Ri质粒介导TMV和CMV外壳蛋白基因转化甜椒研究

利用发根农杆菌（Ａｇｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）的Ｒｉ质粒介导的二元载体，将ＰＢＴＣ－８质粒上的ＴＭＶ－ｃｐ和ＣＭＶ－ｃｐ基因导入甜椒中，用共培养的方法，诱导愈伤组织，经卡那霉素的抗性筛选，进一步的培养获得再生植株，经ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ的检测呈阳性反应，转化植株田间人工接种为抗性，证明ＴＭＶ－ｃｐ和ＣＭＶ－ｃｐ基因导入甜椒植株并已表达。     

草莓主栽品种再生和转化的研究

 建立草莓主栽品种高效、稳定的离体再生体系和遗传转化体系, 获得了转基因植株。‘弗吉尼亚’和‘森嘎拉’的叶片离体再生芽频率达到100 %。试管苗叶片与农杆菌菌株EHA105 共培养3 d。共培养后的叶片在附加卡那霉素40 mg/L 的再生培养基上选择培养4周后, 外植体再生出转化芽, 弗吉尼亚的转化芽再生频率可达6. 8 %。采用组织化学染色法对随机选取的10 个GUS 基因转化植株进行基因表达测定, 结果5 个植株强烈表达GUS 活性。转bar 基因植株在附加除草剂草丁膦10 mg/L 的培养基上能够正常分化, 在田间对草丁膦表现出强烈抗性。转基因植株开花、结果正常。     

转il-4基因甘蓝后代的遗传及表现分析

利用农杆菌介导法将il-4基因转入甘蓝品种"中甘11",用已转化得到的T3、T4代甘蓝品种为试验材料,通过PCR扩增、PCR-Southern杂交、蛋白质浓度测定和ELISA技术,对il-4基因转化甘蓝的后代进行了检测,并对il-4基因在T3、T4代甘蓝中的传递规律以及后代甘蓝植株的田间表现进行了调查。结果表明:T3、T4代转il-4基因甘蓝阳性植株数较少,甘蓝中il-4基因出现性状分离。同时,田间调查表明,相对于对照组(非转基因)植株,转il-4基因阳性植株的田间抗病性下降,植株高度降低,结实率降低,单株结籽数减少,生长势等农艺性状降低。     

冷诱导转录因子CBF3 转化茄子的初步研究

成功构建了含冷诱导转录因子CBF3（ CRT binding factor）的植物表达载体,通过农杆菌介
导法转入三月茄,采用PCR 检测DNA 和卡那霉素涂抹叶片法进行田间抗性鉴定,证实获得含抗寒基因
CBF3 的茄子转基因植株2 株,建立了抗寒的茄子再生与转化技术体系。     

转CrylC基因结球白菜对鳞翅目昆虫的抗性

用白菜的三个朝鲜栽培品种作试材，经由农杆菌介导，将B.r.杀虫晶体蛋白基因（Cry1C）转入其下胚轴中。以潮霉素为筛选剂，其转化效率为5％m9％。Southern，Northern杂交分析，PCR检测及对其后代的测试都证明外源基因已被导入。许多顶端紧实型的转基因植株在离体条件下能开花，50多株具潮霉素抗性的植株被成功地移栽到地里。转基因植株及其后代对世界范围内十字花科的主要害虫菱纹背蛾（DBM），及银纹夜蛾、菜青虫均具有抗性．并能控制具CrylA抗性的菱纹背蛾的危害。本实验所采用的高效再生转化体系，对以后把农业上其它重要基因转入白菜可能具重要的参考价值？     

朱顶红幼嫩花梗胚性愈伤组织诱导和高效植株再生

为建立高效的朱顶红植株再生和种苗繁育技术体系，以幼嫩花梗为外植体开展胚性愈伤组织诱导和植株再生研究。对2,4-D和噻苯隆（TDZ）浓度、外植体发育时期及大小进行了筛选，结果表明：将切片厚度为1 mm的幼嫩花梗外植体置于添加0.5 mg ? L-1 TDZ 和2.0 mg ? L-1 2,4-D的MS固体培养基上培养8周，胚性愈伤组织诱导率最高，达85.3%。将胚性愈伤组织转移至相同的培养基上，每月继代1次，平均每月增殖10.6倍。在不含任何生长调节剂的MS培养基上，胚性愈伤组织的植株再生率达98.0%，平均每块愈伤组织可再生出12.3个小植株。经过36次（3年）继代培养后，胚性愈伤组织的增殖和植株再生效率没有显著变化。幼苗移栽至温室驯化，成活率达97.5%。再生植株移栽到田间，没有发现明显的表型变异。对随机选择的再生植株和母株进行简单序列重复区间（ISSR）扩增分析，证实再生植株没有发生DNA水平变异。     

