柞蚕抗菌肽对柑桔黄龙病及溃疡病病原菌的杀菌作用

首次报道柞蚕（Ａｎｔｈｅｒａｅａｐｅｒｎｙｉ）抗菌肽对柑桔黄龙病病原类细菌（ＢａｃｔｅｒｉａｌｌｉｋｅＯｒｇａｎｉｓｍ，ＢＬＯ）及溃疡病黄单胞菌（ＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＰＶｃｉｔｒｉＤｙｅ）的杀菌作用，分别在平板培养基上用孔穴法注入５—１０μｌ免疫血淋巴，则出现明显的抑菌圈。用纯化的抗菌肽１０μｇ／ｍｌ处理ＢＬＯ及Ｘ．ｃｉｔｒｉ２０─６０ｍｉｎ，用电镜及激光共焦扫描显微镜观察到病原菌细胞膜的损坏、内容物泄出乃至死亡的过程，对抗菌肽的杀菌机理进行了讨论。     

抗菌肽生物工程及其应用

柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能。根据其氨基酸序列设计、合成抗菌肽D及CAD基因,转化于作物,包括烟草、辣椒、马铃薯、水稻、桑树及柑桔等,已培育出抗病株系及品种。抗菌肽基因转化于酵母中表达,通过发酵生产重组抗菌肽,代替抗生素用作饲料添加剂饲喂肉鸡、仔猪及对虾,对预防疾病、提高存活率、增加体重及降低料肉比有较好效果,已经在生产中应用。用抗菌肽配制成口腔及阴道消毒洗涤剂,能预防呼吸道疾病及阴道炎症。用抗菌肽制剂与生长因子配制成多种化妆品,已投放市场,取得较好经济效益。     

农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入桑树的研究

人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因通过根癌农杆菌Ｔｉ质粒载体转入桑树叶盘，获得基因转化工程苗。柞蚕抗菌肽对桑树青枯病假单孢菌有明显杀菌作用。人工合成柞蚕抗菌肽基因导入农杆菌感染桑树叶盘并诱导成苗。经卡那霉素筛选，胭脂碱电泳检测及抗菌肽基因探针进行印迹点杂交，确认抗菌肽基因转化桑苗成功，为培育抗青枯病品种打下基础。     

转柞蚕抗菌肽D基因辣椒的目的基因及表达产物检测

应用现代生物技术,从核酸和蛋白质水平对转柞蚕抗菌肽D基因辣椒第4代的目的基因进行了检测。发现所分离的柞蚕抗菌肽D基因与原设计的序列一样;辣椒组织中也含有抑菌物质,经与天然抗菌肽D对比,表明抗菌肽D基因得到了表达。     

蚕抗菌肽的诱导及功能的研究

一、昆虫抗菌肽的诱导 1974年,瑞典Boman等首先发现将大肠杆菌注射于惜古比天蚕蛹,能诱导血淋巴产生具有广谱杀菌作用的抗菌肽。1981年,黄自然等报道注射大肠杆菌于滞育柞蚕蛹,诱导产生溶菌酶及抗菌肽。1982年,屈贤铭等分离了柞蚕抗菌肽的多个成员并分析了抗菌肽B及D的一级结构。同年,祁国荣等首次     

蚕抗菌肽对阴道毛滴虫的杀灭作用

本研究用E.Coli K_(12)D_(31)诱导中国柞蚕(Antherae Pernyi) 3—5天,从血淋巴中分离和纯化出抗菌肽(含36个氨基酸残基),观察抗菌肽对阴道毛滴虫的抑制和杀灭作用。实验分三组:分別为抗菌肽组、未经诱导的柞蚕血淋巴组和灭滴灵组。结果显示:在光学显微镜下,抗菌肽作用2分钟后即可完全抑制滴虫活动,未经诱导的蚕血淋     

澳大利亚：拟利用狗检测柑桔溃疡病

正澳大利亚政府已承诺投入26.5万澳元在北部地区用于训练狗,以检测柑桔溃疡病的发生。澳大利亚北部是柑桔溃疡病等病虫害的高风险通道,威胁着澳大利亚农业生产、农产品出口和环境。一旦被感染,溃疡病可能会使该地区柑桔乃至整个柑桔产业陷入停滞。     

柞蚕抗菌肽D基因在酵母中表达的研究

柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能，人工合成抗菌肽Ｄ基因（１２２ｂｐ）与含α－因子及前导肽序列的穿梭质粒ｐＣＬＷＡ２重组，克隆于酵母ＡＢ１０３。在缺亮氨酸的ＹＥ培养基中筛选Ｌｅｕ＋阳性的转化子。转化子菌株培养扩增后提取重组质粒与抗菌肽基因片段探针作点杂交为阳性，电泳后插入含抗菌肽Ｄ基因１２８ｂｐ的区带。在转基因酵母的发酵液中分离上清液，浓缩，对抗菌肽敏感的指示菌Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２Ｄ３１有明显抑菌效应。证实人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因在酵母中表达。     

抗菌肽D基因转化广东桑的研究(初报)

采用前文[1]报道的广东桑转基因技术方法,由叶盘法将人工合成柞蚕抗菌肽D基因导入广东桑。抗菌肽基因由根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒携带,对桑树叶盘进行感染和转化,并通过施加Km选择压力,经过诱导和分化,得到了Km~R表型的桑树转化苗。通过桑树叶片胭脂碱合成酶活性电泳检测及其DNA与α—~(32)P—dCTP标记的含抗菌肽基因的探针作点杂交,初步判断柞蚕抗菌肽D基因已在转化细胞中整合,为培育桑树抗青枯病品种奠定了基础。     

