萨×哈F_1代及回交群体CAMKMT基因多态性与生长性状的关联分析

钙调蛋白赖氨酸转甲基酶(CAMKMT)基因在赖氨酸降解通路中具有重要作用,是绵羊生长性状的一个重要候选基因。本研究对萨福克羊与哈萨克杂交F_1代成年母羊、回交群体4月龄羔羊CAMKMT基因rs411221065、rs162300069、rs425859722位点的多态性以及与生长性状的关联性进行分析。结果表明:rs411221065、rs162300069、rs4258597223个SNP位点均检测到3个基因型,rs411221065、rs162300069属于中度多态,rs425859722属于低度多态;在F_1代成年母羊群体中,rs425859722位点CC基因型个体胸宽极显著低于CT基因型(P0.01)、臀宽极显著低于CT和TT基因型(P0.01),rs411221065位点CC基因型胸宽显著低于CT和TT基因型(P0.05),rs162300069位点GG基因型体高显著高于AG基因型、胸宽显著高于AA基因型(P0.05)。结果提示,绵羊CAMKMT基因3个SNP位点多态性对F_1代成年母羊生长性状有一定的影响,可以作为进行绵羊生长性状分子标记辅助选择的候选基因。     

MC4R和PROP1基因多态性及合并基因型与中国美利奴羊生长性状的关联分析

为了探讨MC4R和PROPI基因作为绵羊生长性状候选基因的可能性,寻找与绵羊生长性状相关的分子标记.本研究采用PCR-SSCP方法检测中国美利奴羊和德国美利奴羊MC4R和PROP1基因的多态性,分析了多态位点不同基因型及合并基因型与中国美利奴羊生长性状的关联性.结果表明:MC4R基因MC4R-3位点存在G894C突变,MC4R-4位点3′侧翼区存在A1223G、G1229A和T1307G 3个突变位点;PROP1基因在外显子3上存在A2660G突变,导致Thr181Ala改变.关联分析表明,在中国美利奴羊群体中,MC4R-4位点不同基因型个体体斜长和腰角宽差异显著(P＜o.05),优良基因型为BB; PROP1基因不同基因型个体尻宽和胸围差异显著(P＜o.05),优良基因型为BB; PROPl-MC4R-4优良基因型聚合体BB-BB个体体斜长高于其它合并基因型个体(P＜o.05).结果提示绵羊MC4R和PROP1基因单核苷酸多态性及合并基因型对中国美利奴羊生长性状有一定的影响,可以作为进行绵羊生长性状分子标记辅助选择的候选基因.     

黔北麻羊GHRH—R基因多态性与生长性状的关联分析

为研究黔北麻羊GHRH—R基因多态性及其与生长性状的关系,以相同条件下饲养的30只36～48月龄母羊为研究对象,利用克隆测序技术,对GHRH—R基因的第2、第3外显子及部分内含子进行SNPs位点的检测,并将发现的SNPs位点与黔北麻羊生长性状进行关联分析。结果表明：在第3内含子6bp处C→A碱基突变AA型基因型个体的体重显著高于AC型个体（P〈0．05）,该位点可作为黔北麻羊体重选择的分子标记。     

绵羊FRZB基因InDel检测及其与生长性状的关联分析

本研究以卷曲相关同源蛋白(FRZB)基因作为候选基因,以同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊4个品种共计582只绵羊个体为试验材料,利用琼脂糖凝胶电泳结合DNA测序技术对FRZB基因的InDel进行筛查,旨在寻找与4个品种绵羊生长性状相关的InDel位点。结果表明,绵羊FRZB基因第1内含子上检测到一段14 bp的InDel突变;FRZB基因内含子区InDel突变位点在同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊群体中均存在II、ID、DD 3种基因型;关联分析表明,FRZB基因中检测到的InDel突变对同羊生长性状有显著影响(P0.05),其中II基因型的体长、背高、荐高、距骨宽度、尾长和尾宽在同羊群体中显著优于DD基因型,可以作为候选分子标记用于同羊分子标记辅助选择。这些结果提示,绵羊FRZB基因第1内含子上一个14 bp的插入突变可显著影响同羊生长性状,可以作为绵羊育种中生长性状的潜在分子标记。     

