血凝和血凝抑制试验影响因素分析

血凝和血凝抑制试验是检验新城疫、禽流感等疫病抗体效价的一种常用方法,该方法具有经济、简便、灵敏、快速等优点,已被许多市、县级动物疫病预防控制机构实验室所采用,但该试验影响因素很多,常常导致试验结果不准确。作者从试剂的配制、器材的选择及操作中容易出现的问题等方面进行分析,从而避免或减少不利因素的影响,提高试验的准确性。     

血凝和血凝抑制试验的影响因素分析

血凝和血凝抑制试验在疫病防控中应用非常广泛,但影响试验结果的因素较多。针对试验中缓冲液、红细胞、抗原、样品、温度和时间、试验器材和耗材、结果判定等因素对试验的影响进行了分析。     

对影响禽流感血凝和血抑制试验因素的探讨

血凝和血凝抑制试验是检测禽流感抗体效价的一种常用方法，具有操作简便、快速、准确和灵敏等特点，在基层工作中应用广泛。但影响试验结果准确性的因素很多。本文从血液样品、试验器材、试剂和操作过程方面来进行分析．旨在避免或减少不利因素的影响．提高试验的准确性。     

影响血凝和血凝抑制试验因素的探讨与分析

血凝抑制试验具有所需器材简单、操作方便、试验结果判定快速等优点,但该试验影响因素很多,常造成检测结果出现较大偏差。本文从试验器材、试剂、待检血清、缓冲液、红细胞、微量血凝板、环境温度及其他影响因素进行综合分析,旨在避免或减少不利因素的影响,提高试验的准确性。     

浅谈影响禽流感血凝和血凝抑制试验结果的因素

禽流感血凝和血凝抑制试验是评价禽流感疫苗免疫效果最常用的方法,具有操作简单、结果判定快速且不需要特殊的仪器设备等优点,但该试验在实际操作中受多种因素的影响,笔者结合临床工作经验,初步探讨影响禽流感血凝和血凝抑制试验结果的因素。     

浅析影响血凝和血凝抑制试验的因素

血凝和血凝抑制试验是化验室中进行动物疫病诊断和免疫监测最常用的试验方法之一，如禽流感、口蹄疫等疫病的化验室诊断或免疫监测在基层多使用这种试验方法。今年在我国其它省市发生多起禽流感等重大动物疫病威胁我省我市的情况下，省、市、县等各级畜牧兽医部门都对禽流感进行了大量的化验室监测，运用和准确掌握血凝和血凝抑制试验对禽流感等重大动物疫病的诊断和免疫监测就显得尤为重要。但血凝和血凝抑制试验方法在操作中常有较多的影响因素，容易造成试验结果偏差，甚至误判。现将这种实验方法操作中影响因素浅析如下。     

禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素分析

禽流感严重危害我国的养禽业,疫苗免疫是目前预防和控制禽流感发生的最有效手段,免疫后抗体水平的高低直接关系到实际的免疫效果,因而免疫抗体监测操作技术的准确性、有效性、可靠性对禽流感防控工作起着不可忽视的作用。禽流感免疫抗体水平监测一般采用血凝和血凝抑制试验(HA-HI试验),经济、操作简便和容易量化是该试验方法的优点,但影响试验结果的因素也较多,导致HA-HI试验结果失真,下面将就禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素浅析如下。     

保存红细胞与现配红细胞在血凝与血凝抑制中的对比试验

随着实验室检测血清样本数量的增加,延长红细胞的保存时间已成为当前血凝和血凝抑制试验中困扰已久的问题。该试验以新配制的缓冲液稀释保存长达6个月的鸡红细胞不影响血凝和血凝抑制试验结果,这极大方便了实验室及现场血凝、血凝抑制试验的操作。     

禽流感血凝和血凝抑制试验的影响因素分析

在进行禽流感血凝和血凝抑制试验时,要严格按照操作规程,考虑多方面的因素,尤其要注意各步骤操作的细节,认真细致地进行操作,尽量消除不利影响,减少误差,确保试验结果的准确性.     

