妥曲珠利对柔嫩艾美耳球虫作用峰期的初步研究

E．tenella球虫又称盲肠球虫，主要侵害鸡的盲肠，一般感染15～35日龄的雏鸡。一旦鸡吞食了E．tenella球虫卵囊，由于球虫的高繁殖性能，随之有众多的卵囊排出并污染环境，导致球虫病暴发。E．tenella球虫发育过程包括3个生殖阶段，孢子生殖在外界环境中进行，其它两种生殖阶段在鸡体内完成。随鸡粪便排到外界环境中的球虫卵囊称为未孢子化卵囊，不具有感染力。     

电穿孔转染对柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化率影响的观察

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)是寄生于鸡肠道的7种艾美耳球虫之一,由于其具有繁殖力强、卵囊获取与纯化简单、易于实验室操作,并且可在鸡胚内和细胞内进行发育的特点,常常被选择为艾美耳属球虫生物学研究的模式虫种[1].     

鸡球虫耐药性研究进展

<正>鸡球虫病是由球虫感染引起的消化道疾病,对全世界的养禽业带来巨大经济损失。球虫为顶复门、艾美耳属的细胞内寄生虫,能够感染鸡的球虫有7种,包括堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、布氏艾美耳球虫(E. brunetti)、巨型艾美耳球虫(E. maxima)、和缓艾美耳球虫(E. mitis)、毒害艾美耳球虫(E. necatrix)、早熟艾美耳球虫(E. praecox)和柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)[1]。它     

培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养中发育的影响

探索培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养的影响,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。本实验研究了不同换液时间和不同培养基对E.tenella子孢子在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中发育情况的影响。结果表明:(1)在相同培养基下(MEM199培养基或RPMR1640),与3h换液相比,4h换液更适于E.tenella子孢子的入侵;4h换液后培养至24h(或48h),E.tenella子孢子发育更好。(2)相同培养时间下,与RPMR1640培养基相比MEM199培养基更适于E.tenella子孢子的发育。     

堆型艾美耳球虫与柔嫩艾美耳球虫卵囊最短孢子发育时间的测定

将收集到的新排出的堆型艾美耳球虫(E.acervulina)与柔嫩艾美耳球虫(E．tenella)卵囊于29℃静态系统中孢化。以30min为间隔，对卵囊孢子发育的4个阶段在显微镜下进行观察。以1h为间隔，用发育中的卵囊连续接种无球虫鸡，以确定最短孢子发育时间(MST)。对影响孢子发育的外部因素进行了初步探讨。用堆型艾美耳球虫比较不同卵囊浓度，不同悬液深度在卵囊孢化过程中第20h时子孢子形成的卵囊百分率。E.acervulina与E.tenella的MST分别为11b与18b。卵囊浓度和悬液深度与孢子发育时间呈明显反比关系。     

四种抗球虫药物抗球虫指数的测定

正鸡球虫病是由艾美耳属多种球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种寄生性原虫病,其中柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)是致病性最强、危害最为严重的一种~([1])。目前市场上抗球虫药种类较多,但很多都已产生耐药性,笔者旨在从四种抗球虫药中筛选出抗球虫指数高的抗球虫药,为洛阳地区的球虫病治疗提供参考依据。1材料1.1试验动物1日龄海兰褐蛋公鸡150只,购自洛阳市畜康牧业有限公司。其在普莱柯生物工程股份有限公司动     

不同品种地方鸡感染柔嫩艾美耳球虫后过氧化氢酶活性的比较

球虫对鸡的致病作用受诸多因素的影响,宿主方面的因素是其中之一,包括宿主的品种、年龄、性别等.笔者[1]在柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对4种不同品种地方鸡的致病性试验中,发现鸡对球虫的抵抗力具有一定的差异.     

四种鸡球虫卵囊的分离与鉴定

鸡球虫病对养鸡业的危害极大。病原体为鸡艾美耳属球虫。目前公认的9种,以柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和毒害艾美耳球虫(E. necatrix)致病力最强。巨型艾美耳球虫(E. maxima)和堆型艾美耳     

鸡球虫病四价活疫苗对毒害艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫的免疫效果观察

为评价一种商品化鸡球虫病四价活疫苗[柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫]对E.necatrix和E.tenella的免疫保护效果,本研究基于试验鸡血便记分、存活率、相对增重率、病变值、卵囊值及抗球虫指数(ACI)等指标对其免疫效果进行检测.结果表明,免疫攻虫组抗E.necatrix和E.tenella的ACI分别为157.3和135.6,均低于160,表明该球虫疫苗抗两种球虫的效果均为低效.然而,免疫攻虫组鸡血便数量、血便记分、增重、卵囊产量和病变记分等指标均优于阳性对照组.综合指标显示,该疫苗对E.necatrix和E.tenella具有一定的免疫保护力,但单纯采用疫苗并不能够达到防控鸡球虫病的目的.     

