花生种子不同部位脂肪氧化酶同工酶的鉴定研究

[目的]为了筛选脂肪氧化酶缺失的花生品种。[方法]根据花生种子脂肪氧化酶同工酶等电点差异,利用等电聚焦电泳技术,对6份花生种子不同部位的脂肪氧化酶进行鉴定分析。[结果]完整的花生种子脂肪氧化酶同工酶有3条带,子叶脂肪氧化酶同工酶有2条带,种胚的脂肪氧化酶同工酶有7条带;花生种胚脂肪氧化酶同工酶的IEF-PAGE图谱有差异,除品种P86呈现6条带以外,其他品种均呈现7条酶带,P86缺失1条带;相同品种花生种子不同部位的脂肪氧化酶的电泳图谱不同。[结论]脂肪氧化酶主要集中在花生的种胚部分。     

多酚氧化酶同工酶组成对茶黄素合成的影响

用垂直板聚丙烯酰胺凝的方法,研究了不同来源(茶叶、苹果、梨、蘑菇和漆酶)的多酚氧化酶同工酶的酶带特征。结果表明,不同来源多酚氧化酶同工酶具有相似的酶带,但对酶带数目、Rf值及分子量均存在种间差异。梨有11条同工酶带,苹果4条,茶叶有2条,蘑菇5条,而漆酶只有1条。PPO同工酶带Rf值集中于0.40～0.70的区间内。茶叶多酚氧化酶同工酶的相对分子量大于9.4×104,而梨、苹果、蘑菇和漆酶多酚氧化酶同工酶的相对分子量介于4.5×104～9.4×104。同时研究了多酚氧化酶活性和同工酶组成对茶黄素合成的影响。梨果实多酚氧化酶同工酶谱带最多,酶活性最大,合成茶黄素的能力最强。合成茶黄素能力大小顺序为:梨PPO,茶叶PPO,苹果PPO,漆酶PPO,蘑菇PPO。     

梨多酚氧化酶同工酶组成及其对茶黄素合成的影响

用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶的方法,研究了不同品种梨(丰水梨、贡梨、雪梨、水晶梨、香梨)果实多酚氧化酶同工酶的酶带特征.结果表明,不同品种梨多酚氧化酶同工酶具有相似的酶带,但酶带数目、Rf值及相对分子质量均存在种间差异.丰水梨有11条同工酶带,贡梨7条,雪梨5条,水晶梨和香梨分别为6条和4条.PPO同工酶带Rf值集中于0.40～0.70,其相对分子质量集中于4.5×104～9.4×104.同时研究了多酚氧化酶活性和同工酶组成对茶黄素合成的影响.丰水梨果实多酚氧化酶同工酶谱带最多,酶活性最大,合成茶黄素的能力最强.多酚氧化酶合成茶黄素能力大小顺序为:丰水梨,贡梨,雪梨,香梨,水晶梨.     

毕节小檗的两种同工酶分析

为探讨毕节小檗(Berberis guizhouensis)2个居群的遗传变异性和相似性,用聚丙酰胺垂直板凝胶电泳技术对毕节小檗2个居群的细胞色素氧化酶(COD)同工酶和过氧化物酶(POD)同工酶进行研究。结果表明,毕节小檗2个居群20株植株POD同工酶酶带数为8条,其中有4条共同酶带(POD-3、POD-5、POD-7、POD-8);COD同工酶酶带数为7条,其中也有4条共同酶带(COD-3、COD-5、COD-6、COD-7)。不同居群的同工酶酶谱存在差异,同一居群的不同同工酶酶谱也存在差异;韭菜坪居群的分化程度大于艾家坪居群。     

草菇菌丝体超氧化物歧化酶

采用 NBT 光化还原抑制技术检测8个草菇菌株的6个不同周(?)期的菌丝体超氧化物歧化酶(SOD)活性水平发现,草菇菌丝体在第2周龄期 SOD 活性最强高的可达光化还原抑制47%。低的为28%。从第3周龄期至第6周龄期 SOD 活性反复波动,(?)均在第2周龄期活力水平之下。菌丝 SOD 活性水平,可反映出草菇菌株子实体产量和生长速度水平。从不同龄期菌丝产量变化表明菌丝生长快、衰老快和自溶快等特性。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,参试的8个菌株6个周龄期的草菇菌丝在凝胶板上 Rf 值0.3附近有一条 SOD 同工酶强带,这条带可能属于 Mn-SOD 类型。从菌丝体 SOD 同工酶谱情况,可判断草菇子实体(?)伞的快慢。     

