评估

磺胺类抗生素（Sulfonamides，SAs）在医药和养殖领域的广泛使用，造成自然水体中残留量不断增加，对水生态系统造成严重危害。为此，本研究选择沉水植物苦草（Vallisneria natans）作为实验物种，设置P-V-（无附着生物，无苦草）、P+V-（有附着生物，无苦草）、P-V+（无附着生物，有苦草）、P+V+（有附着生物，有苦草）四种处理，开展静态模拟试验，探讨了沉水植物-附着生物复合系统对磺胺（Sulfonamide，SN）降解效果及各自的贡献。结果表明：在降解水中SN的过程中，P+V+处理组SN浓度由25 mg·L-1降至5.4 mg·L-1，其SN去除率为78.4%，P+V+处理组SN降解效果最好；实验13d时苦草的贡献率为94.34%，发挥着主要作用，附着生物的贡献率为5.66%，起到次要作用；丛毛单胞菌科、细胞弧菌科和腐螺旋菌科为P+V+处理组附着生物的优势类群。本研究结果有助于了解苦草-附着生物复合体对SN降解效果以及苦草和附着生物对SN降解的贡献，对后期研究附着生物的定植演替规律和群落结构特征以及应用“沉水植物-附着生物复合系统”来治理抗生素污染水体提供理论支撑。     

大菱鲆(Scophthalmus maximus)PRL基因、Na+-K+-ATPase a1基因对盐度胁迫的响应

采用荧光定量PCR技术对不同盐度胁迫下各时间点大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼肠、鳃中催乳素(PRL)基因和Na+-K+-ATPase a1两种基因的表达量进行检测。以盐度30为对照组,盐度5、10、40和50为实验组进行数据分析。结果显示,两种基因在两种组织中均有表达,且基因的表达量具有组织和时间特异性。肠组织PRL、Na+-K+-ATPase a1基因的表达量,在盐度50和5条件下,随胁迫时间的延长呈先升高后降低的变化趋势;鳃组织PRL基因表达量,在盐度50和盐度5条件下,随胁迫时间延长先升高后降低,而Na+-K+-ATPase a1基因表达量在低盐条件下(盐度5)没有显著变化,在高盐条件下(盐度50)随时间延长呈现先降低后升高的变化趋势。在肠组织中,两种基因存在极显著的协同作用,随着盐度的升高,两种基因的表达量都呈现先升高后降低的趋势,且相关系数均接近于1;在鳃组织中,在10–40盐度范围内,两种基因的表达存在明显的拮抗作用,当PRL基因的表达量呈现升高(或下降)趋势时,Na+-K+-ATPase a1基因的表达量呈现下降(或升高)趋势,且两种基因的相关系数均为负值。研究表明,PRL具有抑制Na+/K+-ATP酶活性的作用,为今后盐度胁迫分子调控机理研究提供理论依据。     

The effect of feeding three anabolic steroids in different combinations on the growth,food conversion efficiency and protein and nucleic acid levels of liver,kidney, brain and muscle of mirror carp (Cyprinus carpio)

A study on the effect of three different anabolic-androgenic steroids on the growth, food conversion efficiency and nucleic acid contents of liver, kidney, brain and muscle of carp,Cyprinus carpio was undertaken. The three steroids, methyltestosterone (MT), ethylestrenol (EE) and oxandrolone (ON), were fed in different combinations at final concentrations of 5 or 6 mg/kg diet for 60 days. No effect on the growth was observed in any of the experimental groups. A decrease in the specific growth rate (11–21%) and food conversion efficiency (20–29%) was noted. Feeding of drugs increased the cranio-somatic and reno-somatic index in all except one group. Hepatosomatic (ON+MT) and viscero-somatic (ON+MT; EE+MT+ON) indices decreased. Protein increased and RNA/DNA decreased in only one group while a decrease in protein/DNA was observed in the liver of all experimental groups. RNA/DNA increased and protein/RNA decreased only in one group while no effect was seen in protein and protein/DNA contents in any of the treated kidneys. Proteins, protein/RNA and protein/DNA decreased in certain groups in brain tissue. In muscle, no effect was seen in proteins or protein/DNA. Protein/RNA decreased in all but one group while RNA/DNA was higher only in the group fed all the three steroids together.     

