接种疫霉根腐菌对大豆苯丙氨酸解氨酶活性的影响

大豆疫霉根腐病是一种危害严重的疫霉病害,对于抗病性的生理生化机制研究很少。苯丙氨酸解氨酶是联系初级代谢和次级代谢的关键酶,对于植物抗病性具有重要意义。为探讨苯丙氨酸解氨酶活性变化与大豆对疫霉根腐病抗性的关系,对不同抗、感病大豆品种接种疫霉根腐菌1号生理小种前及接种24、48、72、96h后测定叶片中苯丙氨酸解氨酶活性的变化特点进行分析,探讨苯丙氨酸解氨酶在抗大豆疫霉根腐病中所起的作用。结果表明：接种大豆疫霉菌1号生理小种后,抗、感病品种叶肉细胞中苯丙氨酸解氨酶活性都呈现出规律性变化趋势,但在抗、感病大豆品种中峰值变化幅度不同,表明大豆对疫霉根腐病的抗性与苯丙氨酸解氨酶活性有关。     

花生种子苯丙氨酸解氨酶活性与抗黄曲霉侵染的关系

研究了花生种子苯丙氨酸解氨酶 (PAL)活性的变化与抗黄曲霉的关系。结果花生种子接种黄曲霉前苯丙氨酸解氨酶活性与抗性无关。接种黄曲霉后 ,抗病品种与感病品种中苯丙氨酸解氨酶活性的变化不同。抗病品种接种后 1d苯丙氨酸解氨酶被诱导激活 ,PAL活性达到高峰 ,而感病品种反应缓慢 ,需要 4～ 5d酶活性才达到高峰     

利用外源前体饲喂生物合成~(14)C-儿茶素的研究

采用在茶树细胞培养过程中饲喂标记前体的方法,进行了~(14)C标记儿茶素的合成研究。比较了~(14)C-苯丙氨酸和~(14)-乙酸钠两种前体的饲喂效果,分析了饲喂前体被培养细胞吸收与利用的动态,以及外源苯丙氨酸饲喂所带来的细胞产物组成与水平变化,并采用高速逆流色谱和高效液相色谱技术对合成的标记产物进行了分离与分析。     

氟对茶叶品质成分代谢的的影响

通过盆栽试验研究氟了对茶树新梢生长和品质成分含量的影响。适量增加土壤氟水平能提高新梢产量,但在高氟水平下新梢产量明显下降。茶多酚、咖啡碱及儿茶素(EGCG等)的含量随土壤氟水平的增加而逐渐降低,高氟水平下新梢的游离氨基酸含量也显著下降,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、谷氨酸合成酶(GOGAT)的活性也随土壤和茶树氟浓度的增加而下降,说明氟可能抑制茶树儿茶素的合成代谢和氮素代谢。上述结果表明,氟对茶树生长和品质成分的影响与氟水平有关,虽然低浓度氟对茶树生长有一定的促进作用,但高浓度氟抑制茶树生长和茶多酚、氨基酸等品质成分的代谢。     

茶树悬浮细胞培养儿茶素的产生

利用植物细胞培养方法生产有用次生代谢产物,是植物生物工程研究的一个重要方面.茶树是次生代谢产物较为丰富的植物种类,尤其是以儿茶素为主要代表的多酚类物质,在茶树细胞中含量较高,因此,利用细胞培养方法生产儿茶素类物质具有天然的有利条件.茶树组织培养次生代谢产物形成的研究最早见于英国Forrest的报道,其后,原苏联科学家对茶愈伤组织中酚类化合物的形成也作了一系列研究.中国农业科学院茶叶研究所在茶树愈伤组织培养儿茶素的形成方面也进行了一系列的研究,证实茶树培养细胞在一定条件下不仅能够保持其次生代谢产物的合成能力,而且可以通过培养基组分调节等方法大幅度提高其儿茶素含量.本文着重讨论茶树细胞悬浮培养下培养基配方、接种量、碳源和氮源浓度、激素、培养基初始pH值等因素对儿茶素形成的影响.     

甘蓝型黑籽和黄籽油菜种子发育过程中种皮色泽差异研究：Ⅰ．花色素、苯丙氨酸和苯丙氨酸解氨酶的变化及相关性

甘蓝型油菜种皮的花色素，苯丙氨酸解氨酶和苯丙氨酸的动态化研究结果表明，在种子发育过程中，黑籽种皮的花色素含量和苯丙氨酸解氨酶活性高于黄籽，但黄籽种皮的游离苯丙氨酸含量明显高于黑籽，差异达极显著水平。花色素，苯丙氨酸，苯丙氨酸解氨酶三者之间的相关性分析表明，黑籽的花色素含量与苯丙氨酸解氨酶活力呈正相关，与游离苯丙氨酸含量呈负相关，说明油菜黑籽与黄籽种皮的颜色差异与花色素含量有关，花色素可能由游离苯丙氨酸转化而来。     