绵羊CLPG和MSTN基因多态性及其与生长性状的关联分析

试验旨在探究CLPG(Callipyge)与MSTN(Myostatin)基因作为绵羊生长性状候选基因的可能性,调查与绵羊生长性状相关的分子遗传标记。本试验以133只澳洲白羊×杜泊羊×湖羊杂交绵羊为研究对象,利用PCR产物直接测序及PCR-RFLP技术检测CLPG与MSTN基因的单核苷酸多态性,然后通过SPSS22.0软件GLM统计模型分析多态位点不同基因型及聚合基因型与绵羊生长性状的关联性。测序结果表明,CLPG基因STS序列232bp处检测到C→T突变位点C1,MSTN基因3'UTR区检测到G→A突变位点M1。PCR-RFLP分析显示,C1位点表现为2种基因型:CC和CT;M1位点表现为2种基因型:GG和GA。关联分析表明,C1位点与绵羊背膘厚和眼肌面积显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01),M1位点与绵羊体重、管围、背膘厚和眼肌面积显著或极显著相关(P<0.05;P<0.01)。聚合基因型对体重、背膘厚和眼肌面积影响极显著(P<0.01)。研究揭示CLPG与MSTN基因多态性及其聚合基因型对绵羊生长性状具有显著影响,C1和M1位点可以考虑作为绵羊生长性状的有效遗传标记。     

南江黄羊脂肪型脂肪酸结合蛋白（A-FABP）基因多态性与生长性状关联分析

根据山羊A-FABP mRNA序列设计2对引物扩增南江黄羊A-FABP基因部分外显子3、内含子3和外显子4序列,利用克隆测序的方法寻找南江黄羊A-FABP基因的多态性,采用PCR-RFLP的方法进行多态性检测并与生长性状进行关联性分析。结果显示,在南江黄羊A-FABP基因第3内含子和第4外显子序列上分别发现T143C和T546C2个点突变位点,其中T546C位点为同义突变,这2处突变各自产生3种基因型CC、TC和CC,χ2检验显示,这2个位点均处于中度多态且在南江黄羊群体中分布处于Hardy-Weinberg平衡（P〉0.05）。关联分析显示,T143C位点TC基因型公羊个体的成年胸围显著长于TT型（P〈0.05）;T546C位点CC基因型公羊个体的周岁体长显著长于TT基因型（P〈0.05）,TC基因型母羊个体的6月龄体质量和胸围均显著长于CC基因型（P〈0.05）,其余生长性状在不同基因型个体间差异不显著（P〉0.05）。结果表明：南江黄羊A-FABP基因第3内含子和第4外显子多态性可能对个体生长性状产生一定的影响。     

绵羊FRZB基因InDel检测及其与生长性状的关联分析

本研究以卷曲相关同源蛋白（FRZB）基因作为候选基因,以同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊4个品种共计582只绵羊个体为试验材料,利用琼脂糖凝胶电泳结合DNA测序技术对FRZB基因的InDel进行筛查,旨在寻找与4个品种绵羊生长性状相关的InDel位点。结果表明,绵羊FRZB基因第1内含子上检测到一段14 bp的InDel突变;FRZB基因内含子区InDel突变位点在同羊、小尾寒羊、兰州大尾羊和湖羊群体中均存在II、ID、DD 3种基因型;关联分析表明,FRZB基因中检测到的InDel突变对同羊生长性状有显著影响（P<0.05）,其中II基因型的体长、背高、荐高、距骨宽度、尾长和尾宽在同羊群体中显著优于DD基因型,可以作为候选分子标记用于同羊分子标记辅助选择。这些结果提示,绵羊FRZB基因第1内含子上一个14 bp的插入突变可显著影响同羊生长性状,可以作为绵羊育种中生长性状的潜在分子标记。     