尼罗罗非鱼卵巢发育过程中性类固醇激素与卵黄蛋白原含量变化及Vtg mRNA 表达特征

通过组织切片、酶联免疫吸附及荧光定量PCR等方法,研究了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)卵巢发育过程中性类固醇激素(雌二醇E2、孕酮P)、卵黄蛋白原(Vtg)含量及Vtg mRNA相对表达水平变化规律。结果表明,尼罗罗非鱼性腺指数(GSI)与卵巢成熟发育间呈同步性变化,Ⅴ期达到峰值。血清中E2含量自卵巢Ⅱ期开始显著升高,Ⅳ期达到峰值,Ⅴ期后显著下降;血清P含量自卵巢Ⅱ期开始不断升高,Ⅴ期达到峰值,Ⅵ期显著下降;E2、P分别在卵巢成熟发育前期与后期发挥作用。肝中Vtg含量先升、后降,Ⅳ期达峰值;血清、卵巢中Vtg含量均自Ⅱ期开始增加,Ⅴ期达峰值,Ⅵ期显著降低;不同组织中Vtg含量变化与卵巢成熟发育间存在密切关联。肝中Vtg mRNA表达水平在Ⅲ期达到峰值,Ⅳ期后持续下调;卵巢中Vtg mRNA表达水平相对较低,Ⅴ期达到峰值;初步推测肝、卵巢同是尼罗罗非鱼Vtg合成部位,肝是Vtg合成的主要器官,在卵黄积累阶段最为活跃,而卵巢Vtg合成水平相对较低。     

饲料中添加复合芽孢杆菌对凡纳滨对虾抗病毒感染能力及抗病基因表达的影响

自健康凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分离到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)和短小芽孢杆菌(B. pumilus),将上述芽孢杆菌以单一和3株复合的方式包裹在基础饲料表面,制成益生菌饲料;每日投喂对虾,3周后进行白斑综合征病毒(WSSV)人工感染。统计实验组和对照组的累积死亡率,测定对虾鳃组织内WSSV拷贝数,分析对虾肠道组织含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶基因(Caspase)和硫氧还原蛋白基因(Trx)的相对表达量。结果显示,感染实验结束时,A组(枯草芽孢杆菌)、B组(地衣芽孢杆菌)、C组(短小芽孢杆菌)和D组(枯草芽孢杆菌+地衣芽孢杆菌+短小芽孢杆菌复合益生菌)的对虾累积死亡率分别为(73.3±7.0)%、(63.3±5.5)%、(75.0±7.9)%和(50.0±5.3)%,显著低于对照组(PBS组)(100%);在整个感染阶段,各实验组的病毒拷贝数呈先上升后下降的趋势,但对照组呈现一直上升趋势,且显著高于实验组。抗病基因表达结果显示,WSSV感染后,各组对虾肠道Caspase相对表达量随感染时间的延长呈先上调再下调的趋势,且在18 h各组对虾肠道Caspase表达量达到最大值;益生菌摄取和WSSV感染都能刺激Trx的表达,益生菌的刺激相对平缓,且各实验组对虾肠道Trx相对表达量在WSSV感染后的18 h时陡升到最大值,极显著高于对照组,且以D组的激活能力最强。研究证实,枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌均可提高对虾抗WSSV感染能力,复合芽孢杆菌抗病毒能力最突出。对虾抗病力的提高可能与芽孢杆菌减缓了病毒在靶组织的增殖速率、提高了Caspase和Trx基因表达水平相关。     

Minimally invasive evaluation of the anaesthetic efficacy of MS‐222 for ornamental discus fish using skin mucus biomarkers

