N-甲基-D-天门冬氨酸对鼠小脑颗粒细胞存活的影响

目的：研究N-甲基-D-天门冬氯酸(N-methyl-D-aspartate，NMDA)对鼠小脑颗粒细胞(CGC)存活的影响。方法：光镜观察NMDA和酒精对细胞所产生的作用。结果：NMDA在无酒精条件下促进细胞生存，并抑制酒精对细胞所产生的神经毒性作用而减少细胞死亡。结论：NMDA对小脑颗粒细胞具有神经营养和神经保护作用。     

创伤性休克患者血清一氧化氮及血管内皮生长因子含量变化及其相互关系

目的：探讨创伤性休克患者血清一氧化氮(NO)与血管内皮生长因子(VEGF)的含量变化及其相互关系。方法：采用比色法和酶联免疫吸附法(ELISA)同步测定创伤性休克患者43例(创伤性休克组)及正常对照30例(对照组)外周血中NO及VEGF含量。结果：(1)创伤性休克组血清NO及VEGF水平明显高于对照组(P均＜0．01)；(2)NO及VEGF含量随休克程度的加重而逐渐升高，差异均有显著意义(P均＜0．01)，且因创伤性休克死亡者的NO及VEGF浓度明显高于存活者(P均＜0．01)；(3)创伤性休克患者血清NO含量与VEGF含量呈显著正相关(r＝0．785，P＜0．01)。结论：NO和VEGF均参与了创伤性休克的发生发展病理过程，并与休克程度相关。检测NO及VEGF对判断创伤性休克的严重程度与估计其预后有一定的参考价值。     

L-NAME在大鼠失血性低血压期间对多巴胺与去甲肾上腺素升压效应的影响

目的：观察大鼠失血性低血压期间，一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶减少对多巴胺（DA）与去甲肾上腺素（NE）升压效应的影响。方法；戊巴比妥钠麻醉的SD大鼠24只，随机分为DA实验组与对照组各5只，NE实验组与对照组各7只。实验组失血前静脉注射NG－nitro－L－argininemethylester（L－NAME，1mg／kg体重），回输血液后静脉注射L－arginine（L－Arg，100mg／kg体重），对照组不作任何处理。股动脉抽血使平均动脉压（MAP）降至5．0kPa左右，维持120min，于低血压期间，每隔30min，及回输血液后10min，静脉注射L－Arg后10min等时间点，静脉注射DA（20μg／kg体重）或NE（10μg／kg体重）。结果：经L－NAME处理的大鼠，存活时间延长，回输血液后，BP基本恢复至失血前水平，无论在低血压期间或血液回输后，对DA、NE的升压反应均增强，实验组MAP回升值明显高于对照组（P＜0．05），L－Arg可抑制此作用。心率（HR）反应在L－NAME处理鼠与对照鼠之间无差异。结论。在重度失血性低血压期间，L－NAME可以增强血管对DA、NE等缩血管药物的敏感性，在动物的存活和血管张力的调节方面起有益作用。     

海藻多糖对小鼠骨髓放射性急性损伤的保护作用

目的：观察中药海藻多糖对小鼠骨髓放射性急性损伤的保护作用。方法：检测小鼠骨髓有核细胞总数、DNA含量及嗜多色性红细胞微核率。结果：小鼠接受2Gy γ射线照射后，小鼠骨髓有核细胞总数、DNA含量明显降低(P＜0．01)，骨髓嗜多色性红细胞微核率明显升高(P＜0．01)；20、40mg/kg剂量的海藻多糖能有效防止照射小鼠骨髓有核细胞总数、DNA含量降低(P＜0．05)；10、20、40mg/kg剂量的海藻多糖能防止照射小鼠骨髓嗜多色性红细胞微核率升高(P＜0．05)。结论：中药海藻多糖预防性给药对小鼠骨髓放射性急性损伤有一定的保护作用。     

血清、脂质体及转染时间对反义PKCα转染CNE-2Z的影响

目的：探讨血清、脂质体及转染时间对反义PKCα转染CNE—2Z的影响。方法：脂质体转染反义PKCα，MTT法测细胞生长。结果：(1)l6．0mg/L的反义PKCα可明显抑制细胞生长(P＜0．01)，但5％(体积分数)的小牛血清培养液对转染所致细胞生长抑制无明显影响(P＞0．05)。(2)1．0mg/L与0．5mg/L的脂质体转染效果差异无显著性(P＞0．05)。(3)转染反义PKCα l9h后，细胞生长指数有非常显著降低(P＜0．01)。结论：用1．0mg/L的脂质体、5％的小牛血清培养液转染16．0mg／L的反义PKCα 19h可有效地抑制CNE—2Z的生长。     