新疆地区绵羊品种TMEM154基因第2外显子G103A位点的多态性分析

绵羊跨膜蛋白154基因(Transmembrane protein 154,TMEM154)多态性与进行性肺炎的易感或抗性有关。本研究以绵羊TEME154基因第2外显子G103A(E35/K35)位点SNP为候选分子标记,利用PCR直接测序法检测TEME154基因型,对该基因在新疆地区8个绵羊品种(阿勒泰羊、哈萨克羊、巴音布鲁克羊、多浪羊、策勒黑羊、巴什拜羊、德国美利奴羊和中国美利奴羊)的遗传多态性进行分析。结果表明:绵羊TMEM154基因在第2外显子103bp处发生了G-A突变,PCR测序共检测到3种基因型;即AA、AG和GG,G103A位点的GG(E35)基因型与绵羊进行性肺炎的高敏感性相关,在阿勒泰羊、哈萨克羊、巴音布鲁克羊、多浪羊、策勒黑羊和巴什拜羊群体中属于优势基因型,而在中国美利奴羊和德国美利奴羊群体中比例较低。方差分析表明,该位点的基因型频率在阿勒泰羊、哈萨克羊、巴音布鲁克羊、多浪羊、策勒黑羊和巴什拜羊等进行性肺炎高敏感群体和中国美利奴羊和德国美利奴羊等低敏感群体间存在显著差异(P0.05)。本研究结果提示,绵羊TMEM154基因第2外显子G103A位点多态性在进行性肺炎高敏感与低敏感的绵羊群体中分布存在较大差异,该SNP可作为一个理想的分子标记应用于绵羊的抗病育种。     

巴什拜羊H-FABP基因遗传多态性及其与生长性状的相关分析

旨在运用分子生物学手段研究H-FABP基因遗传多态性与巴什拜羊生长性状的关系,为今后用分子标记辅助育种方法提高巴什拜羊生长性状提供科学依据。以300只巴什拜周岁母羊为研究对象,选取H-FABP基因外显子2和外显子3的部分片段,采用PCR-SSCP和DNA测序等技术检测其遗传多态性,并与体重、体长、体高等性状进行关联分析,研究H-FABP基因的多态性与巴什拜羊生长性状的关系。结果表明,H-FABP-P_2基因座外显子3无多态性;H-FABP-P_1基因座外显子2存在AA和AG2种基因型,测序结果显示在H-FABP基因外显子2的938bp处发生了A→G碱基突变,为同义突变。经关联分析发现,AG基因型个体的胸围和体重显著高于AA基因型个体(P0.05)。因此,巴什拜羊H-FABP基因外显子2上的点突变可能是影响巴什拜羊生长性状的重要位点。     

绒山羊MARCH1基因InDel位点与体尺性状的关联研究

探究膜相关RING-CH型蛋白1(membrane-associated Ring-CH Protein 1,MARCH1)基因多态能否显著影响内蒙古白绒山羊的生长性状。通过现代分子遗传学技术检测460只内蒙古白绒山羊MARCH1基因启动子区7-bp位点InDel(insertion/deletion)多态性,并利用SPSS 23.0分析软件探究它们与生长性状的相关性。育成羊MARCH1基因启动子7-bp(NC_030813:g.1858696insTAATACG)突变位点DD基因型个体体高均值显著大于ID和II基因型个体(P=0.010),ID基因型个体体长均值显著大于II基因型个体(P=0.036);成年羊该突变位点ID基因型个体管围均值显著大于II基因型个体(P=0.040)。皮尔逊相关分析显示:内蒙古白绒山羊体高、体长和管围与体重性状均存在极显著相关(P0.01)。MARCH1基因启动子区7-bp位点可作为内蒙古白绒山羊体尺性状的有效分子标记。     

