利用SRAP标记快速检测西瓜杂交种子纯度

【目的】以设施、露地兼用西瓜杂交品种早佳(84-24)及其父本、母本为试验材料,利用SRAP分子标记技术进行DNA指纹图谱构建,筛选出能够快速检测西瓜早佳(84-24)杂交种子纯度的SRAP标记。【方法】选取28对SRAP引物,对供试西瓜品种早佳(84-24)及其父、母本的基因组DNA进行扩增,筛选出扩增多态性好、条带清晰、稳定的SRAP引物作为候选标记,利用100粒杂交种子进行纯度检测准确性验证。【结果】28对供试引物中有22对引物在F1及其父、母本之间扩增出多态性条带,多态性比率为78.6%,其中有1对为父本显示,母本缺失的显性SRAP引物(Me6F/Em2R)。用显性引物(Me6F/Em2R)对100粒西瓜杂交种子进行纯度检测,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,纯度为99.0%,与田间形态学鉴定结果(99.1%)基本一致。【结论】利用SRAP标记(Me6F/Em2R),结合聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,可以对西瓜杂交种早佳(84-24)的纯度进行快速、准确鉴定。SRAP分子标记技术在西瓜杂交种子纯度室内快速检测中有很大的应用前景。     

辣椒基因组SSR引物的开发及品种纯度分子鉴定

辣椒是世界上重要的蔬菜作物之一,基因组简单重复序列(simple sequence repeats,简称SSR)标记的开发对于辣椒分子育种和杂交种子纯度检测具有重要意义。为了检测辣椒品种绿陇3号杂交种子的纯度,基于辣椒全基因组序列开发了75对SSR标记。结果表明,只有SSR标记p50对父母本的扩增结果表现为带型清晰、共显性,且具有高多态性,可进一步用于杂交种的纯度检测。为了确保标记p50的准确性和可靠性,对其PCR产物进行了进一步测序。测序结果表明,在父母本中分别扩增出了251、293 bp的序列。用标记p50对绿陇3号辣椒进行纯度检测,结果显示,种子纯度为100%,鉴定结果与田间纯度一致。新SSR分子标记的开发,为辣椒杂交种子纯度的鉴定提供了参考,也为辣椒种质资源遗传多样性分析及分子育种研究奠定了基础。     

快速检测甜瓜西州蜜17号种子纯度的SSR标记

[目的]以甜瓜杂交品种西州蜜17号及其母本为材料,运用SSR分子标记技术对杂交种与母本之间的扩增谱带的多态性进行研究,筛选出一种能够快速检测杂种的SSR标记.[方法]在选取的18个SSR标记中,SSR标记CMBR068在母本中扩增出一条谱带,在杂种中扩增出两条大小差异较大的谱带,其中一条谱带的大小与母本扩增的谱带大小一致.[结果]利用2.5;琼脂糖凝胶电泳技术和CMBR068标记对100粒杂交种子的纯度进行检测,种子纯度的鉴定结果为98;.[结论]西州蜜17号甜瓜杂交种子的纯度,可利用SSR标记CMBR068,结合2.5;琼脂糖凝胶电泳技术进行快速检测.     

南瓜杂交种纯度RAPD标记鉴定研究

为快速高效鉴定南瓜杂交种纯度,利用RAPD分子标记技术对南瓜新品种"中青N3"杂交种进行分子鉴定。结果表明:在6个RAPD引物中,筛选出1个R2引物,在父本"钻17-1"扩增出1 000 bp的条带,在母本"钻17-2"扩增出1 500 bp的条带,在杂交种"中青N3"扩增出500 bp和750 bp的2条互补带型。R2引物适于鉴定南瓜"中青N3"杂交种的纯度。RAPD鉴定结果的准确性高于大田鉴定结果。该研究结果为生产应用提供了科学依据。     

