鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定

[目的]为研究传染性支气管炎(IBV)的流行变异及其防治奠定基础。[方法]从辉县某大型养鸡场疑似IBV的发病鸡群中采集病料,进行病毒分离和鉴定,并对分离病毒的M基因进行RT!PCR扩增。[结果]从鸡病料中分离到1株IBV,命名为IBV!HN05。经浓度1%胰酶、卵磷脂酶C和10%乙醚处理后,该病毒尿囊液可以凝集鸡、绵羊、人、小鼠和兔的红细胞,而未处理的病毒尿囊液则无此凝集活性。该分离株IBV-HN05和标准毒株IBVM41对NDVLaSota都有抑制作用。该病毒对9日龄鸡胚的致病变率达100%。通过鸡胚矮小试验和动物回归试验,发现该分离株能引起鸡胚和病鸡典型的临床症状和病理变化。PCR扩增结果进一步证实了该分离株为IBV病毒。[结论]该研究为SARS病毒的研究提供了动物模型。     

鸽新城疫病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚从疑似鸽新域疫病鸽群中分离到1株病毒，该病毒株能凝集鸡红细胞，这种凝集作用能被抗新域疫病毒阳性血清抑制。血凝素热稳定指数为1min，具有快速血凝素的解脱率，病毒对氯仿、乙醚、胰蛋白酶、盐酸(pH5.0)敏感，0.1％甲醛溶液能完全灭活病毒。分离株经肌肉注射能使鸽发病和死亡，出现与自然发病鸽一致的症状和病变。对该分离株作进一步生物学特性鉴定，鸡胚平均死亡时间(MDT)为74．6h，1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1．53。结果表明本分离株为强毒型鸽新域疫病毒。     

一种鹅病毒病病原的形态观察和理化特性的测定

为更好地了解鹅病毒病病原的形态和理化特性,用鸡胚尿囊液(EVF4)进行试验：用2种红细胞(1种用甲醛醛化,另1种不醛化)进行吸附和纯化,最终得到EVF4-1和EVF4-2,并用电镜观察,进行血凝和血凝抑制试验,毒力及理化特性测定。结果表明：该病毒形态近似球形,有囊膜,直径大小为120～220nm;其血凝效价从高到低依次为鹅、豚鼠、山羊、牛、兔、猪、鸡、鸭、人的“O”型红细胞,对小白鼠红细胞不凝集;血凝抑制试验时,发现能被相应的血清和鸡新城疫血清所抑制;对ELD50为10^-5.3,鸡胚平均死亡时间为96h;对乙醚、氯仿敏感;胰蛋白酶不敏感;不耐酸,对热较敏感。     

禽传染性支气管炎——肾变病型病毒的分离和初步鉴定

从发病雏鸡的肾脏中分离到一株禽传染性支气管炎——肾变病型〔AvianInfectious Bronchitis(IB)——Nephrosis Form〕病毒。经盲传三代接种鸡胚后,出现典型的侏儒胚病变。该病毒能被乙醚、氯仿灭活,经56℃30分钟后被灭活,但能抵抗 pH2 30分钟。在电子显微镜下,病毒粒子直径为103nm,有19nm 宽的囊膜,囊膜上有典型的球状突起呈花冠状。病毒粒子内部有一典型的马蹄型结构     