BMPR-IB基因对绵羊外周血生殖激素水平的影响

为研究不同BMPR-IB基因型多胎萨福克羊外周血中生殖激素水平的差异,以培育的发情期多胎萨福克母羊为实验对象,应用PCR-RFLP技术检测个体的BMPR-IB基因型,ELISA方法检测绵羊外周血中E2、FSH、LH、PRL和P4的含量,分析BMPR-IB基因型与5种生殖激素水平的相关性.结果表明：多胎萨福克羊群体中存在BMPR-IB基因的BB、B＋和＋＋三种基因型.＋＋基因型个体的平均E2含量和P4含量显著低于B＋基因型和BB基因型个体（P＜0.05）,3种基因型个体间平均FSH含量、LH含量和PRL含量差异均不显著（P＞0.05）.BMPR-IB基因突变导致发情期母羊的雌二醇和孕酮的分泌量增加.研究结果可为合理利用BMPR-IB基因培育多胎肉羊提供依据.     

The incidence of genotypes at codon 171 of the prion protein gene (PRNP) in five breeds of sheep and production traits of ewes associated with those genotypes

Scrapie is one of several transmissible spongiform encephalopathies of livestock. Disease susceptibility is linked to polymorphisms in the normal prion protein gene that encodes the mammalian prion precursor. Codon 171 of this gene is a major determinant of scrapie susceptibility. Selection for arginine (R) at codon 171 is encouraged by the USDA to decrease the incidence of scrapie. Objectives of this study were to determine the frequency of R allele variants at codon 171 in a sample of sheep from five breeds (Columbia, Hampshire, Rambouillet, Suffolk, and Targhee) and western white-faced commercial ewes and to determine whether the R allele is associated with ewe and lamb production traits. Genotyping was performed on 532 ewes and 901 lambs from the University of Wyoming flock, in addition to 820 rams from 52 sheep producers from Wyoming and surrounding areas, using a DNA mismatch assay that discriminated the R allele from others at codon 171. Genotyping was performed by DNA sequencing on 127 rams representing all breeds, except Hampshire from the USDA Sheep Experiment Station at Dubois, ID. The 171R allele was found in all five breeds and in the commercial western white-faced ewes. Genotype frequencies varied (P < 0.001) by breed in ewe and ram populations. Influence of R-allele frequency on ewe lambing records and individual lamb records was analyzed for Columbia (62, 161, 121), Hampshire (89, 193, 162), Rambouillet (87, 179, 133), Suffolk (67, 178, 161), and commercial sheep (227, 463, 324) for numbers of ewes, total number of ewe production records, and individual lamb records, respectively. Suffolk ewes without the R allele (non-R/non-R) gave birth to more (P or= 0.08) by ewe genotype. Lamb birth and weaning weights were not influenced (P >or= 0.12) by lamb genotype in any of the breeds or in the commercial flock. In this population, ultimate lamb production was only influenced by genotype at codon 171 in the Suffolk flock.     

绵羊PRLR基因内含子9和外显子10多态性与产羔数的关系研究

本研究采用PCR-SSCP技术对绵羊催乳素受体（PRLR）基因内含子9和外显子10部分核苷酸多态性及其与小尾寒羊、中国美利奴（新疆型）绵羊多胎品系、肉用品系、体大品系、萨福克、无角陶赛特、中国美利奴（新疆型）和德国肉用美利奴产羔数间的关系进行了分析。结果发现：①在绵羊PRLR基因内含子9的第259 bp处,存在C→T转换,BB基因型的小尾寒羊平均产羔数分别较AA和AB基因型提高0.81和0.87只（P<0.05）;②在绵羊PRLR基因外显子10的第304 bp处存在一个G→A转换,该突变导致PRLR基因第387位氨基酸残基由Glu突变为Lys,并使中国美利奴（新疆型）多胎品系中AB基因型的平均产羔数较AA和BB基因型增加0.58和0.80只（P<0.05）;③在绵羊PRLR基因外显子10第571、585和606 bp处分别存在G→A、C→G和C→T突变;其中前2处突变分别导致PRLR基因的第476位氨基酸由Ala突变为Thr,第480位氨基酸由Ser突变为Arg。其中第571 bp处突变导致小尾寒羊AB基因型的平均窝产羔数显著高于AA基因型的窝产羔数,增加0.8 只（P<0.05）。以上结果提示,PRLR基因可能是控制小尾寒羊和中国美利奴（新疆型）绵羊多胎品系产羔数的主效基因或与之存在紧密的遗传连锁。     

