麻疯树叶盘法高效再生的研究

以温室中1年生麻疯树顶端幼嫩叶片为外植体,研究了在MS基本培养基中添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA)和吲哚丁酸(IBA)对不定芽再生的影响,并采用60天暗培养的方法筛选出愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳激素组合为MS+5 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1IBA,该组合的不定芽诱导率高达75.8%。将该组合诱导出的愈伤组织接种至MS+1.5 mg.L-16-BA+0.05 mg.L-1IBA的固体培养基中,研究了赤霉素对不定芽再生的影响,最佳赤霉素浓度为0.05 mg.L-1,麻疯树叶盘再生率达到90.9%,平均不定芽个数达到4.6个。     

毛白杨叶片再生系统的建立

该文选用三倍体毛白杨的叶片作为外植体 ,MS作为基本培养基 ,采用不同组合的BA和NAA作为植物生长调节剂对毛白杨再生系统进行研究 .结果表明 ,在MS培养基中单独添加 1 5mg·L-1BA时 ,不定芽分化率为 90 % ,同时伴随一定程度的玻璃化现象 .单独添加 0 3mg·L-1NAA时 ,不定根产生率最高 (90 % ) ,但无不定芽生成 .采用 1 0mg·L-1BA + 0 3mg·L-1NAA组合搭配时 ,不定芽分化率最高 (95 % ) .在此基础上 ,采用M1(MS + 1 0mg·L-1BA + 0 3mg·L-1NAA)培养基 ,研究了不同着生位置的叶片、同一着生位置叶片的不同切段以及叶片在培养基上的放置方式对毛白杨叶片再生的影响 .结果表明带有叶柄的下切段比其余叶片切段不定芽再生率高 ,幼嫩叶片比老化叶片再生率高 ,叶片近轴端向下接触培养基比远轴端向下接触培养基再生率高 .叶片再生系统的建立为毛白杨的遗传转化奠定了基础     

银腺杨优良无性系HYS-1叶片再生体系的建立

以银腺杨无性系HYS-1组培苗叶片为材料,MS为基本培养基,通过单因素试验及正交试验L16(45),探究不同浓度TDZ、6-BA以及不同生长素种类对银腺杨无性系HYS-1叶片再生体系建立的影响并筛选最佳培养基。结果表明:不定芽主茎高于1cm的芽占总芽数的比率随TDZ浓度的增加而降低。不定芽再生频率随6-BA浓度的增加而降低。在TDZ(0.05~0.10)mg/L+6-BA(0.50~1.50)mg/L的范围内,叶片通过愈伤组织间接诱导大量不定芽,无明显主茎;只有6-BA(0.50~1.50)mg/L时叶片直接诱导不定芽,且主茎明显。叶片基部是最佳不定芽诱导位置;TDZ0.05mg/L+6-BA0.30mg/L+NAA0.05mg/L处理15d后即出现不定芽,且主茎较高,是银腺杨无性系HYS-1叶片诱导不定芽再生的最佳培养基。再生不定芽在1/2MS+0.50mg/LIBA生根培养基上,5d开始生根,生根率95%以上。     

丽格海棠叶片再生体系的建立

以丽格海棠品种巴克斯(Barkos)的叶片为外植体,研究光照强度和时间、植物生长调节剂对不定芽诱导的影响;植物生长调节剂对不定芽增殖的影响;组培苗生根的最佳培养基。结果表明:丽格海棠叶片的最佳不定芽再生培养基为MS+1mg/L TDZ+0.1mg/L 2,4-D或MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L TDZ,给予40d弱光培养可促进不定芽再生,再生率可达88.3%;不定芽最佳增殖培养基为2mg/L 6-BA+0~0.1mg/L NAA,组培苗最佳生根培养基为MS+0.1~0.3mg/L IBA。     

