饱和食盐水漂浮鸡球虫卵囊的用量和处理时间研究

饱和食盐水是球虫卵囊分离纯化常用试剂,为降低鸡球虫病活疫苗生产成本,试验比较了不同用量的饱和食盐水对柔嫩艾美耳球虫卵囊的漂浮效果,同时研究了饱和食盐水处理柔嫩艾美耳球虫卵囊对其孢子化的影响。结果表明:饱和食盐水的使用量并非越多越好,4～6倍体积的饱和食盐水可获得最佳漂浮效果,且饱和食盐水处理卵囊的时间不宜超过30 min。     

离体条件下球虫卵囊子孢子囊的释放

利用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)为试验虫株,盖玻片、载玻片为实验材料,用拇指适当施加压力时,在400倍的光学显微镜下,观察了柔嫩艾美耳球虫卵囊破裂和子孢子囊释放的过程,结果发现,卵囊在适当压力的作用下,在卵囊一端发生破裂,随后子孢子囊逐个从破裂口处溢出,溢出后的子孢子囊内含有2个子孢子,说明球虫卵囊虽然对常规的消毒剂抵抗力很强,但是在鸡的消化道内,尤其在肌胃内球虫卵囊很容易破裂而释放子孢子囊。     

亚硝基谷胱甘肽对鸡球虫脱囊的影响

为了解胆酸盐浓度、作用时间两种因素对亚硝基谷胱甘肽——GSNO处理鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊脱囊的影响,试验采用L9(34)正交试验方法,通过镜检子孢子脱囊率来确定鸡球虫卵囊经GSNO处理后体外脱囊的最佳条件。结果表明,在胆酸盐浓度为0.75%,作用时间为2 h时,GSNO处理孢子化卵囊的脱囊率最高。     

对氯间甲酚及复方对氯间甲酚对鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊的抑杀效果

为验证苯酚类消毒剂对鸡球虫卵囊的抑杀作用，采用不同浓度的单体和复方对氯间甲酚消毒剂与未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊共孵育，检测其对卵囊孢子化率的影响；与孢子囊共同孵育，通过子孢子脱囊率评价其对子孢子释放的干扰。孢子化卵囊经过不同浓度消毒剂直接浸泡、粪便干扰下浸泡或喷雾处理后经口接种雏鸡，通过OPG和盲肠病变记分探究消毒剂处理对卵囊的繁殖力和鸡的致病性的影响。结果显示， 2种消毒剂均可使孢子化率和子孢子脱囊率显著下降，且3种浓度的复方对氯间甲酚与3%氨水对照组（PC）的消毒效果无显著差异。直接浸泡处理试验结果显示，2%和3%复方对氯间甲酚 （HTS2和HTS3）具有更为显著的抑杀效果，与PC无显著差异；粪便干扰试验结果显示，粪便作用下这两种消毒剂对球虫卵囊仍有理想的抑杀效果；喷雾处理试验结果显示，3%对氯间甲酚（HT3）对球虫卵囊抑杀效果最好，显著优于PC组（P＜0.05），而2%对氯间甲酚（HT2）、HTS2和HTS3组的抑杀效果与PC组无显著差异。研究结果表明，不同浓度下这2种消毒剂对孢子化和未孢子化的柔嫩艾美耳球虫卵囊都有一定的抑杀作用，综合比较，复方对氯间甲酚消毒剂具有更强的抑杀球虫卵囊效果，具有代替氨水成为鸡球虫消毒剂的潜能。     

堆型艾美耳球虫子孢子纯化

笔者通过比较不同成分脱囊液的子孢子脱囊效果和不同蔗糖密度梯度分离纯化堆型艾美耳球虫子孢子的纯化效果来探索较佳的分离纯化堆型艾美耳球虫子孢子的条件。通过试验证明10%鸡胆汁+0.75%(W/V)胰酶脱囊效果最好。75%(W/V)和20%(W/V)蔗糖密度梯度离心得到的子孢子回收率最高,且纯度最好,染色证明纯化后的堆型艾美耳球虫子孢子仍具有较高的活性。     

安徽部分地区鸡球虫种类及感染情况调查

为了解安徽省部分地区鸡球虫种类及感染情况,采用群体采样法分别从肥西县、长丰县和凤台县采集鸡新鲜粪样,用饱和盐水漂浮法检查。阳性粪样采用饱和盐水漂浮和离心沉淀法进行卵囊分离。显微镜下观察卵囊进行虫种鉴定,并统计各调查点的鸡球虫感染率和感染强度等。结果表明,鸡球虫感染率为93.3%(84/90);共检获7种球虫,即:柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、早熟艾美耳球虫(E.prae-cox)。     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

为探讨兔球虫病的诊断方法,对新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,并对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定。在粪便中检出大量的球虫卵囊,经鉴定,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,最后确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病。     