浅谈影响血凝和血凝抑制试验结果的因素

血凝和血凝抑制试验是兽医实验室常用的检测方法之一。该方法具有经济、快速、可靠等多种优点，但在实际操作过程中常受多种因素影响，容易造成偏差，甚至误判。本文以禽流感的血凝和血凝抑制试验操作为例，将影响试验结果的几个主要因素进行汇总、分析，以供大家参考。     

影响禽流感血凝和血凝抑制试验的因素及对策

血凝和血凝抑制试验是目前较为广泛使用的监测禽流感抗体水平的一种试验方法.对血凝和血凝抑制试验中的影响因素及对策进行了阐述.     

犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

试验旨在利用胶体金免疫层析技术建立快速检测犬血清中犬细小病毒（canine parvo virus, CPV）血凝抑制（haemagglutination inhibition, HI）抗体效价的方法,用于CPV疫苗免疫效果评价。采用双抗体夹心法,以抗CPV血凝相关抗原的单克隆抗体制备CPV抗原检测试纸条;将犬血清进行不同比例系列稀释后,分别与定量CPV抗原充分反应,滴入CPV胶体金试纸条,根据试纸条检测线（test line,T线）消失时的血清最高稀释倍数判断血清中CPV抗体的HI效价;用此方法检测86份犬血清样品,并与传统血凝抑制试验方法进行分析比较。结果显示,成功制备CPV抗原检测试纸条,确定了试纸条检测犬血清CPV-HI效价的反应条件和结果判定标准。结果表明,在检测不同稀释倍数犬血清反应后的CPV抗原时,能使试纸条T线消失时的血清最高稀释倍数与HI效价具有正相关性,犬血清最高稀释倍数乘以4即为HI效价;两种方法的符合率达90.7%。本试验初步建立了胶体金试纸条检测CPV血凝抑制效价的方法,为检测CPV-HI效价提供了一种操作简单、快速的试验方法,可用于CPV疫苗免疫效果评价。     

Establishment and Application of Colloidal Gold Immune Chromatography Test Method for Detection of Canine Parvovirus Hemagglutination Inhibition Antibody Titer

The study was aimed to use colloidal gold immune chromatography technology to establish a rapid method for detection of canine serum canine parvovirus (CPV) hemagglutination inhibition (HI) titer and CPV vaccine immunization effect assessment.Double antibody sandwich method and monoclonal antibodies of anti-CPV hemagglutination antigen were used to prepare CPV antigen test strip.Canine serum with different proportion respectively was mixed with quantitative CPV antigen for full reaction,then dropped the mixture into the CPV colloidal gold test strip,so according to the highest serum dilution ratios when the test strip line T (line T) vanishes,it was to judge CPV antibodies in serum of the HI titer.This method had been used to detect 86 canine serum samples,at the same time,analyzing and comparing it with traditional hemagglutination inhibition test method.The results showed that the CPV antigen detection test strip was successfully prepared,and the reaction conditions and results of the test strip for detecting the titer of CPV-HI in canine serum were determined.The results indicated that when detecting CPV antigen after the dilution of different ratios of canine serum,the highest serum dilution ratios when the strip line T vanished and the HI titer had positive correlation.The highest dilution ratios of canine serum multiplied by 4 was the HI titer.The results of two methods had 90.7% consistency.This experiment established the colloidal gold immune chromatography test strip for the detection of CPV-HI titers method initially.This CPV-HI detection provided a simple and fast test method for the effect evaluation of CPV vaccine immune.     

醛化人“O”型红细胞的制备及其在兔出血症HA／HI试验中的应用

在兔出血症的检测和免疫监测中,血凝／血凝抑制试验（HA／HI）是常规有效的检测方法。针对人“O”型新鲜红细胞存在质脆易碎、保存期短的缺点,从醛化人的“O”型红细胞制备方法的优化、工作浓度、保存时间三个方面进行研究,并用于兔出血症的HA／HI试验,同时以新鲜的人“O”型红细胞作为对照。结果表明：经戊二醛-甲醛二次醛化的红细胞的醛化效果与只用戊二醛醛化的红细胞效果差异不显著,均优于甲醛醛化效果,且经戊二醛-甲醛二次醛化或戊二醛醛化后的红细胞不溶血,性质不变,易保存;在兔出血症HA/HI试验中,经戊二醛醛化人“O”型红细胞的试验效果与新鲜红细胞差异不大,结果稳定性好。     