3株樱桃谷肉鸭源和2株番鸭源新型鸭呼肠孤病毒的分离与鉴定

[目的]本文旨在对临床表现为肝、脾坏死的病死鸭进行鸭呼肠孤病毒(NDRV)分离与鉴定。[方法]通过接种10日龄鸭胚进行病毒的初步分离培养,结合PCR检测及σC基因序列分析进行分子生物学鉴定。将NDRV分离毒株接种鸡肝癌细胞(LMH)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(CEL),经绒毛尿囊膜接种11日龄樱桃谷肉鸭胚,经腿部肌肉接种4日龄雏樱桃谷肉鸭进行生物学特性鉴定。通过测定NDRV分离毒株对氯仿和胰蛋白酶的敏感性进行理化特性鉴定。[结果]分离到5株新型鸭呼肠孤病毒(NDRV),分别为RPVA1311、RPVA1312、RPVA1313、RPVA1314和RPVA1315。NDRV分离毒株σC基因序列与新型鸭呼肠孤病毒的核苷酸同源性为94%～98%,与禽呼肠孤病毒(ARV)和番鸭呼肠孤病毒(MDRV)相似性较低,分别为38%～41%和40%～50%; NDRV分离毒株能在LMH、CEF和CEL中增殖并产生细胞融合,形成合胞体的细胞病变,2株番鸭源分离病毒的LMH细胞毒滴度(lg[TCID_(50)]:6.32、6.63)明显高于3株樱桃谷肉鸭源病毒的滴度(lg[TCID_(50)]:5.83、5.68、5.63); NDRV分离毒株能100%致死11日龄樱桃谷肉鸭胚,且2株番鸭源分离病毒的鸭胚组织毒滴度(lg[ELD_(50)]:5.50、5.63)稍高于3株樱桃谷肉鸭源病毒的滴度(lg[ELD_(50)]:5.32、5.17、5.00),主要病变表现为全身性出血; 4日龄雏樱桃谷肉鸭接种NDRV分离毒株后,出现与自然发病鸭相似的病症,发病率为100%,同时能从病死鸭的肝、脾中再次分离到原病毒;病死鸭主要病变为脾脏肿大、坏死,组织病理学观察可见脾脏淋巴细胞数量减少、组织细胞坏死,肝细胞变性、炎性细胞在汇管区周围浸润;理化性质测定结果显示,NDRV分离毒株对氯仿不敏感,对胰蛋白酶具有不同程度的敏感性。[结论]分离的5株病毒是属于呼肠孤病毒科正呼肠孤病毒属的一种新型鸭呼肠孤病毒。     

鹅源副粘病毒SF02株的生物学特性研究

研究鹅源副粘病毒SF02株的生物学特性，结果表明：毒株的血凝素热稳定性指数为3min，血凝为快速解脱型；能凝集鸡、鸭、鼠、鸽、鹅、人(O型和A型)的红细胞，对绵羊和山羊的红细胞略凝，不凝集牛和猪的红细胞；病毒SF02株对胰蛋白酶、氯仿、乙醚、pH3．0敏感，二价镁离子对病毒有保护作用；0．0l％的甲醛溶液既能灭活病毒，又能保持较好的抗原活性；鸡胚平均致死时间(MDT)为54h，1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)为1．88；实验感染草鹅、白皇鸽、七彩山鸡、鹧鸪、番鸭等100％发病与死亡，对杂交黄鸡、鹌鹑也有50％以上的致死率，对绿头野鸭则无死亡；这些结果为全面了解病毒的特性提供了一些科学依据。     

禽脑脊髓炎病毒的鉴定

对分离到的AEV毒株进行氯仿、乙醚、温度敏感性试验等理化性质及血凝性质的鉴定,表明该毒株理化件质稳定,无血凝性;电镜下观察接毒鸡胚的超薄切片可看到AEV病毒颗粒,大小在25～30 nm.参照AEV的基因序列设计了一对引物,对该病毒进行了特异性扩增,得到了目的片段.证明该分离病毒为AEV毒株,暂定名为AEV HD.     

禽传染性支气管炎—肾变病型病毒的分离和初步鉴定

从发病雏鸡的肾脏中分离到一株禽传染性支气管炎－肾变病型[Avian Infectious Bronchitis(IB)-Nephrosis Form]病毒。经盲传三代接种鸡胚后，出现典型的侏儒胚病变，该病毒能被乙醚、氯仿来活，经56℃30分钟后被来活，但能抵抗PH2 30分钟，在电子显微镜下，病毒粒子直径为103nm，有19nm宽的囊膜，囊膜上有典型的球状突起呈花冠状，病毒粒子内部有一些型的马蹄型结构。     

牛流行热病毒山东地方株的分离与鉴定

利用BHK-21细胞,接种山东济南地区疑似牛流行热病牛高热期的抗凝血,经盲传3代,分离到1株病毒,经RT-PCR鉴定为牛流行热病毒,命名为BEFV-SD。理化特性试验表明:BEFV-SD对热敏感,56℃10 min、37℃18 h可被灭活,对乙醚、氯仿等敏感;BEFV-SD可被BEFV阳性血清中和,中和效价为1∶408;将BEFV-SD的G基因与GenBank中公布的BEFV进行同源性比较,同源性达到96.3%以上。     

