刺盘孢属真菌PCR检测方法的建立

【目的】刺盘孢属(Colletotrichum)真菌是重要的植物病原菌,引起植物炭疽病。建立刺盘孢属真菌PCR检测方法。【方法】比对分析刺盘孢属及其近似属的ITS序列,设计刺盘孢属特异性引物,建立PCR扩增体系,验证引物的特异性和灵敏度。【结果】设计出刺盘孢属特异性引物ITS-c3/c4,建立了刺盘孢属常规PCR检测体系。建立的PCR体系能从刺盘孢属菌株中扩增出449 bp的特异性条带,刺盘孢属的近似属菌株未能扩增到条带。灵敏度试验可检测到DNA的浓度为2.2 pg/µL。【结论】用建立的PCR体系对炭疽病梨果实样品进行检测,可从发病组织中检测到刺盘孢属真菌。建立的PCR方法可靠、灵敏度高,能够快速、准确检测出刺盘孢属真菌。     

广州市沙田柠檬炭疽病病原菌种类的分子鉴定

【目的】明确沙田柠檬炭疽病的病原菌种类,为沙田柠檬炭疽病的田间防治提供指导。【方法】对采集的炭疽病样本进行分离纯化培养,获得 ST2-1、ST2-2、ST2-3、ST3-1、ST3-2、ST3-3、ST4-1、ST4-2和 ST4-3 等 9 株沙田柠檬炭疽病病原菌。分别采用针刺和喷洒接种的方法测定上述菌株的致病性,并分别克隆其核糖体内转录间隔区（ITS）、β 微管蛋白（TUB2）、钙调蛋白（CAL）、肌动蛋白（ACT）、核糖体大亚基（LSU）、甘油醛 -3- 磷酸脱氢酶（GAPDH）和几丁质合成酶 1（CHS1）基因部分片段进行多基因联合鉴定。【结果】ST2-1、ST2-2、ST2-3、ST3-1、ST3-2、ST3-3、ST4-1、ST4-2 和 ST4-3 均 具 有 较 强 致 病 性, 其 中 ST2-1、ST2-2 和 ST2-3 的生物学特征和进化树表明它们属于暹罗刺盘孢菌（Colletotrichum siamense）,ST3-1、ST3-2和 ST3-3 属于兰花刺盘孢菌（Colletotrichum cliviicola）,ST4-1、ST4-2 和 ST4-3 属于果生刺盘孢菌（Colletotrichum fructicola）。【结论】综合形态学特征和分子生物学鉴定结果,引起沙田柠檬炭疽病的病原菌有暹罗刺盘孢菌、兰花刺盘孢菌和果生刺盘孢菌,其中暹罗刺盘孢菌仅分离自沙田柠檬发病的果实,兰花刺盘孢菌和果生刺盘孢菌分离自沙田柠檬发病的叶片,其中兰花刺盘孢菌能在柑橘类植物上引起炭疽病为国际上首次报道。     

陕西省核桃炭疽病病原鉴定

通过常规组织分离法对采自陕西省陕南和关中的核桃(Juglans regia)炭疽病样品进行了分离,采用形态学、培养特性并结合核糖体内转录间隔子(rDNA-ITS)、β-微管蛋白(TUB2)、钙调蛋白(CAL)、谷氨酰胺合成酶(GS)和3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多基因系统发育分析方法以及致病性测定,明确了引起陕西省核桃炭疽病病原菌的种类。结果显示:12个代表性菌株被鉴定为胶孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides),4个代表性菌株被鉴定为尖孢刺盘孢复合种(C.acutatum)中的C. sp.,C. sp.与古代稀刺盘孢(C.godetiae)在系统进化关系上最接近,自展支持率为91%。致病性测定显示,胶孢刺盘孢和C. sp.能够侵染核桃果实并产生典型的炭疽病症状。     