妊娠滋养细胞疾病患者肿瘤组织中微量元素的含量变化

目的：探讨微量元素与妊娠滋养细胞疾病(GTD)的关系。方法；用原子吸收分光光度计测定50例妊娠滋养细胞疾病患者组织Zn、Cu、Fe、Mg含量，20例健康早孕妇女作为对照组。结果：与对照组比较，GTD患者组织Cu含量升高(P＜0．05)，而Zn、Mg含量降低(P＜0．01)，Zn／Cu、Mg／Cu比值降低(P＜0．01)，妊娠滋养细胞肿瘤(GTT)患者组织Zn、Mg含量低于葡萄胎患者组织Zn、Mg含量(P＜0．01)。绒毛膜癌患者组织Cu含量高于葡萄胎及侵蚀性葡萄胎患者组织Cu含量(P＜0．01)。结论：微量元素含量的变化与妊娠滋养细胞疾病的发生、发展有关。     

自控镇痛对剖官产妇泌乳功能及镇痛效果的影响

目的：观察硬膜外麻醉剖宫产产妇术后的自控镇痛泵对产妇泌乳功能及镇痛效果的影响。方法：剖宫产妇262例随机分为研究组(硬膜外麻醉留置自控镇痛泵)及对照组(肌注盐酸哌替啶)．研究自控镇痛对术后产妇泌乳功能及镇痛效果的影响。结果：研究组24h内哺乳次数明显多于对照组(P＜0．01)；术后镇痛效果两组差异有显著性(P＜0．05--0．01)。结论：剖宫产术片应用自控镇痛泵能促进乳汁分泌、产生良好的镇痛作用。     

中晚期肺癌患者T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能检测及临床意义

目的：分析35例中晚期肺癌患者T淋巴细胞亚群和红细胞免疫功能的变化及探讨其与病情的关系。方法：对35例肺癌患者及37名正常人同时采用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群和采用受体粘附法检测红细胞免疫功能。结果：本组中晚期肺癌患者总T细胞(CD3^ )、辅助／诱导T淋巴细胞(CD4^ )和肿瘤红细胞花环(DTER)、红细胞C3b受体花环(RBC—C3bRR)显著低于正常对照组(P＜0．05，P＜0．01)，红细胞免疫复合物花环(RBC—ICR)显著高于正常对照组(P＜0.01)。结论：中晚期肺癌患者T淋巴细胞亚群及红细胞免疫功能低下，因此临床上对肺癌患者作上述两种免疫功能的观察对肿瘤的治疗和预后有一定的监测作用。     

粗酶制剂对鹅胰液和十二指肠食糜酶活性的影响

8只装有胰腺－十二指肠长久性瘘管的成年鹅，饲以大麦（占45％）基础日粮。圈养，20：00－8：00禁食，随意饮水。实验采用前后自身对照，试验期在日粮中添加0．1％的粗酶制剂，并收集胰液及十二指肠食糜。试验期与对照期相比较：①胰液分泌速率降低了17．67％（P＞0．05），其中白天降低43．28％（P＜0．05），夜间增高了30．88％（P＜0．05）；②胰蛋白酶活性升高了77．32％（P＜0．01），胰淀粉酶的活性下降了34．07％（P＜0．01），而胰脂肪酶的活性变化不大；③胰蛋白酶的总活性提高了48．37％（P＜0．01），胰脂肪酶和胰淀粉酶的总活性分别降低了21．58％（P＜0．05）和46．24％（P＜0．04）；④十二指肠食糜中蛋白酶和脂肪酶活性分别增加了38．91％（P＜0．01）和45．83％（P＜0．01），淀粉酶活性则有增加的趋势。以上结果提示，体液性调节对鹅胰液分泌具有重要的作用；外源酶与内源酶相互作用，共同影响十二指肠食糜的酶活性，协调化学性消化机能，以利于提高机体对饲料转化效率。     

上腹部手术患者手术和麻醉对中性粒细胞凋亡及bc1-2基因表达的影响

目的：研究手术与麻醉对上腹部手术患者的中性粒细胞(PMN)凋亡及Bcl—2基因表达的影响。方法：分离围术期上腹部手术患者外周血中性粒细胞，采用流式细胞仪分析培养24h中性粒细胞凋亡及bcl-2基因表达的情况。结果：与健康人相比，手术患者术前中性粒细胞调亡被明显抑制(P＜0．01)，bcl—2基因表达明显上调(P＜0．01)。而与手术患者自身术前相比，硬外麻醉后中性检细胞凋亡抑制及bcl-2表达上调变化不明显，但手术切皮后3h、术后24h、72h变化有显著的差异(P＜0．01)，且以术后24h达峰值。结论：外科创伤可导致明显的PMN凋亡抑制，而bcl—2基因表达上调可能是创伤后PMN凋亡抑制的分子机制之一，硬膜外麻醉对PMN凋亡及bcl—2基因表达影响不大。     