茄子SSR多态性标记筛选及杂交种纯度鉴定

[目的]建立一套快速、准确、高效的茄子杂交种纯度鉴定方法,为其制种过程中除伪存真及大面积推广应用提供技术支持.[方法]挑选已公布的48对SSR引物对2个茄子杂交种15-16和1-7的亲本进行多态性标记筛选,选取有效引物对茄子杂交种进行纯度鉴定,并结合田间植株纯度鉴定,验证SSR分子标记纯度鉴定的有效性.[结果]在48对SSR引物中,有12对引物在杂交种15-16亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有8对(SM14、SM15、SM17、SM20、SM29、SM30、SM34和SM45);有5对引物在杂交种1-7亲本材料中存在多态性,其多态性引物带型呈互补带型的有4对(SM15、SM20、SM24和SM29).分别选取2对呈互补带型的SSR引物进行杂交种纯度鉴定,结果显示杂交种15-16和1-7的纯度分别为99%和100%,与田间种植鉴定结果一致.[结论]采用SSR分子标记检测茄子杂交种纯度具有准确、高效的特点,可为茄子杂交制种过程中真假杂种鉴定提供技术支持.     

杂交玉米品种家佳荣2号种子纯度的InDel分子标记鉴定

为建立一个简捷、经济、准确可靠的室内杂交玉米种子纯度鉴定方法,以玉米杂交种家佳荣2号及其父母本、JR02杂交组合为材料,用InDel(插入-缺失)分子标记技术和田间小区种植鉴定2种方法对家佳荣2号杂交种子进行纯度鉴定。结果显示,InDel分子标记鉴定的纯度为95.6%,田间小区种植鉴定的纯度为97.8%,InDel的结果略低于田间小区种植鉴定的结果。18对InDel引物中能与家佳荣2号双亲基因组稳定结合且具有多态性的引物共有11对,多态性检测率为61%,其中有1对引物带型偏父本,其余10对InDel引物都能与家佳荣2号稳定结合,可用于鉴定家佳荣2号的种子纯度。在10对引物中随机选取2对引物,有1对引物能从家佳荣2号中区分出其相似品种JR02。2种方法鉴定结果高度一致,表明InDel分子标记可作为玉米杂交种室内纯度鉴定的方法。     

石蒜属种间杂交种的鉴定和分子身份证构建

  目的  鉴定石蒜属Lycoris种间杂交种F₁的真实性。  方法  利用荧光标记表达序列标签简单序列重复(EST-SSR)方法,构建亲本石蒜L. radiata、中国石蒜L. chinensis、换锦花L. sprengeri和石蒜-中国石蒜、石蒜-换锦花杂交种F₁共78个样品的分子身份证,并分析遗传关系。  结果  15对多态性强的荧光标记EST-SSR引物得到扩增条带92条,每对引物平均扩增6.13条;多态性信息量(PIC)为0.6292~1.0000,平均为0.9137。引物SSR203+SSR115对石蒜-换锦花、石蒜-中国石蒜杂交种F₁代的真实性鉴定率分别为96.30%和96.15%。非加权组平均法(UPGMA)聚类分析表明:石蒜、中国石蒜、换锦花及其种间杂交种的遗传相似系数为0.76~0.98,在相似系数为0.77处25个亲本和53个杂交种聚为Ⅰ和Ⅱ两大类,Ⅰ类包括亲本换锦花、石蒜-换锦花杂交种,Ⅱ类包括石蒜、中国石蒜以及中国石蒜-石蒜杂交种,Ⅱ类又可分为Ⅱa、Ⅱb和Ⅱc等3个亚类。利用荧光标记EST-SSR基因型编码,构建了78个石蒜属亲本及杂交种的分子身份证。  结论  荧光标记EST-SSR可用于石蒜属种间杂交种的早期鉴定。图1表5参26     