刺盘孢菌真菌病毒研究进展

真菌病毒是指寄生于各种真菌中的病毒,其中部分弱毒相关病毒可使寄主真菌致病力发生衰退,甚至导致病原群体致病力下降,是一种具有生防潜能的微生物资源.刺盘孢菌(Colletotrichum spp.)可引起植物严重的炭疽病,造成巨大的经济损失.文章归纳总结了刺盘孢菌中真菌病毒的种类和特征:仅有9种刺盘孢菌中存在真菌病毒,且病毒基因组类型均为dsRNA;绝大部分病毒为直径25~50 nm的球状病毒颗粒,另有目前唯一一例线状真菌病毒;序列已知的6例刺盘孢菌病毒中有2例为双分病毒、2例为产黄青霉病毒、2例还未确定归类.通过分析病毒对寄主真菌的影响发现不同病毒对刺盘孢菌表型、生长、产孢和致病力等方面的影响存在明显差异,但仅有2例为能使寄主致病力衰退的弱毒相关病毒.弱毒相关病毒的发现为植物炭疽病的生防研究提供了新契机,但由于存在真菌病毒数量不足、真菌病毒分离鉴定进展缓慢、真菌病毒传播效率低及病毒与刺盘孢菌间的互作研究不够深入等问题,刺盘孢菌应用于田间炭疽病的防治还有一定距离.针对上述问题,未来研究方向可从以下方面着手:采用宏转录组等技术鉴定和发掘更多的真菌病毒;通过遗传转化手段或挖掘可利用的化学物质或传播介体提高病毒的传播效率;建立刺盘孢菌遗传转化体系及病毒反向遗传转化系统、结合多组学手段深入研究病毒与寄主真菌互作,为刺盘孢菌的致病机理研究及真菌病毒的生防利用提供参考.     

根腐病草莓及根系土壤真菌的分离纯化及ITS分子鉴定

为探索根腐病草莓及根系土壤的微生物种类,本文采用稀释涂布平板法和平板划线法对患病草莓根系土壤以及草莓根茎进行真菌分离,并利用ITS基因序列进行分子鉴定。结果表明,从根腐病草莓病株中共分离得到12种不同的真菌,经ITS序列同源性分析,这12种真菌分别属于孢球拖霉属(Gongronella sp.)、黄瓜萎蔫病菌(Plectosphaerella sp.)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis clavispora)、织球壳菌属(Plectosphaerella sp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)、青霉属(Penicillium sp.)和梭孢壳属/草根霉属(Thielavia sp.)八个真菌种属。其中孢球拖霉属(Gongronella sp.)、盘多毛孢属(Neopestalotiopsis sp.)和梭孢壳属/草根霉属(Thielavia sp.)为首次在草莓根腐病植株中发现。本文的研究结果为草莓土传疾病根腐病的研究及防治提供了参考资料。     

富阳地区茶叶叶部病害病原种类及发病规律

通过2016—2017年对富阳地区茶叶主要叶部病害种类及发生规律的调查表明,富阳地区茶叶叶部病害主要有炭疽病、灰叶斑病和叶点霉叶斑病3种。总结不同月份的茶叶叶部病害的病原菌发生概率可知,春季为叶点霉属真菌引起的叶斑病为主,易于侵染茶叶嫩芽和嫩枝;其次是拟盘多毛孢属真菌引起的灰叶斑病;随着气温的升高和茶叶的生长,刺盘孢属和盘长孢属真菌引起的茶叶炭疽病发生的比率随之增加,6—11月持续为茶园的优势致病菌,同时叶斑病的发病率逐渐降低;茶叶灰叶斑病全年发生,但发病率总体低于炭疽病。     

砂仁真菌病害的鉴定

砂仁(Amomum villosum Lour.)为著名南药,生产上有多种病害,以叶斑病为害严重而影响产量。作者1985年、1986年,在砂仁的重要产地阳春、封开等县进行了调查,认为目前主要有五种真菌病害:其中炭疽病两种:幼苗炭疽病为姜刺盘孢(Colletotrichum zingiberis(Sundar.)Butler et Bisby),成株炭疽病为盘长孢状刺盘抱(Colletotrichumgloeosporioides Penz.);果腐病两种,多数为茄丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn.),少数为镰刀菌(Fusaium sp.)引起;最影响生产的是叶斑病,其病原菌砂仁节梨孢(Gona-topyricularia amomi Z.D.Jiang et P.K.Chi)是个新属新种。本文较详细地描述了五大病害的症状及其病原菌的形态,并报道了各病菌的致病性测定结果。     

