酪蛋白和巨细胞病毒复合启动子激活人乳铁蛋白cDNA基因在转基因小鼠乳腺中的表达

为了提高转基因动物乳腺特异性表达水平,构建了两种不同启动子的乳腺特异性表达载体,以比较其乳腺特异性表达效果.应用山羊β-酪蛋白或牛αs1-酪蛋白调控序列、鸡β-球蛋白隔离元件、巨细胞病毒(CMV) 基因表达涮控元件构建了,乳腺特异性表达复合启动/增强子(Pcmv) ,以单一的酪蛋白启动子作为对照,与人乳铁蛋白cDNA组成乳腺特异性表达载体,并制备了转基因小鼠.经ELISA检测,复合启动/增强子构件指导人乳铁蛋白cDNA在原代转基因小鼠乳腺中重组人乳铁蛋白(rhLF) 表达水平(2.0～8.1 g·L-1) 明显高于单一酪蛋白启动子构件(0～12 mg·L-1) ,而在所有转基因小鼠的血清和唾液中未检测到rhLF.结果提示:酪蛋白-Pemv复合启动/增强子不仅可提高转基因小鼠乳腺特异性表达水平,而且具有良好的乳腺表达特异性.     

山羊BLG基因侧翼区的克隆及序列分析

克隆奶山羊β-乳球蛋白基因5′、3′调控区并对其进行序列分析。从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到山羊β-乳球蛋白基因4.2 kb的5′调控区和1.8 kb的3′调控区。将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性。部分序列分析表明,5′区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5′区同源性分别为100%和95%;3′区同源性则分别为99%和93%。克隆得到的奶山羊BLG调控区与山羊BLG伪基因显著不同,5′区和3′区同源性分别为83%和88%。结果表明,克隆得到的奶山羊BLG调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,为指导外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达奠定了基础。     

B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的研究应用

应用B型超声断层扫描仪对279只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后20～100天试验羊妊娠诊断阴性(B超判断未怀孕)的准确率为100%;正常交配羊妊娠诊断阳性(B超判断怀孕)的准确率为100%;部分胚胎移植后20天左右的受体羊出现假阳性,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明,在胚胎移植(2-8细胞胚胎)30天以后进行B超妊娠检查不仅可准确判断妊娠情况,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据,试验说明,B超妊娠诊断是目前波尔山羊胚胎移植产业化过程中的一个重要环节。     

苏格兰折耳猫骨软骨发育不良的诊疗体会

苏格兰折耳猫骨软骨发育不良也称为苏格兰折耳猫骨营养不良,是影响骨骼生长和关节软骨形成、导致四肢远端和尾部畸形的一种遗传性疾病。一例疑似病例中患畜主要表现为双侧后肢跗关节处肿胀,有疼痛感,爪部、尾部变短、厚,弯曲不灵活。经血常规和影像学检查确诊为苏格兰折耳猫骨软骨发育不良。通过一段时间药物治疗,病情好转,后肢可以着地走路。     

转基因小鼠乳汁中重组人乳铁蛋白的提取与抗菌活性分析

从人乳铁蛋白cDNA转基因小鼠(Mus musculus)中收集2个品系(PCL25和AP)的乳汁.采用凝胶过滤层析法提取重组人乳铁蛋白(rhLF).通过SDS-PAGE电泳.Western blot和ELISA鉴定并检测提取物中rhLF含量,按不同浓度rhLF作琼脂扩散抑制大肠杆菌(Eschenchia coil)和沙门氏菌(Salmonella)试验.结果表明,PCL25和AP转基因小鼠乳汁提取物中的rhLF含量为7-8 mg/mL;rhLF分子量为78 kD,与天然人乳铁蛋白分子量一致;对大肠杆菌和沙门氏菌均具有明显的抑菌作用.     

B型超声妊娠诊断技术在波尔山羊胚胎移植产业化中的应用

应用B型超声断层扫描仪对279只波尔山羊胚胎移植受体白山羊和87只自然交配波尔山羊进行早期妊娠检查。在胚胎移植后20～100d试验羊妊娠断阴性(B超判断未怀孕)的准确率为100%,正常交配羊妊娠诊断阳性(B超判断怀孕)的准确率为100%;部分胚胎移植后20d左右的受体羊出现假阳性,这可能与胚胎移植后胎儿发育停止或出现流产或手术造成的粘连有关。试验证明,在胚胎移植(2～8细胞胚胎)30d以后进行B超妊娠检查不仅可准确判断妊娠情况,而且能得到胚胎移植羊流产或妊娠中止的数据,试验说明,B超妊娠诊断是目前波尔山羊胚胎移植产业化过程中的一个重要环节。     

牛瘟流行病学的调查研究

对大量数据资料进行分析的基础上,运用统计方法,对我国历史上及世界上牛瘟的流行情况及特征作了具体阐述,并对其流行病学及风险分析进行了初步研究得出:牛瘟潜伏期最长为21d,流行周期在中国历史上为3～10年,在欧洲历史上为30～40年,在印度、巴基斯坦的流行周期为4～5年,在亚太地区的流行具有一定的季节性,其流行季节多为4～5月份。为能全面掌握世界各地牛瘟的流行分布情况,进行了牛瘟的周期性、季节性两方面的分析,并对各个国家针对牛瘟所采取的控制措施进行了比较、分析。     

动物善待与动物福利之现状及基本建议

就畜产品在我国加入世贸组织(WTO)后如何参与国际竞争,提出了一些通过改进畜牧兽医技术和增强认识、提高产品质量的思考,郑重阐述了动物福利在国内外一些基本情况,包括其所涵盖的内容和基本标准,进而提出了基本建议与有关此方面立法的严肃性和必要性。     

牛瘟流行病学的调查研究(续上期)

牛瘟病毒对许多消毒剂敏感，因为它的体积大，有液态包膜，并对酸碱都很敏感，在通常应用的消毒剂中，强碱的消毒作用最好，甘油、酚、甲醛都能很快破坏牛瘟病毒的感染力。病毒分布于全身各处体液及脏器中。在出现临床症状前１d就可以在血液、分泌物和排泄物中发现牛瘟病毒。所以，病毒可以污染畜栏和屠宰间，或者随尚未出现临床症状的带毒动物的长途运输传播到外地。在出现发热症状后的第３d病毒排出量达到最大，退热后则停止排毒。在最初发热的２４h内或退热２４h后不可能发生接触感染。动物免疫性及抗病力：如果不存在遗传的免疫性因素（…     

一例犬传染性性肿瘤的诊治

随着我国养犬业和小动物临床事业的快速发展,犬传染性性肿瘤的发病率逐年上升,使犬的外观及繁殖力受到严重影响。犬传染性性病阴道肿瘤可分为良性肿瘤和恶性肿瘤,其中良性肿瘤占70%-80%。笔者就临床上一例松狮犬阴道肿块病例进行诊断与治疗,经过流行病学调查、肿块性状观察和触诊检查,初步诊断为犬传染性性病阴道肿瘤。经过手术和术后护理,病犬得到痊愈,取得了很好的效果,为临床犬传染性性肿瘤的诊治提供参考。