五叶地锦离体培养及植株再生

以五叶地锦(Parthenocissus quinquefolia)子叶柄、下胚轴、叶片为外植体进行离体培养,以1/2 MS、B5和Heller为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA,KT, TDZ)及生长素(NAA)诱导下胚轴直接再生不定芽.实验结果表明,暗处理30 d,靠近下胚轴的子叶柄接种在1/2 MS 0.3 mg·L-16-BA培养基上,其不定芽分化率最高达64.67%;下胚轴接种在1/2 MS 2.0 mg·L-1KT 0.05 mg·L-1NAA和Heller 0.5 mg·L-1BA 0.1 mg·L-1NAA培养基上,其不定芽分化率接近,达到24%左右;无菌苗的叶片接种在B5 0.5 mg·L-1TDZ 0.05 mg·L-1NAA培养基上,其不定芽分化率达17.7%.芽增殖培养基为1/2 MS 0.5 mg·L-16-BA 0.1 mg·L-1NAA增殖系数为3～5, 1/2 MS 0.5 mg·L-1IBA 500 mg·L-1活性炭适于再生幼苗的生根,生根苗经移栽全部成活.     

木棉离体再生体系的建立

为给木棉的快速繁殖和转基因研究奠定基础,以木棉下胚轴为外植体,探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合和AgNO3等因素对木棉不定芽诱导和植株再生的影响,建立了下胚轴高效再生体系。结果表明:MS+6-BA 1.5 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1+KT 0.5 mg.L-1+AgNO31.0 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达72%,平均每外植体分化不定芽数达3.85个。较适生根培养基为MS+NAA0.5 mg.L-1,生根率达到90%。     

京2杨组培条件的优化及再生体系建立

以京2杨为研究对象,确定了影响其组培苗生长的关键因子及组培苗生长的最佳条件,并为其建立了稳定高效的再生体系.试验结果表明:京2杨组织培养的最适基本培养基为MS培养基,继代培养基和不定芽最佳生根培养基均为1/2MS NAA 0.08 mg·L-1 IBA 0.08 mg·L-1;培养基中加入活性碳不利于京2杨生长;光周期对京2杨的生长影响较小,但光照强度和继代培养基pH值对其生长影响显著,最适光照强度为2500 lx,最适pH值为6.5;无菌苗叶片最佳不定芽诱导培养基为MS BA 1.0 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1,叶柄最佳不定芽诱导培养基为MS BA 1.0 mg·L-1 NAAO.2 mg·L-1.     

银中杨茎段离体培养再生植株研究

以银中杨茎段为外植体,建立组织培养系统.试验结果表明,MS为最适基本培养基;各激素对诱导不定芽的作用大小为TDZ＞6-BA＞KT,诱导不定芽的最佳培养基为MS+0.1 mg·L-1TDZ+蔗糖20 g·L-1+琼脂0.7%;诱导不定芽再生的最佳光质为白光或黄光;生根培养基以1/2MS+0.5 mg·L-1IBA+蔗糖2...     

银中杨叶片外植体再生体系的建立

以银中杨叶片为外植体,建立了高效的再生体系。经正交试验筛选出银中杨组织培养的最适基本培养基为MS培养基,最佳不定芽诱导培养基为MS BA1.0mg.L-1 NAA0.05 mg.L-1,最佳暗培养时间为4d,最佳不定芽生根培养基为1/2 MS NAA0.05 mg.L-1 IBA0.01mg.L-1。     

“突尼斯软籽”石榴叶片愈伤组织再生体系的建立

为了石榴遗传转化研究的开展,以"突尼斯软籽"石榴为研究材料,叶片作为外植体,研究了不同灭菌时间和不同生长调节物质对离体叶片愈伤组织再生的影响。结果表明:最适宜的暗培养时间为14 d,最佳愈伤组织分化培养基为MS+BA 1.0 mg.L-1+NAA(0.3～0.5)mg.L-1,最佳不定芽分化培养基为MS+NAA 0.3 mg L-1+TDZ 1.5 mg L-1+KT(1.5～2.0)mg L-1,最佳新梢增高的培养基为MS+NAA 1.0 mg L-1+BA 0.2 mg L-1+KT 1.0 mg L-1,适宜生根的培养基为MS+NAA0.5 mg L-1,生根率达100%。     