FecB基因对杜寒杂交母羊产羔性能及后代生产性能的影响研究

[目的] 探究FecB基因对杜寒杂交母羊产羔性能及后代生产性能的影响。[方法] 以杜泊羊（♂）和小尾寒羊（♀）杂交羊横交固定母羊群体为研究对象,检测不同横交固定代次母羊的FecB基因,测定并比较不同FecB基因型母羊的产羔性能及后代生产性能指标。[结果] 在杜寒横交固定一代、二代、三代、四代群体中均检测出BB型、B+型、++型3种基因型,横交固定代数越高,群体中纯合型BB基因型频率越高。杜寒横交固定一代、二代、三代BB型母羊的平均产羔数显著（P<0.05）高于相应横交固定代次的B+型母羊,并且随着群体中BB基因型频率的增加,母羊平均产羔数呈升高趋势。杜寒横交固定一代、二代母羊的平均产羔率低于小尾寒羊母羊,而杜寒横交固定三代母羊的平均产羔率高于小尾寒羊母羊以及杜寒横交固定一代、二代母羊。后代初生生产性能方面,BB型杜寒横交固定三代母羊后代的初生重显著（P<0.05）低于B+型杜寒横交固定三代母羊后代,二者的初生体高、体长、胸围差异不显著（P>0.05）;后代断奶生产性能方面,BB型杜寒横交固定三代母羊后代的断奶重、体长、胸围与B+型杜寒横交固定三代母羊后代差异不显著（P>0.05）,体高显著（P<0.05）低于B+型杜寒横交固定三代母羊后代。[结论] FecB基因对杜寒杂交母羊产羔性能影响显著,在多羔母羊选择中具有很大的应用价值。     

藏羊脂联素基因多态性及其与产肉性能的相关性分析

利用高分辨率熔解曲线技术对176头2周岁的甘肃藏羊（欧拉型、甘加型、乔科型）脂联素基因SNPs位点进行检测,运用GLM模型将检测到的SNPs位点与部分胴体及肉质性状的相关性进行了分析.结果表明：在脂联素第2外显子发现＋67G＞C突变使编码氨基酸由谷氨酸突变为谷氨酰胺;GG、GC基因型个体的宰前活重、胴体重均显著高于CC型（P＜0.05）.说明脂联素基因该位点可能是影响藏羊胴体及肉质性状的主效QTL或与之紧密连锁,可作为藏羊高档羊肉生产的候选分子标记.     

白萨福克羊高原过渡期适应性研究

以过渡阶段饲养的27只白萨福克羊为研究对象,分析其生理指标、血液生理生化指标、行为学、生长发育、繁殖性能及抗病性等,研究引入的白萨福克羊在向高原过渡饲养阶段的适应性.结果表明：白萨福克羊的生理指标和血液生理生化指标与我国绵羊相比存在一定差异,在正常波动范围内,红细胞平均容积公母羊之间差异显著（P＜0.05）,其他19项指标公母羊间差异不显著（P＞0.05）;公母羔羊初生重分别为（5.33±1.15） kg和（4.88±0.15） kg,初生至3月龄时生长速度较快,3～9月龄时逐步减慢,公母羊成年体重分别为（88.00±6.36）kg和（62.06±6.40） kg;过渡期间白萨福克羊的产羔率为145％,对疾病抵抗力较强.白萨福克羊适应于过渡饲养阶段的环境,为转运至青藏高原地区饲养提供依据.     