益生菌对柔嫩艾美耳球虫感染鸡保护效果研究

接种柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)孢子化卵囊和益生菌,以血便记分、存活率、体增重和抗球虫指数为指标,探讨益生菌的抗球虫活性。在接种第7天后检测结果显示,益生菌抗球虫指数为137,能降低球虫感染鸡的血便记分,减轻鸡盲肠组织病理学结构的损伤,提高球虫感染鸡体增重和存活率,提示益生菌可以辅助应用于临床球虫病的防治。     

京海黄鸡杂交配套系亲本两种球虫疫苗免疫效果的比较

为评价两种球虫疫苗对京海黄鸡杂交配套系亲本良凤鸡(BB鸡)和岭南黄鸡(FF鸡)的免疫效果,本研究对9日龄实验鸡接种两种疫苗[500个孢子化卵囊(V1组)、正典球虫苗(V2组)],24 d后攻柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)2.5万个/只,攻虫后8 d检测各项评价指标。结果显示:攻虫后临床表现、盲肠病变、相对增重率及抗球虫指数(ACI),BB鸡优于FF鸡,V1组优于V2组;两鸡群血浆中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量V1组均显著高于V2组(p0.05);BB鸡γ干扰素(IFN-γ)含量V1组显著高于V2组(p0.05);FF鸡血浆中β胡萝卜素(β-C)含量V1组显著高于V2组(p0.05)。综合分析表明,BB鸡E.tenella抗性优于FF鸡,500个E.tenella活卵囊免疫效果优于正典球虫疫苗。     

鸡柔嫩艾美耳球虫3-1E真核重组表达质粒的构建及其免疫保护性分析

为构建鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)重组真核表达质粒并检测其免疫保护性,本实验将E.tenella表面抗原基因3-1E(E)与鸡IFN-γ、IL-2基因分别串联在真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核重组表达质粒pcDNA-E-IFNγ、pcDNA-E-IL2,同时构建对照质粒pcDNA-E、pcDNA-IFNγ、pcDNA-IL2.经酶切鉴定得到预期大小目的片段,测序结果与预期序列一致.将构建的重组质粒免疫鸡只,经western blot检测表明该重组质粒在鸡体内可以正常表达;对感染鸡只的免疫保护效果显示,pcDNA-E-IFNγ、pcDNA-E-IL2组抗球虫指数(ACI)分别为181.04、187.30,具有高效的抗球虫效果,为将其进一步研制成为具有实用价值的抗球虫疫苗奠定了基础.     

柔嫩艾美耳球虫细胞培养液对鸡胚盲肠上皮细胞活性的影响

为了探讨鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)分泌物及代谢产物对鸡胚盲肠上皮细胞活性的影响,用E.tenella裂殖生殖期细胞培养液培养鸡胚盲肠上皮细胞24 h,通过MTT法检测细胞活性,HE染色观察细胞形态变化。结果:用含25%的48 h及72 h攻虫培养液的混合培养基可使鸡盲肠上皮细胞的活性显著下降(P0.01)。表明E.tenella裂殖生殖期的分泌物及代谢产物可降低未感染鸡胚盲肠细胞的活性。     

柔嫩艾美尔球虫子孢子的提纯

自 Long,P.M.(1965)首次完成用脱囊的柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)子孢子感染鸡胚成功后,国内外的许多学者相继用他的方法或略加改进,成功地进行了多种鸡艾美尔球虫的鸡胚感染,但用此种方法获得的子孢子悬液中粪渣和杂质较多,虽对鸡胚的感染影响不大,但不适于球虫免疫学、组织培养和生化分析等方面的研究。纯化的、活的具有感染力的球虫子孢子制备物是     

柔嫩艾美耳球虫入侵对MDBK细胞NF-κB表达的影响

鸡艾美耳属球虫中,柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染鸡只发病最为严重。为了研究该虫的入侵机制和致病机理,以MDBK细胞为培养细胞,用含有6%乙醇的DMEM完全培养基对入侵E.tenella的MDBK细胞进行凋亡诱导,应用细胞免疫组化的方法检测NF-κB的表达情况。试验结果显示,E.tenella入侵的MDBK细胞中有NF-κB的表达,而未入侵对照组很少有NF-κB的表达,表明E.tenella的入侵抑制MDBK细胞的凋亡是通过NF-κB细胞信号通路发挥其凋亡调控作用。     

