除虫菊愈伤组织诱导研究

以除虫菊种子获得的无菌苗的不同器官为外植体,研究几种基本培养基及NAA、2,4-D或其与BA、KT的组合对愈伤组织的诱导效果,结果表明：不同类型基本培养基中MS有利于子叶、真叶和下胚轴,White有利于根愈伤组织的诱导和生长。不论除虫菊的哪一部分作为外植体,培养基pH值均为5.8较为合适。不同器官外植体诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂组合不同,子叶为1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,真叶为1.0-2.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/LKT,根为0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT,而下胚轴在1.0-2.0mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA,0.5-1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,1.0 mg/L NAA＋0.5 mg/L BA,0.5mg/L NAA＋0.5 mg/L KT,0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT均可100%诱导愈伤组织。     

宿根福禄考组织培养快速繁殖技术

以宿根福禄考茎尖和茎节作外植体进行离体快速繁殖,结果显示：无菌芽诱导的适宜培养基为MS＋1．0mg．L^-1BA＋3％糖＋6．5g·L^-1琼脂粉,茎节在该培养基上无菌芽的诱导率为87．9％;丛芽增殖适宜培养基为MS＋0．5mg．L^-1BA＋3％糖＋6．5g·L^-1琼脂粉,增殖率为6．8;生根的适宜培养基为1／2MS＋0．3mg·L^-1IBA＋0．3mg·L^-1NAA＋2％糖＋6．5g·L^-1琼脂粉,试管苗能在该培养基上分化出良好的根系,生根率达91．7％。     

流苏石斛的离体快速繁殖

以流苏石斛茎段为外植体进行离体快速繁殖研究。结果显示：茎段诱导芽的适宜培养基为MS＋BA2.0mg·L^-1＋NAA0.5mg·L-^1＋CH0.5g·L^-1,芽的诱导率达58.3％;培养基Ms＋BA4.0mg·L^-1＋NAA0.5mg·L^-1＋CH0.5g·L^-1可促进丛芽的形成,而丛芽增殖的适宜培养基为MS＋BA2.0mg·L^-1＋NAA0.2mg·L^-1＋CH0.5g·L^-1,增殖系数达6.23;试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS＋IBA0.5mg·L^-1＋NAA0.5mg·L^-1,50d后试管苗生根率可达100％。研究还发现,壮苗的适宜培养基为1／2 MS＋BA0.5mg·L^-1＋NAA0.1mg·L^-1＋CH0.2g·L^-1,丛芽在该培养基上培养75d后,可同时完成增殖与生根程库。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

辣椒离体再生体系研究

以5个辣椒(Capsicum annuum L．)品种(系)为材料,针对不同基因型、苗龄、外植体种类、激 素组合等因素对辣椒植株离体再生的影响进行了较为系统的研究,从“农城椒2号”、“农城椒3号”、 “0127”、“0159”、“0171”等5个辣椒品种(系)中筛选出“农城椒2号”、“0127”、“0171”3个再生能力 较强的基因型。确定了辣椒离体再生最适外植体为子叶,最适苗龄为12-14d。筛选出高效不定芽分 化培养基(MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 5．0mg/L BA 0．5-1．0mg/L IAA),其不定芽诱导率可达98％。诱导 出的不定芽转入MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 3．0mg/L BA 1．0mg/L IAA 2．0mg/L GA3 10．0mg/L AgNO3 芽伸长培养基,不定芽伸长率最高可达47．1％。不定芽伸长后在MS 3％蔗糖 0．6％琼脂 0．2mg/L I- AA 0．1mg/L NAA生根培养基上诱导不定根。待其长成发达根系后移栽大田成苗,建立了辣椒高效 植株再生体系。     

新疆哈密瓜子叶不定芽诱导与植株再生

分别以皇后和K7-3 2至6日苗龄的不同子叶切块作为外植体,分别在含有1.0,0.4,0.1 mg/L 6-BA的MS培养基上进行继代培养从而获得了完整的再生植株.实验表明采用子叶近胚轴部位是诱导不定芽的最佳部位,4日苗龄是实验进行不定芽诱导的最有利时期,1.0 mg/L 6-BA是诱导不定芽的最佳激素浓度.     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

加工番茄子叶和下胚轴离体植株再生的研究

以加工番茄BO 2和BO 4无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,以M S为基本培养基,研究了不同浓度的ZT,6-BA与不同浓度的IAA组合对外植体芽诱导的影响。结果表明,在不同浓度的ZT和IAA组合中,对2个番茄品种的子叶和下胚轴外植体芽诱导均以M S+1.0 m g/L ZT+0.05 m g/L IAA培养基为最好,BO 2品种子叶和下胚轴的出芽率分别为32.7%和24.5%,BO 4品种的分别为37.3%和28.2%;在不同浓度的6-BA和IAA组合中,诱导BO 2外植体出芽率最高的培养基是M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率分别为27.3%和14.5%;诱导BO 4品种子叶和下胚轴出芽率最高的培养基分别为M S+1.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/LIAA和M S+2.0 m g/L 6-BA+0.2 m g/L IAA,子叶和下胚轴的出芽率均为28.2%;在M S+0.1 m g/L IAA培养基上,加工番茄BO 2再生芽1周左右就能长出根,形成完整的小植株。     