宁夏炭疽菌属真菌资源研究

炭疽菌属真菌是一类重要的植物病原菌,研究碳疽菌属真菌不仅能为植物病害防治提供科学依据,同时可丰富真菌资源多样性研究。通过实地考察、采集标本和分离培养菌种,从宁夏回族自治区境内共鉴定发现炭疽菌属真菌13种,分别是粒毛盘孢、菊刺盘孢、葱炭疽菌、盘长孢状刺盘孢、禾生刺盘孢、木槿刺盘孢、希金斯刺盘孢、葫芦科刺盘孢菌、豆刺盘孢、亚麻刺盘孢、豌豆刺盘孢、三叶草刺盘孢,及未定名刺盘孢属一种。它们在分布上没有地域特征,都为植物病原菌,引起植物炭疽病。     

中国拟盘多毛孢属的新组合种（Ⅲ）

本文为中国拟盘多毛孢属新组合种（Ⅰ）、（Ⅱ）的续，报道１１个不同的新组合种。这１１个新组合种是：３６．寄生在柑桔和黄皮树叶部的柑桔拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｐｓｉｓｃｉｔｒｉ（Ｍｕｎｋｄ＆．Ｋｈｅｓｗａｌｌａ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｎｏｖ）；３７．寄生在忍冬科荚迷属植物的叶部的双纤 毛拟盘多毛孢（Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓｂｉｃｌｉａ（Ｄｅａｎ＆Ｂｉｓｂｙ）Ｙ．Ｘ．Ｃｈｅｎｃｏｍｂ．ｍｏ     

浙江省“浙八味”道地药材真菌病害调查及病原鉴定

通过对浙江省磐安地区"浙八味"药材真菌病害进行病原菌分离和鉴定,采用无菌培养基平板分离技术,从药材植物病叶中分离获得病原真菌,构建真菌ITS系统发育树,对病原菌进行分子水平的分类鉴定,并观察病原菌菌落形态及显微结构和形态学鉴定共获得9种病原真菌,分别为链格孢菌(Alternaria sp.)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、球毛壳菌(Chaetomium globosum)、绿色木霉菌(Hypocrea virens)、月状旋孢腔菌(Cochliobolus lunatus)、球孢黑孢霉(Nigrospora sphaerica)、木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、束状刺盘孢(Colletotrichum dematium)和茎点霉菌(Phoma sp.)。查阅药用植物病原菌记录并结合科赫法则实验,当地药用植物成为3种病原菌的新寄主,分别为月状旋孢腔菌引起的安徽亳州白芍褐斑病、束状刺盘孢引起的磐安阔叶麦冬炭疽病、球毛壳菌引起的早小洋菊叶枯病。     

大花蕙兰常见真菌性病害鉴定

根据调查和鉴定,明确了福建地区大花蕙兰常见的5种真菌性病害:炭疽病、叶枯病、灰霉病、白绢病和疫病。描述了这5种真菌性病害的症状、病原菌及病情。     

AHP评价法在大花蕙兰杂交后代选育中的应用研究

[目的]探讨AHP法在大花蕙兰杂交后代选育中应用的可行性。[方法]在大花蕙兰杂交后代选育初期,运用AHP评价法对6个杂交组合生长周期1年内小苗的株高、叶片数、叶长、叶宽、叶色、出芽时间、鳞茎大小、根系状况这8个性状进行综合评价。[结果]所选组合综合性状表现优良,与实际生长发育状况基本相符,尤其是组合＂♀浪漫×♂黄金薄荷＂、＂♀台北小姐×♂浪漫＂,它们的杂交后代株型挺拔、花期适中、抗病性强,值得重点关注。[结论]在大花蕙兰杂交后代选育初期,运用AHP评价法能够在株型、花期和抗病性这几个方面做出比较准确的筛选,可根据选育要求及早选出表现优良的组合,大大节省了成本并提高了育种工作效率。     

江西省大叶黄杨病害调查

江西省大叶黄杨在生长发育过程中的主要病害有炭疽病、褐斑病、疮痂病、白粉病。20~30℃适宜发病,发病严重时病叶枯死脱落,严重影响大叶黄杨生长发育。发病初期,用敌力脱、火把等喷雾能有效控制其扩展蔓延。     

大棚黄瓜病害的病原鉴定与诊断

于2009 ～ 2013年对漳州市南靖县山城镇山边村大棚黄瓜病害进行调查及鉴定,结果表明：大棚黄瓜病害种类主要有靶斑病、霜霉病、疫病、角斑病、灰霉病、菌核病、炭疽病、病毒病与黑星病,其中靶斑病在福建省为首次记录.猝倒病、枯萎病、白粉病、根结线虫病、白绢病有不同程度发生.     