茶鲜叶苯丙氨酸解氨酶的提取及其活性测定

苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物次生代谢中三个关键酶之一,它催化L-苯丙氨酸形成反-肉桂酸这一不可逆反应,因此它是一种限速酶。该酶在进入芳香族二级代谢的起始酶的生物合成中起着关键的作用。茶树具有很强的生物合成酶类化合物的能力,使幼叶中积累的可溶性多元酚含量高达35％(干重)。由于酶类化合物及其衍生物与茶的品质,即滋味、香气、色泽等关系密切,而且该酶又与茶树品种、生育条件等有关,研究茶叶的PAL就有其重要的意义。     

茶树R2R3-MYB转录因子CsTT2表达分析及功能初步鉴定

儿茶素是茶树中特色的次生代谢产物之一,是影响茶叶的品质与风味的主要组分,具有抗氧化、抗病毒、降脂减肥等药理功效。通过系统发育进化树分析、基因表达模式分析和分子生物学试验对茶树儿茶素生物合成相关调控因子CsTT2的功能进行初步鉴定。结果显示,CsTT2是R2R3-MYB转录因子,与拟南芥中调控次生代谢产物的MYB转录因子同在一个分支。在茶树品种顶芽组织中总儿茶素含量较高,CsTT2和儿茶素生物合成相关基因的表达水平也较高。亚细胞定位、酵母试验和双荧光素酶报告系统试验结果表明,CsTT2定位在细胞核中,其编码的蛋白是具有转录激活能力的调控因子,可以结合儿茶素生物合成关键基因ANR的启动子激活其表达。     

大豆不同品种次生代谢产物及相关酶类含量与抗食心虫的关系

以抗大豆食心虫的6份基因型和3份感虫基因型为材料,分析比较其次生代谢产物及相关酶类的差异。结果表明,抗虫品种籽粒中类黄酮含量、荚皮中多酚氧化酶活性明显高于感虫品种,抗虫和感虫品种间,总酚含量、苯丙氨酸解氨酶活性无明显的趋势。     

茶树单体和聚合态儿茶素生物合成的研究进展

儿茶素类化合物,主要包括单体儿茶素和聚合态儿茶素,是茶树(Camellia sinensis)多酚主要组成部分,是绿茶"茶味"决定性成分.茶树儿茶素类化合物合成与积累具有显著的组织器官特异性,鲜叶中主要积累单体儿茶素,根中以积累聚合态儿茶素为主.类黄酮代谢途径下游的无色花青素还原酶(LAR)和花青素还原酶(ANR)是决...     

转PAL基因水稻抗稻瘟病性和过氧化物酶活性的研究

 用PAL(苯丙氨酸解氨酶）基因正义和反义转化水稻，获得了70株转基因植株。选择正义转化植株(1s)和反义转化植株(4a)进行稻瘟病菌([i]Magnaporthe grisea[/i])接种，针对病原物侵染，1s的PAL活性上升更快，幅度更大。观察水稻叶片超微结构发现，1s的细胞具有更强的抵抗病原菌入侵的能力，其过氧化物酶活性也比对照和4a要高。     

立枯丝核菌毒素对人参PAL活性及细胞膜透性的影响

用不同浓度的立枯丝核菌粗毒素处理一年生人参幼苗,检测24h内人参幼苗叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和细胞膜相对透性变化。结果表明:经立枯丝核菌粗毒素处理后人参细胞中PAL的活性呈现先升高后后降低的变化趋势,而细胞膜相对透性的变化则呈现持续上升的趋势。     

植物生长调节剂提高花烛佛焰苞花青苷含量的效应

以花烛(AnthuriumandraeanumLind.)为实验材料,探讨其佛焰苞花青苷含量下降与环境条件的关系以及植物生长调节剂提高花烛佛焰苞花青苷含量的生理效应。结果表明,光照不足是导致花青苷含量下降的主要因素;用植物生长调节剂赤霉酸(GA3)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、茉莉酸甲酯(JA-Me)处理花烛植株,GA3(1.16mmolL)能有效地提高弱光下花烛花梗的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性与佛焰苞的花青苷含量。讨论了GA3的作用机理。     

霜疫霉侵染对不同荔枝品种果皮苯丙烷类代谢的影响

荔枝霜疫霉病是荔枝生产过程中的主要病害之一,严重影响荔枝品质和产量。本文以霜疫霉病抗病品种‘黑叶’和感病品种‘桂味’成熟果实为材料,研究霜疫霉悬浮孢子接种后果皮中苯丙烷类代谢通路相关酶活性及代谢产物含量的变化,分析苯丙烷代谢通路与荔枝对霜疫霉侵染抗性的关系。研究结果表明：抗、感病品种接种霜疫霉菌后,其苯丙氨酸解氨酶（PAL）和过氧化物酶（POD）活性均有不同程度的提高,且抗性品种‘黑叶’的POD活性高于感病品种‘桂味’。与之相反,‘桂味’的β-葡萄糖苷酶（BGLU）活性高于‘黑叶’。抗性品种‘黑叶’的总酚、类黄酮和花色素苷含量高于感病品种‘桂味’,而‘桂味’的香豆素含量高于‘黑叶’。接种霜疫霉菌后,总酚、类黄酮和花色素苷含量随贮藏时间的延长而逐渐下降,香豆素含量则有一定程度的升高。相关分析表明,上述指标与病情指数显著相关,暗示它们与荔枝对霜疫霉侵染的抗性密切相关。     

SOE法对大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因拼接的应用研究

利用SOE(Splicing by Overlap Extension)法对大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)的两个外显子进行拼接,得到完整的PAL基因,表明这种方法是有效可行的.这种技术是作为对cDNA克隆的初步改进与尝试,节约了成本,有一定的应用价值.     