杜仲愈伤组织诱导的研究

采用杜仲优树的幼叶、嫩茎及种子无菌苗的下胚轴、子叶、真叶、根为外植体,以B5和MS为基本培养基,添加1.0mg/LNAA和0.3mg/LBA,进行了不同外植体种类、外植体大小、试验接种方式、外植体采样时间、光照条件、培养基pH值共6种因素对杜仲愈伤组织诱导的影响试验。结果表明,在杜仲愈伤组织诱导中,田间材料幼叶取样时间以3月中旬为好,幼茎的取材时间以4月中旬以前最佳;无菌苗以下胚轴、子叶、真叶诱导效果较好;诱导愈伤组织的培养基pH值以6.3较适宜;培养室的光照条件以12h光照、12h暗培养较有利于愈伤组织诱导;茎段的大小和接种方式以0.7cm长度横放方式诱导效果较好。     

西葫芦双单倍体自交一代离体再生研究

以西葫芦DH12-11409双单倍体植株自交后代种子为试材,研究不同激素组合、外植体类型和苗龄对诱导西葫芦不定芽再生以及不定芽生根的影响。结果表明,取5d龄西葫芦双单倍体黄绿色子叶的子叶节为外植体,在MS+30g/L Suc+8g/L Agar+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA培养基上诱导不定芽效果最好,诱导率高达90.0%,分化系数为8.5;生根培养基则以MS培养基中添加0.05或0.1mg/L NAA为宜;5~6片真叶再生植株经驯化移栽成活率高达90.0%,为再生植株驯化移栽的最佳时期。     

甜瓜黄醉仙子叶再生体系的初步建立

[目的]选出最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织和不定芽的培养基,以及适宜其不定芽伸长和生根的培养基。[方法]以甜瓜黄醉仙子叶为外植体,研究添加不同浓度BA和IAA激素组合的MS培养基对其愈伤组织和不定芽诱导及不定芽伸长的影响,以及添加不同浓度IBA激素组合的MS培养基对其生根的影响。[结果]最适宜诱导甜瓜黄醉仙子叶愈伤组织培养基是MS+0.5 mg/L BA+2.0mg/L IAA和MS+1.0 mg/L BA+2.0 mg/L IAA,最适宜其子叶不定芽诱导的培养基是MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L IAA,不定芽伸长的最适宜培养基是MS+1.0 mg/L IAA,生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L IBA。[结论]初步选出一套完整适宜甜瓜黄醉仙子叶再生体系建立的培养基。     

瓜叶菊'小丑'系列品种再生体系的研究

以瓜叶菊'小丑'系列5个花色品种的种子为外植体,MS为基本培养基,筛选出了瓜叶菊试管培养所需的培养基中最佳生长素种类及浓度,获得了试管苗.在此基础上,对试管苗进行了再生体系的研究.结果表明,不同外植体、生长调节剂种类及浓度均影响植株再生:叶片再生能力优于叶柄;诱导丛生芽效果最好的培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg...     

细叶石仙桃无菌播种与快速繁殖技术研究初报

为解决细叶石仙桃人工栽培种苗短缺问题,以细叶石仙桃蒴果为材料,应用植物组织培养技术,筛选不同阶段所需的最适培养基。结果表明其种子可在MS＋20 g·L^-1蔗糖＋8 g·L^-1琼脂培养基上萌发,发芽率可达70％以上;MS ＋50g·L^-1土豆＋20g·L^-1蔗糖＋8g·L^-1琼脂培养基有利于原球茎分化小苗,低浓度6-BA和NAA组合适合原球茎增殖与芽的分化;在1/2MS ＋0.5 mg·L^-1 NAA＋20 g·L^-1蔗糖＋8 g·L^-1琼脂培养基上生根率达100％,通过以上系列培养基的培养可获得完整植株。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。     

树兰未成熟种子离体快繁技术

以树兰未成熟种子为外植体,研究了原球茎的诱导、增殖、萌芽及生根培养等几个关键步骤的配方。结果表明：树兰种子播种在MS＋BA0．5mg·L^-1。＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1培养基上,7～10d后开始有绿点产生,25d左右就可看见原球茎团;1／2MS＋6-BA1．5mg·L^-1＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖20g·L^-1＋CH2．0g·L^-1的培养基对原球茎增殖的效果最佳,增殖倍数超过9倍;将原球茎转入1／2MS＋NAA0．1mg·L^-1＋6-BA0．2mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的培养基上,原球茎的出芽率超过90％;将芽接种在1／2MS＋NAA0．5mg·L^-1＋BAO．1mg·L^-1＋香蕉泥70g·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的生根培养基中,生根率达94％：以水苔作为移栽基质较理想,移栽成活率可达92．5％,且植株生长健壮。     