鸡减蛋综合症四原材料病毒的灭活试验研究

经对鸡减蛋综合症（EDS-76）四原材料病毒的最佳灭活时间、最佳灭活温度以及甲醛浓度的试验研究,确定了0.1%甲醛在20℃条件下经过48h灭活病毒为最佳灭活方法,不仅能有效的完全灭活EDS-76病毒,而且能使病毒的血凝活性保持在96%以上。     

仔猪大肠埃希氏菌、C型产气荚膜梭菌的灭活及脱毒方法研究

[目的]研究仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的质量及产品的安全性。[方法]对大肠埃希氏菌和C型产气荚膜梭菌浓缩菌液,用不同浓度甲醛溶液经不同灭活时间、灭活温度进行了灭活和脱毒试验。[结果]大肠埃希氏菌培养物在37～38℃条件下用0.4%的甲醛溶液灭活48h,可以使细菌全部灭活;C型产气荚膜梭菌培养物在37～38℃,采用0.5%～0.8%的甲醛溶液进行灭活和脱毒7～14d,或者采用2次灭活和脱毒方法,7d可以达到完全灭活和脱毒。[结论]在37～38℃条件下,用0.4%的甲醛溶液对大肠埃希氏菌培养物灭活和采用0.5%～0.8%的甲醛溶液对C型产气荚膜梭菌进行灭活和脱毒,可以达到理想效果。     

鲜海带保存方式对褐藻胶含量及黏度的影响

[目的]延长化工用鲜海带使用周期,实现海带的规模化存贮。[方法]将不同尺寸的海带样品保存在浓度2%的甲醛溶液中,考察海带碎块大小以及化学物质的添加对海带中褐藻胶含量和黏度的影响。[结果]在浓度2%的甲醛溶液中,大块海带样品的褐藻胶得率和黏度要明显高于小块海带;化学物质的加入会加速海带中褐藻糖胶、褐藻淀粉等可溶性物质的溶出,化学试剂CaCl2的添加有助于提高保存海带中褐藻胶得率。[结论]建议在规模化海带保存过程中采用大块海带浸醛法（浓度2%甲醛溶液）,以保证海带中褐藻胶的黏度和收率,达到理想的保存效果。     

宁波出口盆栽植物星天牛综合防控措施研究

[目的]应对欧盟对星天牛实施的严格检疫措施,为我国红枫等盆栽植物的出口安全提供技术支持。[方法]在综合分析欧盟有关法规的基础上,结合星天牛生物学特性、药剂熏蒸和浸泡等防治研究,提出了出口盆栽植物星天牛的综合防控措施。[结果]采用40%辛硫磷＋80%敌敌畏乳油500倍液浸泡处理36 h或25 g/L溴氰菊酯500倍液浸泡处理48 h可完全杀死苗木中的星天牛幼虫。[结论]在物理隔离基础上,结合盆栽植物生产过程控制,并配合一定的化学防治措施,可有效防控星天牛,这对有关盆栽植物出口企业有较好的指导作用。     

微波辅助-顶空固相微萃取法分析大叶桉叶片挥发油化学成分

[目的]快速分析贵州产大叶桉叶片中挥发油化学成分。[方法]应用微波辅助-顶空固相微萃取法提取大叶桉叶片挥发油,同时应用气相色谱-质谱法结合色谱保留指数法对化学成分进行定性定量分析。[结果]在大叶桉叶片中确定出35个组分,其相对含量分数占挥发油总质量的98.840%,主要成分是桉油精（35.480%）、[1aR-（1a.α.,4a.α.,7.α.,7a.β.,7b.α.）]-脱氢-1,1,7-三甲基-4-亚甲基-1氢-环丙[e]甘菊环（12.110%）、对-（孟）-1-烯-8-醇（7.966%）、α-蒎烯（6.187%）等组分。[结论]微波辅助-顶空固相微萃取法操作简便、快速,提取时间能够缩短到4.0min,整个分析周期在1.5h内完成,能够应用于植物挥发油化学成分的快速分析。     

