不同引物鉴定同一杂交水稻种子样品纯度结果的差异及其原因分析（英文）

在对冈优158、Ⅱ优808、五优308及天丰优316的杂交种子样品进行室内纯度鉴定时,发现不同SSR引物鉴定的纯度结果存在明显差异。为了探讨其原因,将这4个组合的种子样品在海南进行田间种植鉴定,并按单株进行了分子与田间表型的对比分析。结果表明,冈优158、Ⅱ优808、五优308和天丰优316分别用引物RM208、RM264、RM242和RM164鉴定种子纯度时,只能鉴定出不育系(母本)杂株,室内分子鉴定纯度的结果均高于相应的田间纯度鉴定结果 ;而引物RM341、RM297、RM21和RM110不仅能鉴定出不育系(母本)杂株,还能鉴定出串粉株,室内分子鉴定纯度与田间鉴定纯度相当。因此,室内纯度鉴定时应采用多对引物进行检测,以增加识别串粉株的几率。     

SSR鉴定水稻两系杂交种纯度的运用与探讨 Ⅵ.不同引物判定同一样品植株纯度的准确性

将同一样品在室内用不同引物对各植株进行检测,并与田间检测结果比对,发现不同方法对杂株的判别能力不同,并分析了导致同一植株出现不同判定结果的原因,为降低分子检测和田间鉴定结果之间的误差提出了相应技术对策。     

杂交玉米品种家佳荣2号种子纯度的InDel分子标记鉴定

为建立一个简捷、经济、准确可靠的室内杂交玉米种子纯度鉴定方法,以玉米杂交种家佳荣2号及其父母本、JR02杂交组合为材料,用InDel(插入-缺失)分子标记技术和田间小区种植鉴定2种方法对家佳荣2号杂交种子进行纯度鉴定。结果显示,InDel分子标记鉴定的纯度为95.6%,田间小区种植鉴定的纯度为97.8%,InDel的结果略低于田间小区种植鉴定的结果。18对InDel引物中能与家佳荣2号双亲基因组稳定结合且具有多态性的引物共有11对,多态性检测率为61%,其中有1对引物带型偏父本,其余10对InDel引物都能与家佳荣2号稳定结合,可用于鉴定家佳荣2号的种子纯度。在10对引物中随机选取2对引物,有1对引物能从家佳荣2号中区分出其相似品种JR02。2种方法鉴定结果高度一致,表明InDel分子标记可作为玉米杂交种室内纯度鉴定的方法。     

SSR鉴定水稻两系杂交种纯度的运用与探讨Ⅳ.不同品种同一引物检测试验

根据引物筛选结果,选出9个均可用SSR引物RM17检测纯度的两系杂交稻品种,通过室内鉴定判断品种间的分子学差异.同时通过田间正季鉴定判断品种间的植物学特征差异,探讨SSR引物的分辨力和可靠性.结果表明,当遗传背景较近的品种相互混杂时,用单对引物不能有效区分.     

甘蓝型CMS杂交油菜品种种子纯度的分子鉴定及其吻合率研究

本研究在大量引物筛选和重复验证的基础上对目前生产上大面积推广的CMS杂交油菜品种秦优7号、秦杂优1号及其对应亲本进行了RAPD标准图谱的构建,并规模化的对该两杂交种的生产商品用种种子纯度进行了检测。对所检样品所代表的种子群体进行了大田吻合率比对研究和群体纯度跟踪,结果显示两品种的室内检测结果和田间表现的单株育性吻合率皆在97%以上,这表明利用该技术进行杂交油菜种子纯度分析方法是可靠的,该方法在连续5年上百份样品、数万单株和20多万公斤的杂交油菜种子纯度分析应用实践中得到检验和证明。     

油菜杂交种合油杂2号纯度鉴定的SSR引物筛选

以陕西渭北旱塬最新审定的双低油菜品种合油杂2号以及亲本为试验材料,用SSR标记技术研究杂种与双亲之间的扩增谱带多态性以甄别真假杂种。结果发现,200对SSR引物先用亲本进行预选,有45对引物可以特异区分两亲本,进一步反复筛选,其中引物CB10524分别在杂交种和其双亲之间存在扩增条带的多态性,表现为杂交种条带均为父母本的互补型,很适合做杂交种纯度鉴定。用该引物对合油杂2号杂交种进行SSR纯度鉴定,所测纯度分别为93%,与田间实测纯度94.27%非常接近,表明开发的SSR标记技术在合油杂2号油菜杂交种子纯度室内快速检测中具有广阔的应用前景。     

SSR分子标记鉴定两系杂交水稻“荃两优2118”的种子纯度

采用SSR分子标记技术鉴定两系杂交水稻"荃两优2118"的种子纯度。从48对SSR引物中筛选到2组引物(RM7120、RM8277)。随机选取"荃两优2118"种子6组,每组样品随机取192棵种子苗种进行纯度检测,结果显示同一样品SSR标记与田间鉴定结果接近,最大、最小差异分别为2.05%和0.23%。因此,SSR标记技术适用于"荃两优2118"的种子纯度鉴定。     