Skin mucus has been demonstrated to provide stress biomarkers for evaluating the physiological status, providing new convenient and non‐invasive methods to detect stress response in fish. Here, we investigated the anaesthetic efficacy of tricaine methanesulphonate (MS‐222; 75–115 mg/L) for discus Symphysodon aequifasciata (34.27 ± 4.46 g; 8.10 ± 0.59 cm) using skin mucus stress biomarkers. The induction time, recovery time and respiratory frequency were also determined. According to the criteria for anaesthesia and recovery, discus fish to reach stage A3 (deep anaesthesia) within 3 min and to reach stage R4 (full recovery of normal behaviour) within 5 min were observed at 95–105 mg/L MS‐222. Respiratory frequency increased first and then decreased during MS‐222 exposure and increased after recovery. At 10 min after deep anaesthesia, a lower mucus glucose was only observed at 115 mg/L MS‐222. No change in mucus cortisol and increased lactate were observed in all treatments. Increased mucus protein was observed at 75, 85 and 95 mg/L MS‐222. At 10 min after recovery, increased mucus glucose and decreased mucus protein were observed at 85, 95 and 115 mg/L MS‐222, but increased mucus cortisol only at 115 mg/L and lactate only at 75 and 105 mg/L MS‐222. At 24 hr after recovery, mucus glucose returned to the initial level only at 75, 95 and 105 mg/L MS‐222, while cortisol at 75 and 85 mg/L and protein and lactate at 75 mg/L respectively. Overall, the effective dose of MS‐222 for discus fish has been suggested to be 95–105 mg/L.     

Differential study of the Parabramis pekinensis intestinal microbiota according to different gonad development stages

To investigate the differences in gut bacterial community of Parabramis pekinensis at different growth stages, we collected wild P. pekinensis from the Jingjiang region of the Yangtze River, and detected the intestinal microflora structure using high-throughput sequencing technology. Results show that during stage I the dominant bacteria were Proteobacteria, Actinobacteria, and Firmicutes. During stage II, the proportion of Proteobacteria and Actinobacteria decreased, while the proportion of Firmicutes and Fusobacteria increased, especially Clostridium and Cetobacteria increased significantly. During stage III, Cetobacterium had a dominant position, while the proportion of Firmicutes decreased slightly. In stage IV, the male and female fish showed obvious differences. In the female gut, the proportion of Proteobacteria increased to the first place, while Fusobacteria decreased to the second place. In the male fish, the proportion of Fusobacteria dropped to the fifth, especially that of Cetobacterium decreased significantly, and that of Verrucomicrobia increased. In stage V, the proportion of Fusobacteria increased again to the first place, while Proteobacteria did not decrease significantly in the female gut. The gut bacterial community in males changed into a structure similar to stage I. In stage VI, the gut bacterial community in both females and males changed into a structure similar to stage I. There were significant differences in the intestinal microflora structure of P. pekinensis at different gonad development stages and sexes. To some extent, the changes in intestinal microflora structure reflect the changes in the nutritional requirements of P. pekinensis.

     

The efficacy of Aqui‐S vet. (iso‐eugenol) and metomidate as anaesthetics in European eel (Anguilla anguilla L.), and their effects on animal welfare and primary and secondary stress responses

The effects of 40 mg/L metomidate and 300 mg/L iso‐eugenol (i.e. 600 mg/L Aqui‐S vet.) anaesthesia on the stress response in European silver eel during a process of complete anaesthesia, recovery and long‐term survival were studied. Metomidate is a hypnotic agent with no analgesia, whereas Aqui‐S vet. is a true anaesthetic. There was no difference between fish exposed to Aqui‐S vet. and metomidate, with respect to time to anaesthesia (mean 3.8 and 2.6 min respectively) and recovery (mean 7.6 and 6.5 min respectively). For the metomidate group, the plasma cortisol concentration increased to a peak during the recovery phase, and was significantly higher than for the Aqui‐S vet. group, which showed no such increase. Fish were kept in tanks with seawater for monitoring of long‐term survival (4 months) after anaesthesia treatment, and no mortality was observed in either group. The results indicate that metomidate is a potential stressor to European eels during exposure, and we do not recommend using metomidate in this species. Aqui‐S vet., however, seems promising as a stress‐reducing anaesthetic for European eel, and if used properly could improve animal welfare and survivability during and after common ecology‐related procedures, as capture, tagging and size measuring.