不同枣树品种的同工酶分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对枣树6个品种的细胞色素氧化酶同工酶、过氧化物酶同工酶的酶谱进行了观察和试验分析,分别计算了细胞色素氧化酶同工酶、过氧化物酶同工酶酶谱中各自酶带的Rf值以及不同品种之间的相似系数,比较了不同品种之间的亲缘关系并首次进行了排序,为枣树的品种鉴定和遗传育种提供了参考。     

草菇多酚氧化酶基因的克隆与表达分析

【目的】解析草菇多酚氧化酶基因家族序列信息,明确其特征和表达模式。【方法】通过转录组测序找出含有酪氨酸酶结构域的基因,并根据搜索得到的序列设计引物,以不同发育时期的草菇 v26 菌株,以及草菇蛋形期外菌膜、菌盖、菌柄等不同组织为材料提取 RNA,经反转录为 cDNA,扩增获得草菇多酚氧化酶基因序列。采用在线生物信息学网站预测草菇多酚氧化酶的理化性质。采用 RT-PCR 的方法,检测草菇不同发育时期和不同组织部位多酚氧化酶的表达模式。【结果】获得 4 个草菇多酚氧化酶基因家族的 CDS 序列,依次命名为 VvPPO1、VvPPO2、VvPPO3、VvPPO4,其中 VvPPO1 CDS 全长 1 596 bp、编码 531 个氨基酸,VvPPO2 CDS 全长 2 685 bp、编码 894 个氨基酸,VvPPO3 CDS 全长 1 593 bp、编码 530 个氨基酸,VvPPO4 CDS 全长2 067 bp、编码 688 个氨基酸。生物信息学分析表明,4 个基因编码的蛋白均含有 2 个铜离子结合区,为亲水性蛋白;RT-PCR 结果显示,4 个基因在草菇发育的菌丝期、原基期、蛋形期、成熟期均有表达,VvPPO1、VvPPO3 和VvPPO4 的表达量在子实体时期高于菌丝期,在蛋形期 VvPPO1 和 VvPPO4 在外菌膜的表达量比在菌柄和菌盖中的表达量高。【结论】在草菇中搜索得到 4 个多酚氧化酶基因,均含有 2 个铜离子结合区,4 个基因在各个发育时期均有表达。     

小麦籽粒发育过程中多酚氧化酶同工酶的变化

选取了19个冬小麦品种,分别在籽粒满仁期、灌浆中期和蜡熟期取样分析多酚氧化酶同工酶谱的变化。试验结果表明,满仁期多酚氧化酶同工酶谱带最多,随后,低分子量区多酚氧化酶同工酶谱带浓度不断下降,至蜡熟期,低分子量区同工酶谱带已很微弱,收获干燥后的籽粒未检测到同工酶谱带。在籽粒同一发育时期,品种间同工酶谱带非常相似。这些变化对研究成熟小麦籽粒中多酚氧化酶活性变异的原因具有重要意义。     

5种杨树种间及品种间同工酶的比较分析

[目的]为正确选择杂交亲本和杂种后代的鉴定提供依据。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对杨属的5种杨树过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶的酶谱进行了比较分析。[结果]黑杨组和青杨组杨树的过氧化物酶同工酶和细胞色素氧化酶同工酶的酶谱带数较多,白杨组较少。形态相似的不同种之间过氧化物酶同工酶酶谱比较接近,相似系数较高。处在同一组的两种杨树之间的细胞色素氧化酶同工酶的相似系数较大,处在不同组之间的相似系数较小。青杨组与黑杨组的关系较近,与白杨组的关系相对较远。[结论]杨属中存在广泛的遗传多样性,利用同工酶分析可以找出品种间的细微差异。     

利用同工酶和RAPD技术分析辣椒杂种优势

采用POD同工酶和RAPD技术对辣椒7个亲本和6个杂交组合进行遗传差异和亲缘关系的研究,结果表明：不同辣椒品系扩增出4～7条POD同工酶带,其中相同酶带在部分材料间表现的强弱有所不同;经聚类分析,可把13个不同辣椒品系分为6个大类。经RAPD扩增,10条引物共扩增出103条带,平均每个引物10．3条;13个不同辣椒品系可分为7个大类,其中有4组与同工酶的分类相同。因此,POD同工酶技术和RAPD技术都可进行辣椒杂种优势的划分且可以互补,但RAPD标记检测的多态性要高于POD同工酶标记。     

甘蔗12个种和品种的6种同工酶比较

用聚丙烯酰胺垂直平板电泳法,在甘蔗个体发育过程中,分离鉴定了十二个供试材料叶片的六种同工酶。结果表明:甘蔗种问和品种间酶谱存在差异,酶谱在个体发育过程中有变化,其程度因酶的种类和供试材料而异。苗期过氧化物酶Ⅱ区的总酶带数与丛茎数呈极显著正相关。与茎径呈显著负相关;分蘖末期该酶Ⅱ区的总酶带数与丛茎数亦呈极显著正相关,与茎径呈负相关,但不显著;其强带数则与两者都呈显著相关。其余五种酶的酶谱未发现与所调查的农艺性状有明显规律的联系。最后讨论了上述结果在甘蔗选育种和栽培中的应用。     