悬铃木叶片再生体系的建立

以悬铃木为试验材料 ,系统地研究了激素浓度、叶片生理状态、光照条件等诸多因素对叶片再生的影响 ,建立了悬铃木叶片外植体的不定芽高频再生体系。研究结果表明 ,以顶部充分伸展的 4 0d叶龄的无菌苗叶片为外植体 ,再生效果最好 ,将此类叶片放在含 1 5mg·L- 1 6 -BA ,0 5mg·L- 1 IBA和 0 5mg·L- 1 KT的MS分化培养基上 ,暗培养 7d后转到光下培养 ,15d后便可见到不定芽不经过或经过很少的愈伤组织阶段 ,直接从叶片上分化产生 ,出现的高峰期在接种后的 2 0～ 30d ,芽分化率高达 98%以上。待小芽长至 1～ 2cm ,将其从叶片上切下 ,转到芽伸长培养基 (MS 0 3mg·L- 1 6 -BA 0 0 5mg·L- 1 NAA 30mg·L- 1 Ad)上使小芽长大成苗 ,最后移到生根培养基(1 2MS 0 1mg·L - 1NAA)上 ,最终得到完整的植株。该再生体系可作为基因转化的受体系统。     

柽柳的组织培养研究

以野生耐盐变异柽柳植株的萌动芽为材料,进行了不同植物生长调节剂及浓度对萌动芽生长、生长芽分化、不定芽生根的影响及试管苗的移栽、扦插、移植试验,成功建立了耐盐野生变异柽柳植株的无性系。结果表明:MS+BA 0.1 mg.L-1+GA 0.5 mg.L-1+IAA 0.2 mg.L-1是暗培养条件下培养芽生长的理想培养基;MS+AgNO31.0 mg.L-1+BA 1.0mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1是不定芽分化培养的理想培养基;1/2MS+IAA 0.4 mg.L-1是试管苗生根培养的理想培养基;移植到海边沙滩上的试管苗保持了耐盐变异性状,并且生长旺盛,根系发达。     

丽格海棠外植体组织培养的研究

以丽格海棠的叶片、叶柄和茎段作为外植体进行组织培养,研究适宜丽格海棠组织培养的最佳外植体、不同部位外植体不定芽分生的最佳培养基、继代增殖的培养基和组培苗的生根培养基。结果表明:不同部位外植体不定芽的再生率:叶片>茎段>叶柄,叶片的最佳培养基为:MS+1mg/LTDZ+0.1mg/L2,4-D或MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ,叶柄的最佳培养基为:MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ,茎段的最佳培养基:MS+1mg/LTDZ+0.1mg/L2,4-D或MS+1mg/L6-BA+0.1mg/LTDZ;不定芽继代增殖的最佳培养基为MS+2mg/L6-BA+0~0.1mg/LNAA;组培苗生根的最佳培养基比为MS+0.1~0.3mg/LIBA。     

路易斯安娜鸢尾组培和苗期生长规律初步研究

以路易斯安娜鸢尾顶芽为外植体,利用不同激素配比诱导不定芽,定期测量组培苗株高、蓬径、主茎长和叶片数,观察组培苗的染色体数、叶片结构和开花性状等。结果表明:路易斯安娜鸢尾顶芽诱导率最高的培养基为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1,产生有效生产苗最多的培养基为MS+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.2 mg.L-1,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg.L-1+活性碳0.5 g.L-1。2年生组培苗平均株高达到71.6 cm,平均蓬径达到60.9 cm,叶片维持在6~12片,冬季仍有绿叶。组培苗染色体个数、叶片通气组织、开花性状等均与母株一致,表明路易斯安娜鸢尾组培苗可保持其母株的观赏性状和水生习性,可通过组培快速繁殖大规模生产优质种苗。     

菊花叶片外植体再生体系的研究

以不同品种地被菊的无菌苗叶片为外植体,在附加不同浓度植物生长调节剂NAA和6-BA的MS基本培养基上诱导培养,通过器官直接发生途径获得再生植株。结果表明:不同地被菊品种的叶片外植体再生不定芽的能力差异极大。再生能力强的品种其培养基中生长调节剂配比的浓度也是不同的,‘铺地金’再生的最适宜培养基为MS 6-BA2mg.L-1 NAA1mg.L-1,再生率为96%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA1mg.L-1 NAA0.5mg.L-1,再生率为96%。无菌苗继代培养时间对地被菊叶片外植体的形态发生能力有不同的影响,其中‘铺地金’品种高频再生能力保持的时间很长,适合做基因转化的受体系统。     