美国修改柑桔溃疡病检验检疫条例

2007年11月,美国农业部修改了柑桔溃疡病检验检疫条例。新条例取消了先前制定的对需要运到其他州的佛罗里达州(以下简称佛州)柑桔进行采前果园检查,但每个包装房需向农业部报送样品检查,以确保柑桔无溃疡病。凡是有溃疡病症状的柑桔果实均不能运出佛州,但可以送往果汁加工厂或在佛州市场销售。佛州柑桔种植户非常欢迎这一新条     

广西·组织开展秋冬季柑桔黄龙病溃疡病综防技术培训

本刊讯（特约通讯员钱开胜）最近,为推进柑桔黄龙病和溃疡病的综合治理,广西区植保总站结合农业部公益性行业（农业）科研专项《柑桔黄龙病和溃疡病综合防控技术研究与应用》项目,先后在广西岑溪、龙州等地举办柑桔黄龙病、溃疡病综合防控技术培训班。     

柞蚕抗菌肽——杀菌抗病毒新药的试产

柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,又能抑制病毒,对某些肿癌细胞有选择性杀伤作用。华南农业大学蚕桑系的教授及其研究组成员,经多年努力进行了较深入的研究。1995年“柞蚕抗菌肽、溶菌酶的诱导、提取及基因工程研究”获国家教委科技进步二等奖及多项省级奖。“溶菌酶生产方法”获国家发明专利证书并在辽宁省丹东市鸭绿江制药厂进行中试。由于种种     

柞蚕抗菌肽基因工程研发与展望

1.前言昆虫抗菌肽(Cecropin)是瑞典科学家Boman H G等首先发现。从果蝇及惜古比天蚕中分离到具有抗菌作用的多肽。从Cecropia的种名中引申而来。国际上已先后分离到数以百计的抗菌肽。1981,黄自然等从中国柞蚕蛹中分离到抗菌肽。为     

蚕抗菌肽研究与产业化35年的回顾和展望

1981年国内研究者首次从中国柞蚕(Antheraea pernyi)蛹血淋巴中分离出抗菌肽,测定其序列约37个氨基酸残基。之后又设计合成了柞蚕抗菌肽D、AD及CAD,并且在酿酒酵母、毕赤酵母及芽孢杆菌中得到高效表达,通过优化培养基配方及建立先进的发酵工艺流程后生产的蚕抗菌肽产品质量稳定。目前国内已有广东、河南、山东及湖北等省的多家生产蚕抗菌肽的企业,产品已应用于农业、养殖业、医药、食品、化妆品等领域。例如:蚕抗菌肽代替抗生素作为安全、无药物残留、不污染环境的绿色饲料添加剂用于饲养肉鸡、肉猪及对虾等,能有效预防疾病,提高成活率,增加体质量,降低料肉比;将蚕抗菌肽基因转化作物培育抗病品种,其中转入抗菌肽基因的抗青枯病辣椒品种已在广东、广西2个省(区)推广应用。今后需要进一步通过建立先进、高效的蛋白质重组技术和发酵工程技术,完善蚕抗菌肽产业化开发应用过程的相关标准、法规,努力推进蚕抗菌肽这一绿色生物制品发挥其潜在的巨大经济效益。     

巴基斯坦:金诺桔遭受溃疡病重挫

正在巴基斯坦东部城市萨果达,由于柑桔溃疡病等多种原因,柑桔产业发展受阻,获利减少。柑桔种植者呼吁当局研究出预防柑桔溃疡病的永久解决方案,并通过与新的外国市场签订协议来增加出口市场,从而支持巴基斯坦柑桔产业发展。据金诺桔种植者联合会会长哈米德萨利姆称,从种植面积和产量来说,柑桔是世界第二大水果,但对于金诺桔种植户而言,种植金诺桔的收益却逐渐减少。目前,巴基斯坦柑桔产业面临着诸多     

抗菌肽D基因导入柑桔及转基因植株的鉴定

由根癌农杆菌(Agrobaterium tumefaciens)的Ti质粒携带柞蚕抗菌肽D基因(122bp)感染红江橙外植体,经卡那霉素敏感性筛选及报告基因胭脂碱合成酶的电泳检测,获得若干转化苗;再经同位素标记的抗菌肽D基因为探针做点印迹杂交及Southern印迹杂交,均为阳性,证明抗菌肽D基因转化于红江橙幼苗获得成功。     

澳柑桔种植户申请溃疡病损失补偿

据当地媒体报道，由于遭受柑桔溃疡病袭击，澳大利亚昆士兰州中部埃默拉尔德地区的柑桔园遭受了毁灭性打击，该地区的柑桔种植户目前正向联邦政府申请补偿。他们提出的补偿要求为，毁灭的柑桔树每株补偿66欧元，对留下来的柑桔树每株补偿12欧元，年，直至柑桔园重建并恢复正常投产为止。自澳大利亚昆士兰州柑桔产区发生溃疡病以来，大部分柑桔树被销毁，直接经济损失超过6200万欧元。     

广西举办柑桔病害公益性行业专项工作会议

本刊讯(特约通讯员钱开胜)6月8—9日,由广西壮族自治区植保总站举办的柑桔黄龙病和溃疡病公益性行业科研工作会议在南宁召开,广西相关单位的项目参与人员共50多人参加会议。据悉,近几年,广西在柑桔黄龙病和溃疡病防治     

美国国家科学院将帮助解决柑桔病虫害问题

2008年3月底,美国佛罗里达州(以下简称佛州)柑桔部和美国柑桔委员会会同美国国家科学院一起讨论威胁美国柑桔业的柑桔黄龙病和柑桔溃疡病等疾病的解决措施。国家科学院将与现有的柑桔专家一起研究最有效的措施来解决佛州的柑桔病害。