利用SSR技术鉴定玉米杂交种“家佳荣2号”的种子纯度

【目的】玉米杂交种子的纯度直接影响农作物的产量、品质和农户的收成,建立一套简单、快速、准确、可靠的纯度鉴定方法十分必要。【方法】本试验以‘家佳荣2号’玉米杂交种及其父母本为材料,采用幼叶CTAB法和碱煮法提取DNA两种方法,利用SSR标记技术从20对玉米纯度鉴定标准SSR引物中筛选应用于‘家佳荣2号’种子纯度鉴定的引物,同时人为掺入其他品种籽粒以验证特异引物的可靠性。此外,同步采用公认的田间小区种植鉴定法研究‘家佳荣2号’的种子纯度,比较室内和田间种植鉴定的纯度差异。【结果】采用幼叶CTAB法提取得到的DNA比碱煮法效果更好;筛选得到引物phi072k4和bnlg2291k4是‘家佳荣2号’种子纯度鉴定的特异性引物,掺杂验证结果可靠,‘家佳荣2号’室内SSR鉴定纯度为96.4%,田间种植鉴定的纯度为97.5%,2种方法结果高度一致。【结论】幼叶CTAB法提取DNA更适合玉米种子纯度的分子鉴定;SSR方法可用于玉米杂交种纯度的室内快速鉴定。     

基于SSR标记的“一管两步”法检测两系杂交稻种子纯度

利用SSR分子标记技术,对两系杂交稻盐两优888的双亲及F1之间的多态性进行引物筛选及纯度检测技术体系优化研究.结果表明,在已筛选的48对引物中有2对引物(RM208和RM225)表现出稳定的共显性,即杂交种呈现父母本互补的带型,采用“一管两步”简易法提取的DNA完全满足引物RM208纯度检测需要.利用RM208对4个盐两优888样品进行纯度鉴定,SSR标记结果和田间鉴定结果差异不显著,说明筛选的SSR分子标记能够快速、准确地鉴定盐两优888杂交种纯度.     

西瓜杂交组合T-1种子纯度鉴定的SSR标记研究

【目的】研究有效的西瓜杂交组合种子纯度的SSR标记鉴定方法,为室内鉴定的实际应用提供理论依据。【方法】以西瓜杂交组合T-1及其亲本自交系P-1、M-13为材料,在子叶展平期采用CTAB法提取DNA,利用优化的西瓜SSR标记方法进行杂交种子的纯度鉴定,并与田间表型鉴定进行比较。【结果】从36对SSR引物中筛选出3对(MCPI-5、MCPI-16、MCPI-17)稳定性强、可重复性好、在杂交种及其母本之间具有多态性的引物。将这3对引物中的MCPI-5和MCPI-16用于267株T-1杂交种群体纯度鉴定,显示种子纯度为97.75%,与田间种植鉴定结果一致。【结论】3对SSR引物MCPI-5、MCPI-16和MCPI-17可用于西瓜杂交组合T-1种子纯度的室内鉴定。     

两系杂交水稻纯度检测方法探讨

[目的]探索两系杂交水稻种子纯度的最佳检测方法。[方法]以丰两优香一号、丰两优四号和丰两优一号两系杂交水稻种子为材料,分别采用酯酶同工酶法和SSR分子法检测其纯度,并对2种方法的检测结果进行比较。[结果]同工酶测纯结果与SSR测纯结果的相关性较显著（r=0.964）,但同工酶测纯结果总体低于SSR测纯结果;了解种子的大致纯度时可采用同工酶方法测纯,精确掌握种子纯度时可采用SSR分子方法测纯。[结论]SSR测纯结果更接近种子的真实纯度。     

SSR鉴定水稻两系杂交种纯度的运用与探讨Ⅱ.不同苗龄取样方法对室内纯度结果的影响

以水稻(Oryza sativa L.)两优17为试验材料进行标准发芽后,对幼苗进行大苗、小苗分类,并利用SSR引物分别对其进行室内纯度鉴定.鉴定结果表明,苗的大小对鉴定结果的影响较大,小苗与大苗的纯度相差2.8个百分点,超出了允许的误差范围.与大田相比,大苗的纯度更接近于田间秧苗纯度.在田间小苗往往不能成苗,不影响大田纯度,故小苗是造成室内与大田纯度鉴定结果产生差异的重要原因之一.     