乌鲁木齐地区鸡球虫种类调查

本文调查是采用饱和盐溶液浮集球虫卵囊的方法,检查了420只鸡粪样品。对未发育的卵囊和混合于2.5％重酪酸钾溶液中在25℃恒温箱中培养形成孢子的卵囊进行了形态学的观察和量度。发现乌鲁木齐地区有7种艾美耳球虫,它们是柔嫩艾美耳球虫(E.tenella),巨型艾美耳球虫(E.maxima),和缓艾美耳球虫(E.mitis),哈氏艾美耳球虫(E.haani),毒害艾美耳球虫(E.necatrix),基前艾美耳球虫(E.praecox)及堆型艾美耳球虫(E.acervulina)。除了堆型艾美耳球虫由于鸡的感染带虫率低,发现的卵囊较少,只作了一般观察外,其他六种都进行了较详细地观察,并分别描述了各种卵囊的形态。     

两种鸡艾美耳球虫冰箱保存后的毒力观察

鸡艾美耳球虫（柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫）卵囊分成两部分处理,一部分常规冰箱保存6个月,到期后增殖1次;另一部分每月繁殖1次,为新鲜对照虫株。之后,进行致病性试验。结果显示：冰箱保存6个月后,虫株毒力明显下降,仅增殖1次不能达到新鲜虫株毒力水平。如果两种球虫卵囊冰箱保存6个月后,用于试验研究前需至少继代繁殖2次。     

鸡球虫种类和感染状况探讨

采集凤台县 4个村 5个鸡场的 12 9个粪样 ,调查鸡球虫种类和感染情况 ,并对其中某一养殖户进行了追踪调查。采用饱和盐水漂浮 ,重铬酸钾培养 ,饱和蔗糖溶液漂浮等方法进行检查 ,共检出 8种艾美耳球虫 ,即 :毒害艾美耳球虫 (Eimeria .necatcix) ,早熟艾美耳球虫 (E .praecox) ,巨型艾美耳球虫 (E .maxima) ,和缓艾美耳球虫 (E .mitis) ,柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella) ,堆型艾美耳球虫 (E .acewulina) ,布氏艾美耳球虫 (E .brunetti) ,变位艾美耳球虫 (E .acervulina) ,其优势虫种主要为毒害艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。调查结果显示 ,每个鸡场的感染率均为 10 0 % ,且多为混合感染 ;土杂鸡的感染强度大于AA肉鸡。     

浅谈鸡球虫病

鸡球虫病是养鸡业中危害较为严重的疾病之一,主要由艾美耳属的多种球虫引起,此病是通过球虫卵囊传播,一般在南方较为多见.但是随着北方集约化养鸡业的发展,鸡球虫病也时有发生,甚至呈爆发型,死亡率较高. 1 病原 病原为艾美耳球虫,我国已报道的有7种,柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫致病力较强,其次还有堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、哈氏艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫和早熟艾美耳球虫.     

新疆北疆部分地区鸡球虫病病原调查及分类鉴定

[目的]调查新疆北疆部分地区鸡球虫病病原分布情况,明确近年来新疆北疆地区鸡球虫病的致病种类情况.[方法]采用定点采样法,从沙湾、石河子、玛纳斯和昌吉等地采集病死禽的肠道直接进行粪便处理和病原学检查,收集新鲜粪样进行鸡球虫卵卵囊分离,进行孢子化卵囊培养和形态学观察,对鸡球虫进行虫种鉴定.[结果]鸡球虫的感染率为100;,共检出6种艾美耳球虫,分别为柔嫩艾美耳球虫(Etenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、哈氏艾美耳球虫(E.hagani)、布氏艾美耳球虫(E.Brunetti).其中柔嫩艾美尔球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫为新疆北疆地区鸡球虫病病原的优势虫种.[结论]研究对新疆部分北疆地区的鸡球虫原分布及其构成进行了初步确定,了解其病原水平,从而为该病防治中抗球虫药物的选择及代化用药方案提供必要数据,今后北疆地区预防和控制该病提供依据.     

兔球虫病的诊断及虫种鉴定

探讨兔球虫病的诊断方法,为兔球虫病的诊断和防治提供理论依据.对河南省新乡市某兔场以消瘦下痢为主要症状的病兔进行临床检查、粪便直接涂片检查、饱和食盐水漂浮检查,以及对粪样中检出的球虫卵囊及其孢子化卵囊进行形态学观察和虫种鉴定.结果发现,粪便中检出大量球虫卵囊,分别为盲肠艾美耳球虫、黄艾美耳球虫、肠艾美耳球虫、梨形艾美耳球虫、大型艾美耳球虫、中型艾美耳球虫和长型艾美耳球虫,因此,确诊该兔场发生的是由多种艾美耳球虫混合感染引起的兔球虫病.     

鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的构建及致病性研究

构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,经口接种 1× 10 5个孢子化卵囊 ,致死率高达 80 %。     

羊场山羊球虫感染情况调查研究

采用饱和盐水漂浮、重铬酸钾培养和饱和蔗糖溶液漂浮等方法,对肥东县某羊场81头山羊粪样进行了球虫虫卵检查。结果表明:山羊球虫感染率为96.30%;共检测到7种艾美耳属球虫,分别是浮氏艾美耳球虫、小型艾美耳球虫、颗粒艾美耳球虫、槌状艾美耳球虫、阿氏艾美耳球虫、雅氏艾美耳球虫和阿撒他艾美耳球虫;羔羊球虫中高度感染率为100%,成年山羊感染率为8.70%,羔羊较成年山羊易感染球虫;公羊中等强度以上感染率为46.67%,母羊为22.73%,二者差异性不显著。     

柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法的改进

本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代裂殖子。结果证明本法分离的子孢子和第二代裂殖子活性好，回收率达87％。     

安徽3株柔嫩艾美耳球虫cox1基因部分序列的比对分析

为研究柔嫩艾美耳球虫不同地理株的线粒体细胞色素c氧化酶第1亚基(cox1)基因与球虫种群之间的遗传关系,以安徽3个地区的3株柔嫩艾美耳球虫为研究对象,通过卵囊的分离与纯化获得纯种虫株,然后应用PCR技术对柔嫩艾美球虫3个地理株的cox1序列进行扩增,并与GenBank上登录的鸡柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、布氏艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫虫株的相应序列进行比对分析。结果显示,每个虫株都成功扩增出800 bp左右的cox1部分有效序列(pcox1),与柔嫩艾美耳球虫pcox1序列种内无差异,pcox1相应序列种间的差异程度为9.9%～14.9%。表明柔嫩艾美耳球虫的cox1序列可作为艾美耳球虫种间遗传变异研究的标记,为进一步研究艾美耳球虫的群体遗传学特性和耐药性奠定了基础。     

一例土鸡球虫病的诊治

正鸡球虫病是养鸡生产中常见且危害较大的主要寄生虫性疾病之一,引起鸡球虫病的病原体较多,包括柔嫩艾美尔球虫、毒害艾美尔球虫、巨型艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、缓艾美尔球虫、哈氏艾美耳球虫、早熟艾美尔球虫、布氏艾美尔球虫、变位艾美耳球虫等[1.2]。鸡球虫多数寄生于鸡的肠道上皮细胞,鸡球虫卵有卵囊,对外界环境和消毒剂具有很强的抵抗力,所有日龄和品种的鸡对球虫都有易感性,以15~50日龄的鸡最易感,临床上以机体消瘦、贫血、下痢和便血为主要表现     

海口市文昌鸡球虫病流行调查

为了解海南省海口市文昌鸡球虫病的流行情况,采用群体采样法分别从该市文昌鸡主要养殖地区采集新鲜鸡粪,检查粪样。对阳性粪样采用饱和盐水漂浮和离心沉淀法进行卵囊分离,以质量分数为2.5%的重铬酸钾培养保存。显微镜下观察卵囊,进行虫种鉴定,并统计各调查点的鸡球虫种类、感染率和感染强度。检查雏鸡(15~42日龄)、中鸡(43~84日龄)和大鸡(85~130日龄)粪样各120份。结果显示,鸡球虫的感染率分别为75.8%、78.3%和26.7%。共检出7种球虫,均属艾美耳属,分别为毒害艾美耳球虫(Eimeria neca-trix)、堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)、柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)、和缓艾美耳球虫(Eimeria mitis)、哈氏艾美耳球虫(Eimeria hagani)和早熟艾美耳球虫(Eimeriapraecox)。结果表明,鸡球虫在海口市文昌鸡主要养殖地区普遍存在,有的调查点感染强度很高,养殖户的科学防治意识不强。     

陕西某羊场莎能奶山羊球虫分离鉴定及感染情况

对陕西省某羊场莎能奶山羊的球虫感染情况进行调查研究，应用球虫卵囊富集技术，结合形态学方法对采自该场2～12月龄的49份（≤2月龄22份；3～5月龄13份；6～12月龄14份）奶山羊新鲜粪便样品进行球虫卵囊分离，显微镜检测和OPG（Oocysts per gram）统计。结果显示，莎能奶山羊球虫总感染率为98.0%（48/49），OPG统计发现，3～5月龄羔羊球虫平均OPG最高，为2 442个/g。最高OPG存在于2月龄羔羊样品中，为15 083个/g，且该羊只出现严重腹泻症状。对富集分离到的球虫卵囊进行孢子化和种类鉴定，共鉴定出7种山羊艾美耳球虫。进一步对随机提取的277个孢子化球虫卵囊进行优势虫种统计分析，其中雅氏艾美耳球虫（Eimeiria ninakohlyakimovae）、阿氏艾美耳球虫（E.arloingi）和柯氏艾美耳球虫（E.christenseni）占比最高，依次为17.3%（48/277）、15.9%（44/277）和15.2%（42/277），是该羊场莎能奶山羊球虫的优势虫种。综上所述，初步明确该羊场莎能奶山羊不仅普遍存在球虫感染，而且存在多种球虫混合感染和致病力较强的优势虫种。