基于 SSR 分子标记的‘汇丰 2 号’辣椒杂交种子纯度和真实性鉴定

【目的】‘汇丰 2 号’辣椒为杂交一代新品种，具有中早熟、抗病性强、耐储运和品质佳等特性，深受农户和消费者喜爱。为保障种子质量，拟建立一套快速、简便的种子纯度和真实性鉴定方法。【方法】基于辣椒基因组已公开的 SSR 分子标记资源，以‘汇丰 2 号’父、母本为材料，筛选多态明显、条带清晰且扩增稳定的 SSR 标记，对‘汇丰 2 号’杂交种子进行纯度鉴定，并结合田间形态鉴定验证分子标记鉴定的准确性。此外，利用筛选出的 SSR 标记对‘粤红 1 号’、‘汇丰 1 号’、‘汇丰 2 号’和‘汇丰 5 号’4 个品种进行真实性鉴定。【结果】筛选出 2 个 SSR 标记 L0143 和 L0622，其多态明显，且条带清晰、扩增稳定。其中，标记L0143 在母本 W2280 中 PCR 扩增条带为 149 bp，在父本 W2102 中的扩增条带为 141 bp；标记 L0622 在母本和父本中的扩增条带分别为 208 bp 和 196 bp。2 个标记单独使用时均可以准确鉴定‘汇丰 2 号’种子纯度，且 2个标记同时使用可以将‘粤红 1 号’、‘汇丰 1 号’、‘汇丰 2 号’和‘汇丰 5 号’4 个品种区分开，即可鉴定它们的真实性。【结论】筛选出的 SSR 分子标记 L0143 和 L0622 能够快速、准确、低成本、有效的对‘汇丰 2 号’杂交种子进行纯度和真实性鉴定，该鉴定方法操作简单，能够替代传统杂交种子纯度和真实性鉴定的方法，具有较高的商业应用前景。     

玉米杂交种子纯度的SSR检测与田间鉴定的比较研究

为发展分子标记技术在玉米杂交种子纯度鉴定上的应用,文章对吉林省2005年玉米省级区试的30个品种进行了SSR分子标记的纯度分析,筛选出11时多态性好的引物,并与田间纯度鉴定结果进行了比较.通过相关分析和差异显著性分析表明:SSR鉴定的(平均)纯度与田间纯度鉴定结果较为一致,相关系数达到0.798,而且两者无显著差异,因此,SSR分子标记可以用于玉米田间纯度的鉴定;引物umc1069和引物umc2373所标记的结果能较好的代表田间纯度鉴定的结果.     

糯玉米杂交种纯度InDel分子标记鉴定与田间鉴定的相关性分析

为发展更快捷、简便的新型分子标记技术并研究其在糯玉米杂交种纯度鉴定中的应用,对4个糯玉米杂交种进行了InDel共显性分子标记纯度分析,筛选出5对多态性好的引物,并与田间鉴定结果进行了相关性分析。结果显示,InDel标记鉴定结果与田间鉴定结果呈极显著正相关,相关系数达到0.998。因此,InDel标记鉴定可用于糯玉米杂交种纯度鉴定,且结果准确可靠。     

杂交中稻广两优476品种与纯度的鉴定

为辨别杂交中稻广两优476种子真伪并鉴定其纯度,利用农业部《水稻品种鉴定DNA指纹方法》(NY/T 1433-2007)中推荐的24对引物进行PCR,使用聚丙烯酰胺凝胶电泳对广两优476及其亲本,以及另外几个育种常用素本材料进行了多态性筛选,并利用筛选所得引物的SSR标记对广两优476进行了种子纯度分析.结果表明,这24对引物在几个常用亲本及广两优476间具有良好的多态性,可用于构建广两优476的DNA指纹图谱.同时,从中筛选得到标记RM209和RM17的两对引物在广两优476父母本间有显著多态性,其中RM209的引物的PCR产物在2％琼脂糖凝胶电泳条件下分辨效果最好,可用于广两优476杂交种子的纯度鉴定.2009年冬在实验室使用RM209鉴定广两优476杂交种子纯度,结果为98.6％,与2010年春在海南田间种植鉴定纯度98.3％相符.     

利用SSR标记鉴定抗虫三系杂交棉邯杂429的纯度

以三系杂交棉邯杂429及其亲本为试验材料,进行了SSR分子标记。从196对引物中筛选到3对带型稳定、在杂交种中呈现双亲互补型的SSR引物,为该杂交种纯度的快速鉴定奠定了基础。结果表明：利用SSR分子标记技术结合单粒棉种DNA快速提取方法,可以快速、准确地鉴定棉花杂交种的种子纯度。     