正交试验法在牛蒡组织培养中的应用

应用正交设计法研究BA,NAA及蔗糖3个因子对牛蒡(Arctium lappa L．)组培苗的增殖率的影响,同时考察了NAA,BA及不同浓度的Ms培养基3个因子对牛蒡组培苗生根培养的影响,各试验均按正交表L9(3^4)形成3因素、3水平的不同配比。试验结果表明：最佳的增殖培养基是MS BA2．0mg／L NAA0．05mg／L 蔗糖30g／L,最适于生根的培养基是1／2MS BA0．1mg／L NAA0．05mg／L 30g／L蔗糖。     

Study on Agrobacterium-Mediated Transformation of Pepper with Barnase and Cre Gene

This study was designed to control plant fertility by cell lethal gene Barnase expressing at specific developmental stage and in specific tissue of male organ under the control of Cre/lox system, for heterosis breeding of chili pepper (Capsicum annuum L.). Chili pepper inbred lines (A, D, E, and I) were transformed with Cre gene and Barnase gene situated between loxp, separately, by means of Agrobacterium co-culture. In this study, we had established a high transformation system by extensive study of affecting factors including genotype, selection of marker, and lethal dose. Cotyledon with petiole from 9-11-day-old seeding was pre-cultured on media MR [MB (MS mineral+vitamine B5)+BA (6-Benzyladenine) 5.0 mg L-1 +IAA (indoleacetic acid) 1.0 mg L-1 +GA3 (gibberellic acid) 1.0 mg L-1 + sucrose 3% +agar 6.5 g L-1] for 2 d. The explants were infected by Agrobacterium tumefaciens when their OD600 (optical density at 600 nm) reached 0.6-0.9. After co-cultured for 4-5 d on media MC [MB + BA 5.0 mg L-1 + IAA 1.0 mg L-1 + GA3 1.0 mg L-1 + sucrose 3% + agar 6.5 g L-1 + AS (acetosyringone)200 μmol L-1], these cotyledons with petiole were cultured on selective differentiation medium in the media MT [MB medium supplemented with BA [5.0 mg L-1 + IAA 1.0 mg L-1 + GA3 1.0 mg L-1 + AgNO3 5.0 mg L-1 + CW (coconut water) 5% +Km (kanamycin) 65 mg L-1 + Cb (carbenicillin) 500 mg L-1 + 3% sucrose + agar 6.5 g L-1]. The Kmr (kanamycin resistant) bud rosettes were elongated on selective elongation medium and rooted on rooting medium. PCR and Southern blotting analysis of Kmr plantlet indicated that the foreign genes had been integrated into the genome of pepper. The transgenic plants with Cre gene developed well, blossomed out, and set fruit normally. The transgenic plants with Barnase gene grew well with normal appearance of flower, but they showed different fertility from complete sterility, partial sterility to complete fertility, and similar results were obtained from in vitro pollen germination experiments.     

金桔体细胞胚胎诱导的研究

采用金桔无菌苗叶片为外植体,在单因素试验的基础上,通过正交试验研究不同生长调节剂对金桔胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明：MS＋2,4-D2.0mg·L^-1＋BA0.5mg·L^-1处理最适宜金桔胚性愈伤组织诱导,其中淡黄色愈伤组织团块胚胎发生频率较高;在附加BA 0.05 mg·L^-1的MS培养基上淡黄色愈伤组织块可形成胚状体;胚状体试管苗在1/2MS＋NAA0.1 mg · L^-1培养基上,生根率可达80％,移栽成活率达70％     

黑籽南瓜离体再生体系与转基因技术研究

以黑籽南瓜为试验材料,子叶为外植体,建立了黑籽南瓜组织培养再生体系,并对转基因常用的抗生素浓度进行了筛选。试验结果表明：萌发4天的子叶是诱导芽再生的最佳外植体,MS＋1．0mg／LBA是诱导芽再生的最适培养基,1／2MS＋0．5mg／LGA,是适合再生苗壮苗和生根的培养基。100mg／L卡那霉素、50mg／L潮霉素适于南瓜的转基因,初步的转基因研究验证了此转化体系的有效性。     

旋果苣组织培养的研究

以旋果苣(Streptocarpus wendlanddii)的叶、花葶和花蕾为外植体,以MS为基本培养基,研究了组织培养快繁培养基中细胞分裂素和生长素最佳添加量和不同外植体的最佳灭菌时间。结果表明:在以1 g/L HgCl2溶液进行灭菌时,叶片的最佳灭菌时间是4～5 min,花葶、花蕾的最佳灭菌时间是4 min;在用"84"消毒液进行灭菌时,花葶、花蕾的最佳灭菌时间是5 min。愈伤组织诱导和根分化的最佳培养基均为MS+BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L;芽分化的最佳培养基为MS+BA4.0 mg/L+NAA0.2 mg/L;继代培养最佳培养基为MS+BA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L。