华富苹果离体叶片再生的主要影响因素研究

以花药培养选育的富士品种"华富"组培苗的叶片为试材,研究了离体叶片诱导再生不定芽过程中不同激素种类与组合、暗处理时间等因素对不定芽再生率的影响。结果表明:试管苗继代培养3～4代,取顶部嫩叶3～4片,剪除叶片边缘,叶片以近轴面接种到最佳诱导再生培养基MS+TDZ 2.0mg/L+IAA 0.75mg/L+蔗糖30g/L,pH值5.8,黑暗培养10～15d后,转入光照培养条件下,再生率达83.3%～86.7%。再生不定芽分化15～20d后转接到增殖培养基MS+BA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L上,当不定芽长度约2cm时再转接到生根培养基1/2MS+IAA 1.0mg/L+蔗糖2%,15d后,生根率可达95.0%以上。     

巨桉无性系EG5叶片高效再生体系的建立

以巨桉栽培无性系EG5无菌苗的叶片为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究。结果表明:愈伤组织高效诱导和不定芽分化的最适培养基为改良MS+0.12 mg·L-1TDZ+0.25 mg·L-1NAA;硝酸铵对EG5叶片愈伤组织生长及植株分化的影响较大,最适宜质量浓度为0.412 5 g·L-1;最佳伸长培养基配方为改良MS+0.3 mg·L-16BA+0.05 mg·L-1IBA+0.3 mg·L-1IAA;暗培养10 d能促进不定芽分化,延缓愈伤组织老化和褐变速度。生根培养基为改良MS+0.4 mg·L-1NAA时生根率最高,为65.47%,移植成活率为90%以上。     

火焰卫矛组织培养及植株再生研究

以火焰卫矛成熟胚培养长出的子叶为外植体进行组织培养及植株再生研究,建立了火焰卫矛再生体系,成熟胚培养基为WPM+TDZ 0.5 mg.L-1;子叶愈伤组织诱导和不定芽分化培养基为WPM+6-BA 6 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg.L-1+活性碳0.5 g.L-1。     

葡萄不定芽离体诱导再生植株的研究

进行了紫苑、魏可和砧木 99R几个葡萄品种不定芽离体诱导再生植株的研究。实验通过对其叶片、叶柄、茎段外植体的诱导再分化 ,以器官发生途径实现植株再生。结果表明 :不同品种间存在差异 :(1)紫苑不定芽诱导再生效果最好 ,其中用IBA与TDZ组合诱导最好 ,叶柄在MS +IBA0 .2 0mg/L +TDZ0 .75mg/L培养基中再生率高达 4 2 .9% ;用IBA与BA组合效果也较好 ,叶柄和茎段在MS +IBA0 .0 5mg/L +BA2 .0mg/L中再生率达 30 .8%。 (2 )魏可叶柄不定芽诱导再生在MS +IBA0 .2 0mg/L +BA2 .0mg/L培养基再生率 2 0 .0 %。 (3)砧木品种 99R不定芽诱导再生率较低 ,叶片在MS +IBA0 .0 1mg/L +BA1.5mg/L培养基中再生率 2 0 .8%。(4)栽培品种比砧木易于诱导再生不定芽     

枣树叶片愈伤组织培养与再生植株的研究

为探讨枣树组织培养育种及快繁技术,以木枣、骏枣和狗头枣组培苗叶片为外植体,通过诱导愈伤组织形成再分化出不定芽,从而建立高效的再生系统。试验结果表明,不同基因型或同一基因型的不同部位的材料其培养效果间有差异;试管枣苗茎尖倒数1～3片叶是合适的外植体材料;6-BA与2,4-D在枣树叶片愈伤组织诱导中有极显著的交互作用,二者的配比浓度水平影响愈伤组织的诱导增殖和质量;枣树叶片愈伤组织诱导和继代增殖培养适宜的培养基是3/4MS+6-BA0.2 mg.L-1+2,4-D 2.0 mg.L-1+琼脂0.55%+蔗糖3%。6-BAI、BA与TDZ在枣树愈伤组织分化培养中有显著的协同作用,不定芽诱导的适宜培养基是CYI+6-BA 1.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1+TDZ 0.015 mg.L-1。