穿心莲片对鸡柔嫩艾美耳球虫感染的防治作用

穿心莲作为清热解毒类中药,具有抑制炎症、抗感染等药理活性,其对鸡球虫感染所致肠道炎症的作用尚不清楚。本文以柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)接种制作雏鸡球虫感染模型,在接种前1d至接种后6d连续口服给予不同剂量的穿心莲片剂(50mg,100mg,200mg)。试验结果表明,200mg组中感染鸡的血便排出推迟了1d,且明显降低了血便记分和粪便卵囊排出量,盲肠病变记分也相应降低。对E.tenella感染引起的增重以及中枢免疫器官(胸腺、法氏囊)指数的下降有回升作用,且表现出一定的剂量效应。不同剂量组的抗球虫指数均低于160。这说明穿心莲片能减轻雏鸡E.tenella的感染程度,但未达到中效抗球虫药的疗效。     

柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡LPO含量和抗自由基酶活性的动力学

通过测定柔嫩艾美耳球虫 (Eimeria tenella)感染鸡的盲肠、肝脏、脾脏和法氏囊组织中脂质过氧化物 (L PO)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GXH- Px)及过氧化氢酶 (CAT)活性 ,研究雏鸡感染球虫后机体内自由基生成和抗自由基反应。结果表明 ,雏鸡感染 E.tenella后 ,盲肠、肝脏和脾脏组织中的 L PO含量在感染后显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1)升高 ,T- SOD、Mn- SOD、Cu、Zn- SOD、GSH- Px和 CAT活性水平不同程度下降。试验结果说明在 E.tenella感染后 ,鸡体内的氧自由基生成反应加剧 ,氧自由基参与了球虫的致病过程。     

中药"球康"对E.tenella感染(鸡)IgA抗体免疫应答的影响

本试验通过检测柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染鸡的血清和盲肠液中免疫球蛋白A(IgA)的含量变化,来分析中药“球康”的抗球虫作用效果。结果表明,中药“球康”能增强柔嫩艾美耳球虫感染鸡的IgA免疫应答反应,但是效果不明显。     

鸡柔嫩艾美耳球虫海南株SO7基因表达产物的免疫保护效果观察

为研究鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)海南株SO7基因原核表达产物对E.tenella攻击的免疫保护效力,分别于8和16日龄采用SO7基因可溶性重组蛋白和包涵体重组蛋白经肌肉注射两次免疫文昌鸡公雏,同时设立攻虫对照组和空白对照组;其中,免疫组和攻虫对照组雏鸡于27日龄接种5×10~4个E.tenella卵囊,观察其诱导产生的保护力。结果显示,与攻虫对照组相比,SO7可溶性蛋白组雏鸡的相对卵囊产量降低了82.9%,攻虫至试验结束的增重增加了76.3%,盲肠病变减少了29.8%;SO7包涵体蛋白组雏鸡的相对卵囊产量降低了60.4%,攻虫至试验结束鸡增重增加了42%,盲肠病变减少了18.7%。结果表明,E.tenella海南株SO7基因在大肠杆菌中的表达产物对鸡柔嫩艾美耳球虫的攻击有一定的免疫保护作用,且SO7可溶性蛋白的抗球虫效力优于包涵体蛋白。     

加福抗鸡柔嫩艾美耳球虫笼饲试验

加福(Cygro)是一种单糖苷聚醚类携带离子型抗生素,其有效成份为马杜拉霉素(Maduramicin)。通过三批共150羽21日龄伊莎公鸡进行的抗鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)笼饲试验,设 Maduramicin5ppm,盐霉素(Salinomycin)60ppm,氯吡多(Clopidol)125ppm,感染不用药和不感染不用药5个组,每组10羽鸡,除不感染不用药组外,各组鸡每羽口服感染 E.tenella 孢子化卵囊8×10~4个。三批试验的抗球虫指数分别为Maduramicin193.51、190.05、199.23,Salino-mycin168.74、168.24、179.43、Clopidol176.84、183.05、171.26。结果证实 Maduram-icin 能有效预防 E.tenella 感染,其效果优于Salinomycin 和 Clopidol。作者认为 Cygro 是一种值得推广使用的抗鸡球虫新药。