新版国家标准《新城疫诊断技术》血凝和血凝抑制试验的理解与操作实践

血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）主要是用于新城疫病原鉴定和抗体效价测定,新版《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2020）对HA和HI试验判定结果进行了修改和细化,使其更加标准和规范。为尽快理解新版标准要求,熟练掌握操作要领,对新、旧版标准中HA和HI试验进行了比较,新版标准增加了对HA和HI试验4HAU抗原配制的标定、静置时间以及结果判定的改变。新版标准在操作步骤上更为精准详细,4HAU抗原配置更加准确,从而使得HI试验结果更加科学。本文结合实际检测,为广大实验室检验人员、大专院校学生及科研人员更好地理解新版标准,更熟练地操作,从而为提高试验结果准确性提供了参考。     

禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原国家参考品的研制

按照国家一级标准物质要求和禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程规定的抗原制备方法,研制了一批禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原国家参考品,用于检测禽流感病毒（H5亚型）制品生物效价和血凝抑制操作过程中的校验。该批抗原经过8家单位对其协作标定后对结果进行统计学分析,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1：80。另对所研制的禽流感抗原均一性、稳定性、无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标进行检测,结果均符合禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制试验抗原制造及检验规程和国家一级标准物质要求。说明该禽流感病毒（H5亚型）血凝抑制抗原可以作为国家参考品。     

被动血凝(PHA)快速检测日本乙型脑炎抗体方法的建立

本文报道了快速检测日本乙型脑炎（乙脑）抗体的被动血凝方法。用PEG提纯乙脑BHK抗原致敏醛化绵羊红细胞可用于人、猪血清中乙脑抗体的检测．该方法具有较高的敏感性和特异性，实验结果表明：该方法与血凝抑制试验具有同等的敏感性，两者符合率为85．12％，与ELISA符合率为91．70％。     

Serotyping of Haemophilus paragallinarum by the Page scheme: comparison of the use of agglutination and hemagglutination-inhibition tests

Seventy-two isolates of Haemophilus paragallinarum were serotyped according to the Page scheme, using a new hemagglutination-inhibition (HI) test. The results were compared with the plate agglutination method conventionally used in the Page scheme. The HI test used washed cells of H. paragallinarum, glutaraldehyde-fixed chicken erythrocytes, and rabbit antisera originally produced for the agglutination method. For 49 of the isolates, there was complete correlation between the results of the HI serotyping test and the previously performed agglutination test--23 were serovar A, two were serovar B, and 24 were serovar C. The other 23 isolates were nontypable by the agglutination test, but 21 of them could be serotyped by the HI method--six as serovar A, two as serovar B, and 13 as serovar C. Nine isolates required treatment of the bacterial cells with hyaluronidase for the expression of hemagglutination (HA) activity. Two isolates did not have HA activity despite hyaluronidase treatment and so could not be serotyped by the HI test.     

稀释液对禽流感HA和HI试验影响的分析

针对稀释液对禽流感血凝及血凝抑制试验的影响进行了试验研究。结果显示,用pH7.0的PBS缓冲液测定抗原的血凝滴度比常用生理盐水和调pH至7.0的生理盐水高出将近一倍,测定的阳性血清的抗体滴度高出一孔。试验表明用PBS为稀释液能够降低试验成本、提高检出率。该研究为标准化禽流感血凝及血凝抑制试验提供了可靠的实验依据。     

The Development and Application of the Latex Agglutination Test to Detect Serum Antibodies against Japanese Encephalitis Virus

The attenuated SA14-14-2 strain of Japanese encephalitis virus (JEV) was cultured in BHK-21 cells. The viral supernatant was purified and concentrated with PEG (MW 20 000). A suitable concentration of JEV antigen was used to sensitize latex to prepare the latex antigen. The specificity, sensitivity and stability of the antigen were assessed. A latex agglutination test (LAT) was developed for rapidly detecting antibody against JEV infection. The LAT and haemagglutination inhibition (HI) assay were compared by simultaneously testing 35 porcine serum samples from five farms. Ninety per cent (20/23) of the samples were seropositive by both assays. No significant difference was found between the two methods (p > 0.05). Furthermore, when 1613 porcine sera from 120 farms were tested by LAT, the number of positive sera was 652, while that of negative sera was 961, ranging from 20% to 50% positive throughout the year. These results indicate that LAT is an appropriate candidate method for epidemiological surveys for and diagnosis of Japanese encephalitis.