Opiate analgesia: evidence for mediation by a subpopulation of opiate receptors

Naloxazone, a hydrazone derivative of the opiate antagonist naloxone, has a high affinity for opiate receptor binding sites. Naloxazone injections reduce opiate receptor binding to extensively washed mouse brain membranes for more than 24 hours, suggesting that the effect is irreversible. High-affinity binding sites are abolished by this treatment, whereas low-affinity sites are unaffected. Naloxazone treatment blocks the analgesic effects of morphine for at least 24 hours but does not prevent death from high doses of morphine. Thus analgesic but nonlethal opiate effects may be mediated by the high-affinity subpopulation of opiate receptors.     

六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用

前期研究发现六月雪[Serissa serissoides(DC.)Druce]对乙醇诱导的大鼠胃黏膜损伤有良好的保护作用,因此进一步在细胞水平上探讨六月雪水提取物对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞的保护作用。采用体外细胞培养人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞,将GES-1细胞用0~10%的乙醇孵育4~6 h,建立胃黏膜损伤模型。将参试GES-1细胞分为正常组、模型组、荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物剂量组,正常组不做任何处理培养24 h,其他组加入一定浓度的乙醇处理一段时间后,加入含荆花胃康胶丸、六月雪水提取物各浓度剂量的培养基,正常组、模型组不加入药物,继续培养24 h,利用MTT检测各组GES-1细胞的活性。将MTT筛选后效果最佳的六月雪3个浓度以及荆花胃康胶丸组1个浓度分别定为高、中、低剂量组和阳性药物组,运用吖啶橙荧光染色法检测各组细胞凋亡情况,采用Western-Blot法检测各试验组碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)蛋白的表达情况。结果表明,5%的乙醇孵育GES-1细胞4 h是造成胃黏膜损伤的最佳细胞模型,对GES-1细胞的抑制率达到40%。六月雪水提取物组中,60、70、80μg/m L 3个浓度效果最佳,与该组其他浓度比较差异显著(P0.05);荆花胃康胶丸组中,在浓度为160μg/m L时细胞增殖最明显;均高于其他浓度的荆花胃康胶丸组;吖啶橙染色后显微镜下观察正常GES-1细胞形态均一、生长良好,而模型组大量细胞明显出现衰老或凋亡,荆花胃康胶丸组、六月雪水提取物组GES-1细胞生长情况明显好于模型组;模型组b FGF的蛋白表达水平明显高于正常组,差异显著(P0.05);与模型组比较,六月雪水提取物组的b FGF蛋白表达水平明显增加,差异极显著(P0.01);六月雪水提取物组与荆花胃康胶丸组比较,b FGF的表达水平差异也达极显著水平(P0.01)。说明六月雪水提取物可以保护乙醇损伤的人胃黏膜上皮系GES-1细胞,可以增加b FGF的蛋白表达水平,提高溃疡愈合速度。     

小鼠胚胎中脑神经干细胞分离、培养及分化

目的:探讨小鼠胚胎中脑分离神经干细胞的体外培养方法,以获取高纯度的神经干细胞,为神经干细胞的深入研究提供试验材料。方法:无菌条件下分离孕12~13 d小鼠胚胎中脑曲,制成单细胞悬液,碱性成纤维生长因子(bFGF)和B27存在的培养基中培养扩增,通过免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞及子代细胞的分化方向,流式细胞术检测TH阳性神经元比例。结果:培养的部分细胞体外分裂增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并向神经细胞和胶质细胞分化并经流式细胞仪检测自然分化为多巴胺能神经元的比例为3.25%。结论:小鼠胚脑中脑存在具有多分化潜能的神经干细胞,它们能在体外稳定培养、传代和分化。     

程序化冷冻对小鼠胚胎发育的影响

取小鼠原核(220枚)、2～4细胞胚胎(227枚)、桑椹胚(127枚),将其分为3组,每一时期胚胎分成两半,一半取出后立即冷冻复苏并体外培养至囊胚,另一半体外培养至囊胚后冷冻复苏,子宫冲取囊胚(78枚)冷冻复苏为对照组;各组囊胚均移植至于宫,比较程序化冷冻对小鼠早期胚胎存活率的影响.结果表明:原核、2～4细胞胚胎、桑椹胚体外培养至囊胚后冷冻复苏率分别为56.4%、72.2%、81.6%,移植产仔率分别为38.1%、41.6%、56.8%,原核、2～4细胞组复苏率和产仔率极显著或显著低于对照组,桑椹胚组与对照组差异不显著,显示体外培养对早期胚胎冷冻存活有影响;原核、2～4细胞胚胎、桑椹胚冷冻后体外培养至囊胚,胚胎移植后产仔率分别为25.3%、28.2%、42.1%,与对应胚胎时期体外培养至囊胚冷冻复苏后移植产仔率相比,原核、2～4细胞组均存在显著差异,而桑椹胚组差异不显著,显示原核、2～4细胞的早期胚胎体外培养至囊胚后冷冻可提高冷冻存活率.     