啤酒废酵母自溶过程强化研究

[目的]研究啤酒废酵母强化自溶过程,优化强化作用因素。[方法]对影响啤酒废酵母自溶后释放的超氧化物歧化酶(SOD)、氨基酸、葡萄糖内容物含量及SOD的活性提取的各因素进行单因素试验,并设计物理因素正交试验进行各因素参数优化;同时对啤酒酵母自溶后释放的上述活性物质进行添加葡聚糖酶、木瓜蛋白酶促进自溶过程的单因素影响研究,并设计化学因素正交试验进行各因素参数优化。[结果]物化因素影响的正交试验表明,啤酒废酵母自溶过程氨基酸含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量300%、加盐量3%,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量250%、加盐量1%,SOD含量提取的最优组合为pH 5.5、加水量300%、加盐量2%,SOD活性提取的最优组合为pH 5.5、加水量250%,加盐量1%。生化因素影响的正交试验表明,氨基酸含量提取的最优组合为pH 6.0、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4g/kg木瓜蛋白酶,SOD含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+2 g/kg木瓜蛋白酶,SOD活性提取的最优组合为pH 6.5、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶。[结论]在优化的啤酒废酵母自溶过程强化作用各提取物的最优组合条件下,可简化操作过程、降低操作难度,提高酵母菌成分的利用率及其得率。     

玉米蛋白粉的水解条件优化研究(英文)

[目的]探讨玉米蛋白粉水解的最适酶及酶的最佳水解条件,为利用其制备生物活性肽奠定基础。[方法]分别用9种酶对玉米蛋白粉进行水解,采用甲醛滴定法测定水解度,并利用正交试验确定玉米蛋白粉双酶水解的最佳水解条件。[结果]玉米蛋白粉最佳预处理条件为121℃热处理30min。对该预处理后的玉米蛋白粉进行2709碱性蛋白酶和风味蛋白酶双酶水解,在加酶量为4%、水解时间为4h、pH7.0、温度45℃条件下水解度能够达到32.4%。[结论]该结果为制备高F值寡肽、降压肽等生物活性肽的研究奠定了基础,进一步完善了玉米深加工产业链。     

不同品种优质早籼糯酿制绍兴加饭酒试验

[目的]筛选优质早籼糯品种酿制绍兴加饭酒。[方法]采用传统绍兴加饭酒酿制方法和工艺技术,以常规晚粳糯为对照,对越糯6号、越糯05-38、越糯05-53和早粳糯进行绍兴加饭酒酿制试验,筛选出适宜的早籼糯品种。[结果]参试品种酿酒各阶段理化指标正常。清酒品评表明越糯05-38、早粳糯和对照风味好,口味清爽、醇厚,酒体协调,主要理化指标均符合GB17946~2000《绍兴酒(绍兴黄酒)》的标准要求。生产应用表明选用早籼糯米酿酒,可拓宽黄酒原料糯米的市场,有利于提高早稻种粮效益,降低酿酒成本,促进粮食转化。[结论]越糯05-38、早粳糯适合酿制绍兴加饭酒。     

饮用水综合毒性分析

[目的]研究分析饮用水的综合毒性,对慢性毒性物质进行监测。[方法]应用发光细菌法,选用了81.9%低毒性测试模式,通过模拟试验,建立了生活饮用水的生物毒理性基线、研究了甲醛和六价铬对发光细菌的毒性及发光菌试验影响因素,测定样品前排除浊度和色度的影响。[结果]通过建立生物毒理性基线说明发光菌适用于监控水质突发性污染,发光细菌对甲醛和六价铬具有敏感效应,当体系pH在6～8、余氯浓度小于0.2 mg/L时,发光细菌发光度基本稳定。[结论]通过对发光强度的测定可以实现对化学毒性物质水平快速、准确地监测。     

紫花苜蓿叶黄素的提取效果研究

[目的]寻求紫花苜蓿叶黄素的最佳提取条件。[方法]以新疆大叶苜蓿为试材,采用微波炉提取法从紫花苜蓿中提取叶黄素。设置提取溶剂、物料比配方、提取时间及微波炉提取火力4个单因素实验和L9(33)正交实验,研究提取叶黄素的影响因素和提取紫花苜蓿叶黄素的最佳组合。[结果]影响叶黄素提取效果的主要因素有提取溶剂、温度、料液比、火力。对水、乙醇和石油醚3种试剂的提取效果和提取液的OD值进行对比分析表明,石油醚提取液的吸收值最大,说明叶黄素易溶于有机溶剂。选择出提取紫花苜蓿叶黄素的最佳条件为:提取试剂为石油醚、物料比1∶50、提取时间3 min、提取火力30 W。[结论]根据单因素实验结果和L9(33)正交实验分析得到提取紫花苜蓿叶黄素的最佳组合为:火力30 W、时间2 min、物料比1∶50。