转基因马铃薯外源CP基因转录表达与病毒在寄主体内复制关系

以表达马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）外壳蛋白（ＣＰ）基因的转基因条件下马铃植株为供试材料，在接种病毒后续发感染条件下提取转基因植株ＲＮＡ，用克隆的病毒ＣＰ基因ＣＤＮＡ为探针进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析，用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定病毒含量，结果表明，转基因植株体内病毒积累量明显低于未转基因的对照植株，转基因植中外源ＣＰ基因的转录表达水平与病毒在体内的复制呈负相关。     

ipt基因在植物基因工程中的应用

异戊烯基转移酶IPT是细胞分裂素生物合成过程中的限速酶,其编码基因ipt已被克隆并得到广泛应用。简要介绍了在植物遗传转化中控制ipt表达的启动子,综述了ipt在植物基因工程中的应用,并分析了目前ipt基因在植物基因工程应用中存在的一些问题。     

电场诱导原生质体融合获得柑橘属间四倍体体细胞杂种

 采用电融合方法诱导澳洲指橘(Microcitrus papuana Swingle) 悬浮系原生质体与柑(Citrusreticulata Blanco) 叶肉原生质体融合, 得到了再生植株。染色体检查表明再生植株为四倍体( 2n= 4x= 36) , 6 个10-mer 碱基随机引物PCR 扩增结果表明, 尽管再生植株带型表现多样, 但仍然可以证明为体细胞杂种。对再生植株田间生长异常的现象进行了讨论。     

农杆菌介导的CBF基因转化哈密大枣

以哈密大枣无菌苗叶片为试材,以根癌农杆菌LBA4404为媒介将抗寒基因转录因子CBF基因导入哈密大枣,利用PCR、RT-PCR对转化植株进行鉴定,建立了哈密大枣的遗传转化体系。结果表明:在对哈密大枣无菌苗叶片进行遗传转化时,预培养2d,农杆菌菌液OD600为0.5,浸染20min,共培养3d的转化效率为最高。试验共获得7个抗性再生转化系。经PCR鉴定,CBF基因在7个抗性再生转化系中均为阳性;经RT-PCR分析,CBF基因在7个抗性再生转化系中均得到表达。     

绿色荧光蛋白基因转化柑橘胚性愈伤组织与高效再生

采用根癌农杆菌介导法对13份柑橘胚性愈伤组织进行绿色荧光蛋白基因(gfp)的转化,短时间内获得了温州蜜柑、橘橙杂种GWZ等11份柑橘材料的82个转化细胞系,其中佛罗斯特脐橙和日辉橘最易转化,分别获得28个和25个转化细胞系。选取3份材料的不同转化细胞系进行gfp的PCR分析,均获得了预期的gfp片段。研究表明,GFP标记可以在转化早期快速检测并分离转化子,及时剔除逃逸体,获得纯合的转化系;高水平的gfp表达不影响转化细胞增殖、生长和分化。这些带有GFP标记的转化细胞系为柑橘的有关基础研究提供了良好的试材,目前正用于柑橘体细胞杂交和不同倍性愈伤组织的社会化控制现象与机理等研究。     

转反义PHYA基因对番茄红素合成的影响

 通过根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）介导法，以番茄叶片作外植体，将番茄（Solanum Lycopersicum L.）反义光敏色素A（PHYA）基因片段导入番茄。通过PCR扩增、Sourthern blot检测，证明反义光敏色素A的基因片段已整合到番茄基因组.在转基因番茄材料中，PHYA基因表达受到抑制，番茄红素的合成显著减少，果实没有表现出正常的红色果皮；转基因果实成熟过程中乙烯能够正常合成，与对照番茄之间没有显著差异.推测在调控番茄红素合成的模式中，光敏色素可能位于乙烯的下游位点起作用，二者共同调控番茄红素的合成。     

塑料大棚高品质番茄品种筛选

为加强高品质农产品的供给，筛选番茄高品质品种，选择较受欢迎的5个中果型番茄品种和5个樱桃番茄品种进行筛选试验，从番茄果实外观品质、营养品质、植株长势及产量等方面进行分析。结果表明：中果型番茄品种“绝粉702”和樱桃番茄品种“维纳斯”在果实品质、植株长势以及产量等方面表现好于其他品种，其中“绝粉702”可溶性固形物含量为6.4%，667 m2产量为5 368.32 kg；“维纳斯”可溶性固形物含量9.13%，667 m2产量为3 035.36 kg，均可作为无土栽培高品质番茄品种。     