陆两优996种子纯度的SRAP指纹图谱鉴定

利用270对SRAP引物对陆两优996和2个亲本的DNA指纹图谱,获得能在父、母本间表现出多态性的特异SRAP标记引物有54对,其中差异性条带136个。利用Me3Em8引物,条带在杂交种完全互补,对200株样本进行了纯度鉴定,结果鉴定纯度为97.50%,与田间种植鉴结果97.50%(海南鉴定)一致,表明SRAP标记技术适用于种子纯度鉴定。     

用SSR分子标记检测杂交油菜秦优7号的种子纯度

杂交油菜中的主要杂株类型是母本不育株和父本恢复株。通过对100对SSR引物筛选,获得1对可将杂交油菜秦优7号及其父母本区分开来的SSR引物SA82,扩增产物杂交种表现为父母本的互补带型,在30 g/L的琼脂糖凝胶上显带清晰稳定。通过简化油菜DNA提取方法、优化反应体系、重复使用琼脂糖凝胶等,建立了适用于杂交油菜秦优7号种子纯度检测的SSR技术系统。经对大量油菜杂交种个体进行验证,证明该方法具有很好的重复性、准确性和可靠性,同时具有快速、经济的特点,可用于杂交油菜种子纯度的实际检测。     

SSR标记在油菜隐性核不育杂交种的纯度鉴定研究

[目的]利用SSR标记对油菜隐性核不育杂交种的纯度进行鉴定。[方法]以贵州省油菜科学研究所选育的甘蓝型油菜"油研系列"为材料,利用简化的SSR标记技术对制种样品进行纯度分析。[结果]筛选出了2对条带清晰、易于统计的SSR引物;大田生产F1杂种群体的纯度鉴定结果表明,SSR鉴定的结果清晰可辨,可信度高,能较准确地反映种子的真实纯度。[结论]该试验为SSR标记在油菜种子纯度鉴定中的进一步应用奠定了基础。     

农业生物技术在水稻种子纯度鉴定中的应用

【研究目的】为了选择直观、准确、可靠、经济可行和易于操作的水稻种子纯度鉴定技术;【方法】分析和总结了电泳鉴定法、DNA分子标记鉴定法和叶色标记技术鉴定水稻种子纯度的研究进展及应用概况;【结论】作者认为电泳鉴定法及DNA分子标记鉴定法只能获得杂交水稻杂种纯度的基本数据,不具备有效排除假杂种的功能,也不可能采取后补救措施解决因纯度低而造成的产量损失。白化转绿型叶色标记技术运用在杂交水稻上,将结束传统种子纯度的检测方法,引发种子纯度检测的革命,具有极其广阔的市场前景。     

春性双低甘蓝型油菜杂交种和亲本指纹图谱构建及杂交种纯度鉴定

从140对SSR引物中筛选出13对多态性好的引物,构建了14份材料的DNA指纹图谱,筛选出青杂2号、青杂5号共显性SSR标记,检测了青杂2号、青杂5号大田抽样F1群体L15、L41的纯度。结果表明SSR标记鉴定检测方法比大田检测更快更准确。     

SSR分子标记鉴定小豆F1真假杂种

SSR分子标记以其含量丰富、多态性高、共显性等优点,被广泛应用于多种作物F1代的真假杂种和种子纯度的鉴定。本文对43个杂交组合的123个小豆F1代材料,利用亲本多态性SSR标记,鉴定出真杂种66个,SSR标记可以有效地应用于小豆杂交F1代真假杂种鉴定。     

基于RSAP和SSR的辣椒优良自交系间遗传距离的估计与比较

作物F1代的杂种优势表现与亲本间的遗传距离直接相关,对自交系间遗传距离的估计可被用来预测杂种优势。针对我国鲜食尖椒的育种目标,利用RSAP和SSR标记系统,对来自国内外的10份尖椒优良自交系间的遗传距离进行估计,并比较了2种标记的结果和效力。结果显示,RSAP标记具有较高的位点和多态性检测能力,平均每次可检测51个位点和13个多态性条带,分别是SSR的17倍和6.5倍;基于RSAP的遗传距离和基于SSR的遗传距离相关性较高(r=0.542 9);2种标记系统的聚类结果基本一致,均将10份尖椒分为3大类,这种分类结果不但反映了果实形状在辣椒分类上的重要地位,而且与辣椒杂种优势育种实践相一致。