猪胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备与免疫试验

通过鲎素抗菌肽和超高静水压联合作用,制备出一种胸膜肺炎放线杆菌菌影。利用胸膜肺炎放线杆菌血清5型（CVCC263）制备菌影并检测其灭活率。CVCC263菌影疫苗接种免疫仔猪,二免14d后攻毒,每天测量体温,并观察精神状态,呼吸,食欲等。攻毒第8天对存活猪进行剖杀,测量肺部病变面积,进行病理检测。结果显示,免疫组抗体效价及血清中的IgG、IgM、IgA、IL-2、IL-4含量均较对照组显著增加。免疫组临床症状和肺部病变面积均小于对照组。CVCC263菌影疫苗免疫仔猪抗APP感染的保护效果是明显的,并且APP5型的菌影疫苗可对APP7型感染有交叉保护。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

从山东省泰安市采集的38份具有严重呼吸道症状的病死猪的肺脏、气管和扁桃体进行胸膜肺炎放线杆菌(APP)的分离鉴定,其中14株菌株表现出形态多样性、革兰氏染色阴性等特点,小鼠试验显示有较强的毒力,PCR电泳结果得到了650bp的预期目的片段。系统的生物学鉴定表明,这14株分离菌为胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus Pleuropneaumoniae,APP)。对确诊的14株APP采用凝集试验进行血清型检测。结果从山东省泰安市分离到14株2个血清型的胸膜肺炎放线杆菌,其中,血清7型8株、血清5型6株,血清7型、5型为绝对优势血清型。     

胸膜肺炎放线杆菌真空冷冻干燥保护剂的比较

为研究胸膜肺炎放线杆菌(APP)在真空冻干保存中不同浓度、不同种类保护剂对菌株存活的影响,选用胸膜肺炎放线杆菌血清3型(S3)菌株与100 g/L的脱脂奶粉、200 g/L的脱脂奶粉、100g/L的脱脂奶粉 50 g/L的蔗糖3种保护剂混合后冻干,经过一定的时间后,复苏冻干菌种,观察胸膜肺炎放线杆菌存活率.结果表明,100g/L的脱脂奶粉 50 g/L的蔗糖作为保护剂对APP的保护效果最好,冻存菌株解冻后存活率95%以上,APP形态典型,CAMP特性未发生改变.     

淄博地区猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验

此次分离的细菌为猪胸膜肺炎放线杆菌,有血清5型和血清7型两个血清型,其中血清5型13株(65%)血清7型7株(35%),血清5型为相对优势的血清型;小白鼠致病性实验结果发现,同一血清型的猪胸膜肺炎放线杆菌接种小鼠后的发病情况和剖检变化基本相同。药敏试验表明所分离的胸膜肺炎放线杆菌对头孢三嗪、丁胺卡那霉素、庆大霉素等高度敏感,而对氟哌酸、氨苄青霉素、呋喃妥因有抗性。     

鲁西地区猪胸膜肺炎放线杆菌血清型多重PCR研究

本研究建立了鉴定猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清型的多重PCR方法,并对鲁西地区流行的APP血清型进行了鉴定.根据猪胸膜肺炎放线杆菌的外膜脂蛋白(OmlA)基因设计1对种特异性引物;并且根据血清1型、5型、7型荚膜多(cps)基因设计型特异性引物,建立检测血清1型、5型、7型的PCR方法.运用多重PCR对临床分离鉴定的89株APP进行血清型鉴定,结果表明建立的多重PCR检测方法特异性和敏感性良好,可作为猪传染性胸膜肺炎快速诊断和流行病学调查的重要手段.     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型PCR方法的建立及初步应用

为了建立猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,本研究根据胸膜肺炎放线杆菌从编码荚膜多糖的碱基序列设计1对引物,扩增特异性的720 bp核酸片段。结果表明,以APP为模板,均能扩增出与预期一致的1条720 bp核酸片段,所得PCR产物经测序,与Gen Bank已发表的胸膜肺炎放线杆菌血清型6型的同源性达99%以上。本研究建立了PCR检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清6型分子鉴定方法,该方法的建立为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病的诊断和防治及鉴定提供了基础。     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离与鉴定

从山东省泰安市采集的38份具有严重呼吸道症状的病死猪的肺脏、气管和扁桃体进行胸膜肺炎放线杆菌（APP）的分离鉴定，其中14株菌株表现出形态多样性、革兰氏染色阴性等特点，小鼠试验显示有较强的毒力，PCR电泳结果得到了650bp的预期目的片段。系统的生物学鉴定表明，这14株分离菌为胸膜肺炎放线杆菌（Actinobacillus Pleuropneaumoniae，APP）。对确诊的14株APP采用凝集试验进行血清型检测。结果从山东省泰安市分离到14株2个血清型的胸膜肺炎放线杆菌，其中，血清7型8株、血清5型6株，血清7型、5型为绝对优势血清型。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库的构建及对小鼠的免疫保护作用研究

本研究应用限制性内切酶MboⅠ消化胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组DNA，回收500bp～3000bp的片段，插入到真核表达载体pCDNA3．1（＋）的BamHⅠ酶切位点构建重组质粒，电转化大肠杆菌TG1，获得胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库（大约含有10^6个克隆）。将该文库随机分为10个亚文库（10个Clone pool），分别提取每个亚文库的重组质粒免疫小鼠（n=130只），免疫剂量为100μg，免疫3次后以1型胸膜肺炎放线杆菌进行攻毒，通过相对保护率、肺组织荷菌数、病理组织学3个指标测定其对小鼠的免疫保护作用。试验结果表明，Clone pool3、Clone pool2、Clone pool6和Clone pool7的免疫效果明显优于其他免疫组，尤其是Clone pool3的免疫保护效果最佳。本研究成功构建了7型胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库，从而为筛选和获得新的保护性抗原基因奠定基础。     

胸膜肺炎放线杆菌研究进展

胸膜肺炎放线杆菌 (Actinobacillus pleuropneumoniae,APP,也有简写为 Ap) ,原称胸膜肺炎嗜血杆菌(H aemophiluspleuropneumoniae,Hp) ,属于巴氏杆菌科嗜血杆菌属 ,后又根据其表型 (phenotype)和 DNA杂交水平均与放线杆菌属模式种密切相关 ,归属为巴氏杆菌科放线杆菌属 ,命名为猪胸膜肺炎放线杆菌 [1 ] 。由本菌引起的猪接触传染性胸膜肺炎是猪的呼吸道传染病 ,各种年龄的猪均易感染 ;常与巴氏杆菌等混合感染 [1 ]。病猪发热 (可达 4 2℃ ) ,呼吸困难 ,食欲不振 ;剖检可见纤维素性胸膜肺炎 ,多感染两侧 ,6 5 %的肺叶病变严重 ;发病率 8.…     

猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25—4株感染及免疫攻毒试验

为了评价猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株致病性和其灭活疫苗的免疫原性,本研究采用猪胸膜肺炎放线杆菌7型25-4株感染健康猪,每组感染剂量分别为106CFU、107CFU、108CFU,结果发现106CFU感染剂量就可以复制出典型的猪传染性胸膜肺炎病理变化;以该菌株制备的灭活疫苗免疫健康猪21 d后.用106CFU、107CFU 2个不同感染剂量进行强毒攻击,其对照组均发病,免疫组获得100%保护.