贮藏荔枝果皮多酚氧化酶及过氧化物酶与褐变的研究

以“淮枝”的材料,着重研究了分析了荔枝（ＬｉｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｍ）贮藏过程中果皮多酚氧化酶及过氧化物酶的活性及其同工酶谱的变化,结果发现,荔枝果皮多酚氧化酶（ＰＰ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）均具有游离态和结合态两种形式,它们在果皮褐变过程中活性的变化规律有所差别,随着果皮的褐变,ＰＰＯ和ＰＯＤ均有新的同工酶带出现,新酶带与酶活性的变化和果皮褐变程度有关。     

草菇子实体超氧化物歧化酶的检测

采用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳法测定草菇蛋期至成熟期子实体不同部位超氧化物歧化酶(SOD)。结果表明蛋期子实体有1～2条酶带,伸长期和成熟期有2～4条酶带。菌柄是子实体衰老历程中 SOD 同工酶酶谱变化最敏感的部位。还观察了不同期子实体及其提取液于4℃低温贮藏4天后 SOD 同工酶的变化,并对草菇衰老机制及其与贮藏过程中 SOD 同工酶变化的关系进行了探讨。     

香菇菌株亲缘关系的研究

以12个香菇菌株为材料进行了亲缘关系的研究.结果表明,以菌株的拮抗作用、酯酶同工酶和子实体氨基酸组成等综合鉴定菌株之间的亲缘关系是一种较为可靠的方法.12个菌株有不同的起源,其亲缘关系的远近与地理分布有明显的联系.同一类型菌株之间的差异是对不同生态环境长期适应、人工选择和杂交育种的结果.     

胡杨异形叶CYT和EST同工酶特征的初步研究

以胡杨不同发育阶段植株(五种树冠类型)的不同冠层异形叶为材料,调查同一单株上不同冠层同一节位叶片的叶形指数,测定其细胞色素氧化酶同工酶酶谱(CYT)和酯酶(EST)同工酶酶谱。探讨不同发育阶段胡杨植株叶形的变化和CYT、EST同工酶酶谱间的关系。结果表明:(1)不同发育阶段的胡杨植株都表现出叶形指数随冠层的升高而减小;(2)同一株不同冠层叶片的CYT同工酶酶谱带型基本一致,但各冠层叶片间酶谱带的表达量上存在细小差异。不同发育阶段植株CYT同工酶在质(酶带数目和迁移率)和量(酶的活性)的表达上各不相同,表现为随发育进程的推进,一些条带的表达或不表达;(3)EST同工酶的质(酶带数目和迁移率)和量(酶的活性)的表达在同一株不同冠层及不同发育阶段的胡杨叶片中均有差异。     

栽培大豆、野生大豆和半野生大豆酯酶同工酶的研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分析了栽培大豆、野生大豆和半野生大豆的酯酶同工酶．结果表明，栽培大豆幼苗期的酯酶同工酶共出现了１７条酶带。栽培大豆和野生大豆既有共同的酶带，又有各自独特的酶带，是亲缘关系较近的两个种。半野生大豆有类似野生大豆的酶谱，表现了野生种的特点．不同进化类型的大豆酯酶同工酶有明显不同。随着进化程度增高，酶带数目有增多的趋势．研究表明，大豆幼苗酯酶同工酶酶谱比较稳定，酶带明确，具有较为明显的种的专一性，可以做为大豆分类学和研究大豆进化关系的一个生化指标。     

不同抗白叶枯病型水稻品种过氧化物酶同工酶的变化

本文用电泳法比较了成株抗性、全生育期抗性和感病水稻品种过氧化物酶同工酶模式的差异,以及这些品种在人工剪叶接种条件下酶带的变化。结果表明:对白叶枯病不同反应类型的水稻品种健叶组织内过氧化物酶同工酶酶带存在明显差异。同时,人工剪叶接种能引起叶组织内过氧化化物酶同工酶的变化,但变化的主要原因可能不是白叶枯病病菌的侵染所造成,而是剪叶对叶片的伤害所致。     

沙棘SOD的活性及其同工酶的研究

本文对沙棘浆果中SOD的活性进行了研究，并对浆果和种籽的SOD同工酶进行了比较。经PAGE和NBT活性染色，在浆果的提取液中出现了4条活性谱带，在种籽提取液中出现2条谱带，在浆果提取液中的1条谱带（文中A带）对KCN敏感，其余的塔带和种籽中的话带均对RCN不敏感。