dSarm/Sarm1 is required for activation of an injury-induced axon death pathway

Axonal and synaptic degeneration is a hallmark of peripheral neuropathy, brain injury, and neurodegenerative disease. Axonal degeneration has been proposed to be mediated by an active autodestruction program, akin to apoptotic cell death; however, loss-of-function mutations capable of potently blocking axon self-destruction have not been described. Here, we show that loss of the Drosophila Toll receptor adaptor dSarm (sterile α/Armadillo/Toll-Interleukin receptor homology domain protein) cell-autonomously suppresses Wallerian degeneration for weeks after axotomy. Severed mouse Sarm1 null axons exhibit remarkable long-term survival both in vivo and in vitro, indicating that Sarm1 prodegenerative signaling is conserved in mammals. Our results provide direct evidence that axons actively promote their own destruction after injury and identify dSarm/Sarm1 as a member of an ancient axon death signaling pathway.     

无血清培养山羊内细胞团的研究

对32只关中奶山羊进行超排处理,获得胚胎263枚,其中囊胚122枚。采用机械法、酶消化法和免疫外科法分离囊胚83枚,得到内细胞团(ICM)65个。将ICM培养于小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,研究含血清和无血清条件下ICM的增殖规律,并比较添加不同生长因子对ICM增殖的影响。结果表明,无血清培养时,ICM细胞增殖相对较慢,分化减少;添加LIF、bFGF、两种同时添加或均不添加对原代ESC样集落形成率的影响不显著(P>0.05),但添加10 ng/mL bFGF稍微有助于ICM增殖。山羊ICM适宜于无血清培养。     

夹竹桃叶片乙醇提取物对斜纹夜蛾生物学特性的影响

为进一步开发植物源胃毒剂、生产出环境友好型的低毒高效农药应用于生产,将不同浓度的夹竹桃叶片提取物处理斜纹夜蛾,测定其对斜纹夜蛾生长发育、存活率、雌雄比例及产卵量的影响。结果表明:浓度为0.380g/mL的夹竹桃叶片提取物对幼虫存活率、化蛹率、羽化率、生长发育、雌雄比例及产卵量均起抑制作用,而浓度为0.095g/mL和0.024g/mL的则起促进作用。     

Fibroblast growth factor in the extracellular matrix of dystrophic (mdx) mouse muscle

Polyclonal antibody F547 reacts with a bovine basic fibroblast growth factor (bFGF) and a human recombinant bFGF, but not with bovine acidic fibroblast growth factor. This antibody localized bFGF in the extracellular matrix of mouse skeletal muscle, primarily in the fiber endomysium, which includes the heparin-containing basal lamina. In mdx mouse muscle, which displays persistent regeneration, FGF levels in the extracellular matrix are higher than those in controls. Overabundance of matrix FGF in mdx muscles may be related to an increase in both satellite cell and regenerative activity in the dystrophic muscle and may help explain the benign phenotype of mdx animals compared with the genetically identical human Duchenne muscular dystrophy.     

栓皮栎栲胶的提取工艺技术研究

采用单因素试验和L₉(3⁴)正交试验相结合,Folin-Denis分光光度法方法测定单宁含量,利用优化的栓皮栎橡碗栲胶提取工艺,对秦岭北坡4种类型栓皮栎的橡碗、树皮、叶片和枝条的单宁含量进行了测定和差异分析。结果表明:1)提取温度对栓皮栎橡碗单宁提取的影响程度最大,其次是料液比和乙醇体积分数,提取时间对单宁提取的影响程度最小。2)乙醇提取厚皮深裂型栓皮栎橡碗单宁的适宜工艺为体积分数70%乙醇溶液,料液比为1∶15,在80℃条件下提取4 h。3) 秦岭北坡4种类型栓皮栎各器官的单宁含量存在显著或极显著差异,4种类型栓皮栎均为橡椀单宁含量最高（15.686%~15.895%）,其次是树皮（8.743%~9.274%）和叶片（6.549%~7.151%）,枝条（4.515%~4.925%）中单宁含量最低。4)橡椀、树皮、叶片和枝条的单宁含量均以厚皮深裂型栓皮栎最高,薄皮浅裂型的最低。秦岭北坡厚皮深裂型栓皮栎的橡椀、树皮、叶片是提取栲胶的良好工业原料。