贵州马铃薯病害调查研究

为了明确贵州马铃薯生产中病害的发生和流行规律,2008-2010年对贵州马铃薯主产区病害发生及流行情况进行调查研究。结果发现,有19种的病害为害马铃薯,包括真菌病害8种,细菌病害4种,病毒病4种,放线菌病害1种,非侵染性病害2种。其中发生较为普遍的病害有晚疫病、生理性叶斑病、早疫病、病毒病（潜隐花叶病毒病）、青枯病、炭疽病和生理性早衰等7种,其中马铃薯晚疫病发生和危害最重。各种病害的发生时间与严重程度取决于当地气候条件、品种特性和播种时期。     

三亚市园林景观植物主要病虫害名录

调查了三亚市主要园林景观植物病虫害。结果表明,三亚市主要虫害有椰心叶甲、椰子织蛾、刺蛾、刺桐姬小蜂、榕管蓟马、黑刺粉虱、介壳虫、粉虱和粉蚧;主要病害有煤烟病、炭疽病、叶枯病和黑斑病。     

兰花炭疽病的初步研究

本文对武汉市首义公园等地的兰花炭疽病（ColletotrichumorchidearumAlleschf,CymbidiiAllesch）进行了病情调查、病原菌鉴定。孢子萌发试验和药剂筛选等项研究结果表明，春兰（CymbidiumgoeringiiRchb.f.）较感病，惠兰（CymbidiumfaberiRolfe）次之，建兰（CymbidiumensifoliumCL.）和墨兰（Cymbisiumsinense（Andr）Wild）较抗病;兰炭疽病菌的分生孢子在清水中萌发率很低，一定的营养物质对其有刺激作用;兰炭疽病菌主要通过伤口侵入叶片，病菌的潜育期为15d;5种杀菌剂中多菌灵、炭疽福美这两种在室内药剂筛选中对兰花炭疽病菌有良好抑制作用.     

茄子黑枯病、褐轮纹病、早疫病、褐斑病、炭疽病、黑斑病和黑根霉果腐病的识别与防治

介绍了茄子黑枯病、褐轮纹病、早疫病、褐斑病、炭疽病、黑斑病和黑根霉果腐病的危害症状、发病特点,并从农业措施、化学防治等方面总结了各病害的综合防治方法。     

海南胡椒主要真菌病害调查与病原鉴定

[目的]明确当前海南胡椒主要真菌病害及对应病原菌种类。[方法]对海南13个胡椒主要种植区域的胡椒园进行系统调查,对所得标本进行病原菌分离、鉴定。[结果]共调查到真菌病害7种,分别为胡椒瘟病、炭疽病、枯萎病、慢蔫病、根腐病、基腐病、菌核病。目前,危害胡椒最严重的为胡椒瘟病、胡椒炭疽病、慢蔫病和枯萎病。[结论]研究结果为胡椒病害的综合防治和科研工作者掌握其最新动态提供了理论依据。     

鹅掌藤真菌病害的鉴定

 报道了为害广州地区鹅掌藤（Schefflera arboricola Hayata）的6种病原真菌,即黑白拟茎点霉〔Phomopsis melaleuca （Berk.＆ M.A. Curtis）Grove〕,鹅掌柴叶点霉（Phyllosticta schefflerae P.G.Xi. P.K.Chi et Z.D.Jiang ),橄榄色盾壳霉（Coniothyrium olivaceum Bon.）,楤木球座菌（Guignardia araliae Gutner）,烟草疫霉寄生变种〔Phytophthora nicotianae var. parasitica （Dast.）Waterh．〕和胶孢刺盘孢〔Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc. 〕,其中鹅掌柴叶点霉为新种,黑白拟茎点霉为国内新纪录种。在大棚生产中,以烟草疫霉引起的叶疫病和胶孢刺盘孢引起的炭疽病发生普遍而严重。模式标本保存在华南农业大学真菌标本室。