木霉菌REMI转化体诱导番茄植株产生防御酶系的研究

对不同木霉菌REMI转化体诱导番茄产生的PAL、POD、CAT和SOD防御酶系进行了研究.结果表明:Ttrm55处理番茄植株产生的酶活性与其它菌株有所不同, PAL、POD和CAT的变化趋势明显不同于其它菌株;SOD与其它菌株的变化趋势一致,但SOD酶活性高于其它菌株.Ttrm31处理番茄植株产生的各种防御酶系的变化趋势与其它菌株的基本一致,但CAT、PAL活性高于其它菌株;而SOD、POD活性稍低.Ttrm34处理番茄植株产生的防御酶系中POD、PAL活性稍高;而其它酶活性稍低.     

加工番茄粘稠度与其他农艺性状的相关与通径分析

通过对加工番茄28个品种或杂交组合的主要农艺性状相关及通径分析,估测了番茄10个主要性状对粘稠度形成影响的相对重要性。结果表明:番茄果胶含量和干物质含量与粘稠度呈极显著正相关,对粘稠度的直接效应最大,是影响粘稠度的主要因素,在加工番茄高效育种中果胶含量和干物质含量可作为主要选择性状。     

组织培养条件下番茄4 个品种对NaCl 胁迫耐受性的研究

以番茄品种白果强丰、红牛心、小红仙桃、红圣女的下胚轴为外植体,在培养基中分别添加0、50、100、150 mmol·L^-1 和200 mmol·L^-1 NaCl,研究在不同浓度NaCl 胁迫下番茄愈伤组织诱导率与不定芽诱导率的变化,评价4 个品种番茄在组织培养条件下对NaCl 胁迫的耐受性。同时探讨氯气熏蒸法用于番茄种子消毒时,熏蒸时间对番茄种子萌发与生长的影响。结果表明：氯气熏蒸番茄种子7 h 的消毒效果最好。4 个品种番茄的下胚轴组织培养能力和对NaCl 的耐受性均表现不同,白果强丰和红圣女的愈伤组织诱导率和不定芽诱导率较高;当以NaCl 作为抗性筛选剂对转化后代进行筛选时,适宜筛选浓度白果强丰为100 mmol·L ^-1、红圣女为50 mmol·L ^-1。     

元谋干热区反季节番茄引种试验初报

通过对16个番茄品种的对比与筛选试验,对各个品种生育期、植物学性状、产量、抗病性等指标进行综合比较与评价.试验结果表明,16个引进品种中,有3个优秀,5个良好,4个一般,4个差.综合性状优良、市场前景好的3个番茄品种金冠茄、特抗病钢王、朝阳207.可作元谋县反季节外销番茄生产.     

抗癌基因p 53 导入番茄的初步研究

 通过根癌农杆菌( Agrobacterium tumefaciens) 介导, 利用特异表达的phaseolin 基因的启动子与人类野生型抗癌基因p 53 构建嵌合基因, 对􀀂 美味樱桃 番茄进行遗传转化, 获得转化番茄再生植株。通过组织化学法、PCR 扩增及Southern 杂交检测, 证明人类野生型p 53基因已整合到转基因番茄植株的基因组。     

西宁地区番茄品种筛选试验

以"精品大民601"、"烟番5号"、"烟番6号"、"青海大红"4个番茄品种为试材,比较了4个番茄品种的植株性状、果实性状、前期产量、总产量、抗病性等指标,以期筛选出适合西宁地区保护地栽培的番茄品种。结果表明:"精品大民601"番茄因早熟、始花序节位低、品质优良、果色鲜亮、果实硬度高、产量高、抗病性强,综合表现最为优秀,可作为西宁地区保护地番茄推广种植的品种。     

农杆菌介导ODREB2B基因转化马铃薯的研究

以马铃薯品种黄麻子和中薯3号脱毒微型薯为外植体，利用根癌农杆菌介导法，将来源于诸葛菜的抗逆相关转录因子ODREB2B基因导入马铃薯，并对遗传转化的影响因素进行优化。获得抗性植株黄麻子33株、中薯3号27株，经PCR-Southern杂交分析，两品种分别有16株和14株呈阳性，证明ODREB2B基因已整合到马铃薯基因组中。