泰国茉莉香米纯度的RAPD鉴定

[目的]针对现有的泰国茉莉香米品种纯度检测方法的不足,建立特异、灵敏、准确、具有实用性的泰国茉莉香米品种纯度检测方法。[方法]通过对影响RAPD结果的模板DNA、Mg2＋离子、随机引物、dNTPs和Taq酶的浓度条件进行优化、以及随机引物的筛选,建立了泰国茉莉香米法定品种KDML105和RD15的双引物协同RAPD检测方法。[结果]得到最适宜的RAPD反应体系为：反应体积25μl,模板DNA浓度4-32ng/μl、随机引物浓度200μg/L、Mg2＋浓度2.0mmo1/L、dNTPs浓度200μmol/L和Taq酶1.0U。通过两条DNA分子标记的双隐性特征可以区分茉莉香米和非茉莉香米品种。[结论]该技术可以有效地弥补了感官法和水煮法的不足,具有操作简单、快速灵敏、费用低等优点,适合在日常检验中推广使用。     

利用SSR标记快速检测玉米品种纯度

为了快速检测玉米品种纯度,降低检测成本,提高检测效率及准确性,利用建立的高效、快速、经济的玉米种子纯度SSR标记检测体系,检测组配的5个强优势组合。5个玉米组合材料SSR标记检测纯度最高100%,最低97%,平均98.8%。盐溶蛋白电泳检测纯度最高98.5%,最低96.7%,平均97.7%。二者检测结果进行相关分析,差异不显著。利用SSR标记对品种纯度进行检测,能够迅速、准确地得出结果。     

盐溶蛋白法和SSR标记法检测玉米纯度的比较

利用盐溶蛋白PAGE法和SSR分子标记法对玉米杂交种苏玉20和成单60的指纹图谱进行分析。结果发现,应用盐溶蛋白PAGE法可用于苏玉20纯度鉴定,而在成单60的图谱中未出现明显特征谱带,故不能进行鉴定;SSR分子标记法选用了20对SSR引物,分别在苏玉20及其双亲间得到8对引物显示稳定的多态性,而在成单60及其双亲间得到3对,杂种均表现为父母本互补的带型,可作为纯度鉴定候选引物。综合比较,盐溶蛋白PAGE法简单快速,适合单品种检测,而SSR分子标记法适用范围更广,且准确、高效、经济。     

快速检测甜瓜西州蜜17号种子纯度的SSR标记

[目的]以甜瓜杂交品种西州蜜17号及其母本为材料,运用SSR分子标记技术对杂交种与母本之间的扩增谱带的多态性进行研究,筛选出一种能够快速检测杂种的SSR标记.[方法]在选取的18个SSR标记中,SSR标记CMBR068在母本中扩增出一条谱带,在杂种中扩增出两条大小差异较大的谱带,其中一条谱带的大小与母本扩增的谱带大小一致.[结果]利用2.5;琼脂糖凝胶电泳技术和CMBR068标记对100粒杂交种子的纯度进行检测,种子纯度的鉴定结果为98;.[结论]西州蜜17号甜瓜杂交种子的纯度,可利用SSR标记CMBR068,结合2.5;琼脂糖凝胶电泳技术进行快速检测.     

烟叶中茄尼醇提取工艺优化及其纯度检测

为优化烟叶中茄尼醇的提取工艺,选择提取溶剂、时间、温度和料液比进行单因素试验确定条件范围,再采用正交试验优化提取条件,对提取的茄尼醇结晶进行结构特征比较与纯度检测。结果表明:最佳提取工艺的提取剂为丙酮,浸提时间12h,料液比1∶15,提取温度60℃;最佳条件下茄尼醇的提取率为94.5%;提取的茄尼醇结晶的结构特征与标准品基本相同,其纯度含量为95.6%。     

利用SSR标记鉴定棉花杂交种兴杂2号纯度的研究

杂交棉在制种过程中往往因母本去雄不彻底或漏去雄形成自交铃而导致制种纯度不高,寻找快速准确的纯度检测方法是杂交棉种子生产和经营急需解决的问题。试验以棉花杂交种兴杂2号及其亲本为材料,选用77对异源四倍体棉花SSR引物,采用SSR分子标记技术筛选出双亲间的多态性产物,并对兴杂2号种子的纯度进行了检测。结果表明,CP55、CP128、CP483、CP478等4对引物在兴杂2号双亲间扩增出多态性产物,可以准确地鉴别出兴杂2号及其亲本间的差异,为棉花杂交种兴杂2号的纯度鉴定提供了一个准确、稳定、快捷、实用的检测方法。     

RAPD技术在泰国香米品种纯度检测中的应用

针对现有的泰国香米品种纯度检测方法的不足,建立特异、灵敏、准确、具有实用性的泰国茉莉香米品种纯度检测方法,以促进方法在口岸实验室的推广。通过对影响RAPD结果的模板DNA、Mg2＋、随机引物、dNTP和Taq酶的浓度条件进行优化以及随机引物的筛选,建立了泰国茉莉香米法定品种KDML105和RD15的双引物协同RAPD检测方法。通过2条DNA分子标记的双隐性特征可以区分茉莉香米和非茉莉香米品种。     

利用SSR标记鉴定抗虫三系杂交棉邯杂429的纯度

以三系杂交棉邯杂429及其亲本为试验材料,进行了SSR分子标记。从196对引物中筛选到3对带型稳定、在杂交种中呈现双亲互补型的SSR引物,为该杂交种纯度的快速鉴定奠定了基础。结果表明：利用SSR分子标记技术结合单粒棉种DNA快速提取方法,可以快速、准确地鉴定棉花杂交种的种子纯度。