不同毒性玉米大斑病菌侵染对感病玉米叶片PAL活性的影响

利用从自然界中分离纯化的156株玉米大斑病菌菌株中筛选得到的强毒菌株YC和弱毒菌株01-23T分别接种感病玉米叶片,测定玉米叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的动态变化。结果表明,与不接种对照相比,接种强毒菌株YC 1~2 d时,玉米叶片PAL活性显著降低;接种3~4 d时,PAL活性略有上升但差异不显著;接种5 d时,PAL活性又显著降低。接种弱毒菌株01-23T 1~2 d时,玉米叶片PAL活性略有降低但差异不显著,接种3~5 d时,PAL活性上升但差异仍不显著。PAL是玉米抵抗玉米大斑病的一种重要防御酶,在侵染初期,只有降低玉米叶片的PAL活性玉米大斑病菌才能达到成功定殖的目的,可为明确玉米大斑病菌致病性的生化机制提供一定理论依据。     

大豆抗SMV生化机制的初步研究

以对ＳＭＶ－ａ株系抗性不同的３个大豆品种为材料,分析了感染ＳＭＶ后苯丙氨酸解氨酶,过氧化物酶,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的动态变化。结果表明,抗病品种科丰１号接种ＳＭＶ的早期,ＰＡＬ和ＰＯＤ活性显著升高,ＳＯＤ和ＣＡＴ活性明显下降,相反感病品种１１３８－２和徐豆１号的ＳＯＤ和ＣＡＴ活性明显上升,ＰＯＤ活性的增加幅度则小于抗病品种,而１１３８－２的ＰＡＬ活性则低于相应对照。     

一株抗香蕉枯萎病DSE菌株的筛选鉴定及抗病机理初探

通过平皿和盆栽共生对抗法,筛选到1株对香蕉枯萎病具有防治作用的深色有隔内生真菌L-14,2种方法的防效分别达到72.4%和56.5%,接种该菌株可显著提高香蕉幼苗的鲜重。形态观察和28S r DNA序列比对分析结果表明,该菌株为裂壳菌(Schizothecium sp.)。使用该菌株浸根处理接种香蕉苗后,植株系列抗氧化保护酶如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性均显著高于对照,而菌株L-14与香蕉枯萎病菌混合接种处理样品的PPO和SOD活性显著高于单独接种处理,表明接种该生防菌能增强香蕉的抗氧化防护系统,提高其对香蕉枯萎病的抗性。     

Blackspot bruise dependent changes in enzyme activity and gene expression in Lemhi russet potato

Blackspot bruise-induced changes in enzyme activity and gene expression were examined in the bruise susceptible cultivar Lemhi. The activities of several enzymes involved with the synthesis and metabolism of phenolic intermediates were examined over the time course of blackspot bruise development in tubers. A large, transient increase (200-fold) in phenylalanine ammonia lyase (PAL) activity was observed, while other enzymes examined (chorismate mutase, tyrosine ammonia-lyase, 3-deoxy-D-arabino-heptulosonate 7-phosphate synthase, and polyphenol oxidase) showed either modest or no activation. Maximal PAL activity was observed 48 hours after bruise induction, well after the discoloration reactions were complete. The change in PAL activity was associated with a transient increase in messenger RNA coding for PAL. In addition, messenger RNAs encoding two stress-induced genes, ubiquitin and the 70 kD heat shock protein, were transiendy induced by bruising. Physical impact also induced a marked decrease, followed by recovery, in the messenger RNA level for patatin, a primary storage protein in the tuber. These results suggest that the stress resulting in blackspot bruising elicits a wound response similar to those observed in other injuries to plant tissues.     

玉米对南方锈病抗性的生化基础研究

以4个对南方锈病表现不同抗性水平的玉米自交系为材料,5叶期接种后,测定叶片中苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、超氧化物歧化酶活性以及脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白含量的变化,分析其与抗南方锈病的关系。结果表明,自交系抗性水平与苗期发病率呈负相关;除脯氨酸含量外,其他生化指标均在自交系间、处理间和不同检测时间点间存在显著差异。苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶活性在接菌后明显提高,抗病自交系酶活高峰出现早,酶活性升高幅度大于感病自交系;在抗病自交系中,超氧化歧化酶活性在接种后早期上升快,活性高;在感病自交系中,超氧化歧化酶活性在接种后期表现明显升高。叶片组织中可溶性糖含量与感病程度相关,南方锈病属高糖病害;可溶性蛋白含量下降,抗病自交系中含量降低速度和幅度都大于感病自交系。运用最优曲线回归拟合,接菌后1 d苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶活性变化量、可溶性糖含量变化量等指标与玉米苗期的发病率呈显著或极显著相关。