杜蒙杂交母羊的繁殖规律研究

旨在研究杜蒙杂交母羊的繁殖规律。对内蒙古自治区乌兰察布市四子王旗范围内养殖的杜蒙杂交母羊（n=668）的首次发情时间、妊娠期、产羔率、产双羔率等指标数据进行整理;采用公羊试情方法,观察并记录杜蒙杂交母羊（n=302）的发情周期和发情持续时间。对上述指标数据进行分析,探究该地区杜蒙杂交母羊的繁殖规律。结果表明：杜蒙杂交母羊平均首次发情时间为8.5月龄（最早7.0月龄、最晚10.7月龄）,平均发情周期为16.0 d（最短13.5 d、最长18.5 d）,平均发情持续时间为24.0 h（最短20.0 h、最长27.5 h）,平均妊娠期为146.0 d（最短143.0 d、最长149.0 d）,产羔率为119.7%,产双羔率为19.7%。研究结果为掌握杜蒙杂交母羊自然发情规律,以及准确把握最佳配种时间提供了依据。     

杜泊羊与巴彦淖尔多胎羊杂交F1代生产性能的研究

旨在研究杜泊羊与巴彦淖尔多胎羊杂交F₁代的生产性能,为新疆库尔勒地区引进巴彦淖尔多胎羊进行肥羔生产和肉羊杂交利用提供依据。试验比较了2017年与2018年同一饲养管理水平下杜泊羊（父本）与巴彦淖尔多胎羊（母本）杂交后代（杜×巴F₁代）和新疆库尔勒地区本地绵羊自然交配所生产的羔羊（对照组羔羊）之间在生长性能、屠宰性能等方面的差异,同时对巴彦淖尔多胎母羊和当地母羊的繁殖性能进行了对比分析。结果表明,2017年与2018年,杜×巴F₁代羔羊的3月龄及6月龄体重极显著（P<0.01）高于对照组羔羊,日增重显著（P<0.05）高于对照组羔羊;除2018年6月龄杜×巴F₁代羔羊体长、胸宽极显著（P<0.01）高于对照组羔羊外,2017年与2018年6月龄屠宰时杜×巴F₁代羔羊的体高、胸深、胸围、管围等体尺指标均显著（P<0.05）高于对照组羔羊;2017年和2018年,杜×巴F₁代羔羊的胴体重分别比对照组羔羊提高了21.07%和22.90%,差异均极显著（P<0.01）;2017年与2018年,杜×巴F₁代羔羊的净肉重、净肉率极显著（P<0.01）大于对照组羔羊;巴彦淖尔多胎母羊的难产率极显著（P<0.01）高于本地绵羊,羔羊成活率极显著（P<0.01）低于本地绵羊,但其受胎率显著（P<0.05）高于本地绵羊,产羔率、双羔率分别比本地绵羊提高了24.72%和3.41倍,差异均极显著（P<0.01）。综合以上结果可以得出,杜×巴F₁代羔羊的生长性能、屠宰性能均优于对照组羔羊,继承了父本杜泊羊优良的生长发育性能;母本巴彦淖尔多胎羊保持了对环境的良好适应性和多胎性。在该地区引入巴彦淖尔多胎母羊,并与杜泊公羊进行杂交,充分利用杜×巴F₁代羔羊的杂种优势,将明显提高该地区肉羊养殖的经济效益。     

舍饲肉用绵羊同期发情试验

选择神木县畜牧科技示范园种羊场1.5~3岁健康、中等以上膘情的四种繁殖母羊共600只,将其纯种萨福克羊和萨寒、陶细、德细二元杂交肉羊随机分为3个试验组和1个对照组。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用PG、阴道栓＋FSH和阴道栓＋PMSG处理,处理后96 h观察结果表明：Ⅰ组的四种羊同期发情率为：萨福克羊58.3%、德细52.9%、萨寒63.3%、陶细57.5%;Ⅱ组相应为：71.9%、78.1%、83.3%、82.1%;Ⅲ组相应为：85.7%、81.8%、87.1%、81.6%。试验Ⅱ、Ⅲ组处理的母羊发情率均显著高于试验Ⅰ组（P〈0.05）,Ⅱ组和Ⅲ组之间母羊发情率差异不显著（P〉0.05）,试验组综合效果均极显著优于对照组。四种羊以萨寒羊同期发情率最高。三种处理的母羊受胎率差异均不显著（P〉0.05）。