温差对铁皮石斛原球茎生长及药用成分的影响

[目的]探讨温差对铁皮石斛原球茎生长及药用成分的影响.[方法]以25℃/13℃为处理温差,恒温25℃/25℃(培养室最常用温度)为对照,昼夜温度设置各12 h,观察和测定铁皮石斛原球茎在0～50 d内的生长情况、生物量、多糖含量、多糖总量、生物碱的变化.[结果]温差有利于铁皮石斛PLBs的增殖、促进生物量增加和多糖积累...     

不同产地沙滩黄芩中黄酮和黄芩苷含量的分析

目的 研究威海地区不同产地的沙滩黄芩中黄酮和黄芩苷含量.方法 以芦丁为对照品,按照紫外可见分光光度法测定总黄酮含量;使用高效液相色谱法测定了黄芩苷含量.结论 威海不同产地沙滩黄芩中黄酮和黄芩苷含量有差别.     

高效液相色谱法测定降糖宁胶囊中黄芪甲苷的含量

目的:测定降糖宁胶囊中黄芪甲苷的含量;方法:采用高效液相色谱法,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流速为1.0 ml/min;蒸发光散射(ELSD800)参数:漂移管温度45℃,载气压力3.00bar。以乙腈—水(30∶70)为流动相,以黄芪甲苷作为对照品,对降糖宁胶囊中黄芪甲苷进行含量测定,并进行了方法学考察,确定了降糖宁胶囊中黄芪甲苷的含量限度。     

高效液相色谱法测定豆粕中染料木素和大豆苷元的含量

采用高效液相色谱法测定豆粕中染料木素和大豆苷元的含量。色谱条件：十八烷基键合硅胶柱;流动相：甲醇-水（6：4）;流速：0．80mL／min;检测波长：260nm。结果本方法操作简便、快速、准确,可用于豆粕中染料木素和大豆苷元的质量控制方法。     

不同光质对铁皮石斛原球茎增殖及有效成分含量的影响

以铁皮石斛的原球茎、无根苗（无根试管苗）、茎段和叶片为材料,研究不同光质条件对铁皮石斛原球茎增殖及4种材料中多糖和生物碱含量的影响。结果表明,在绿光下原球茎的增长率明显低于其他光质,在白光和蓝光下原球茎的增长率较好;在4种材料中,蓝光能促进生物碱的合成,有利于生物碱积累,而红光能促进碳水化合物的积累,有利于多糖含量增加,绿光则不同程度地抑制多糖和生物碱的积累。     

疏骨片中总黄酮和黄芪甲苷的含量测定

目的测定疏骨片中黄芪、杜仲、骨碎补中总黄酮和黄芪甲苷的含量,来确定疏骨片的药用价值。方法采用紫外分光光度法在510 nm处测定总黄酮含量。采用高效液相色谱法,检测器为蒸发光检测器测定黄芪甲苷的含量。结果总黄酮的含量为3 478.85 mg/100g,黄芪甲苷的含量为45.09μg/mL。结论该方法所测定总黄酮和黄芪甲苷的结果稳定性可靠、准确,适用于疏骨片中总黄酮和黄芪甲苷的含量测定。     

不同茶树品种中黄酮苷含量的测定

本研究采用液相质谱技术分离、鉴定了茶叶中的12种黄酮苷类化合物,包括1种芹菜素苷、2种杨梅素苷、5种槲皮素苷和4种山奈酚苷。结合标准品及高效液相色谱系统,测定了8种不同茶树品种中黄酮苷类化合物的含量。结果显示,不同茶树品种中黄酮苷含量分布广泛,以槲皮苷为主。紫芽品种中12种黄酮苷含量最高,达6.12 mg/g;福建水仙品种中含量最低,仅2.31 mg/g,茶树品种间存在显著性差异(P<0.05)。     

HPLC—ELSD测定益气养血口服液中黄芪甲苷的含量

[目的]建立益气养血口服液中黄芪甲苷含量的测定方法、[方法]采用超声提取方法,利用高效液相色谱一蒸发光散射检测器检测,流动相：乙腈一水（35：65）。[结果]黄芪甲苷在4．06～8．12μg范围内呈线性,平均回收率为96．44％,相对标准偏差为1．24％。[结论]由结果证明,本方法简便、准确,可用于该制剂中黄芪甲苷的含量测定及质量控制。     

2种多胺对铁皮石斛瓶内开花的影响

以铁皮石斛无根组培苗为试验材料,研究不同浓度的外源腐胺（Put）和精胺（Spm）对铁皮石斛瓶内开花的影响。结果表明：培养基中添加适量的Put和Spm可提高开花率。当Put浓度为0.4 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为30.47%;Spm浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛瓶内开花率最高,为22.26%;Put浓度为0.2 mg/L时,铁皮石斛始花期最短,为83.33 d,观赏期最长,为43.33 d。Put浓度为0.4 mg/L时,植株可溶性糖和可溶性蛋白含量最高;对照处理下植株全N含量达最高;Spm浓度为0.6 mg/L时,植株C/N比达最大。Put浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗碳氮化合物的积累,可提高铁皮石斛的开花率;Put浓度为0.2 mg/L时,能使花期提前,延长观赏期。Spm浓度为0.4 mg/L时,有利于铁皮石斛组培苗株高增长和生根,促进铁皮石斛组培苗的营养生长。     

HPLC法测定更年灵胶囊中淫羊藿苷的含量

更年灵胶囊中淫羊藿为其君药,我们采用高效液相色谱法对淫羊藿苷进行了含量测定,收到了满意效果。且操作简便,准确,重现性好。     

微波真空干燥对铁皮石斛品质特性影响的研究

本研究以新鲜铁皮石斛为原料,采用微波真空干燥方法干燥,通过测定铁皮石斛的多糖含量、色泽、多酚氧化酶（PPO）、水分分布状态、组成氨基酸以及多酚的DPPH?和?OH清除率,研究微波真空干燥对铁皮石斛品质特性的影响。结果表明：相比于新鲜样品,当微波强度为9 W/g,干燥后样品的多糖含量最高可达52.21%;氨基酸分析仪分析结果表明,微波真空干燥后铁皮石斛的总游离氨基酸和风味氨基酸含量显著提高。在微波强度9 、12 、15 W/g下,微波真空干燥的铁皮石斛的PPO活性分别在干燥16、12、6 min后不再存在,表明微波真空干燥能够在较短时间内钝化铁皮石斛的PPO活性,且微波强度越大时间越短。干燥过程的非酶促褐变主要由Maillard反应引起。低场核磁共振结果表明,自由水驰豫时间T₂₃和A₂₃均显著降低。自由基清除能力研究结果表明,铁皮石斛多酚仍具有较强的羟基自由基清除能力。通过观察干燥后样品的微观结构发现,随着微波功率密度的增大,样品孔状结构受到更严重破坏,微波强度越大,铁皮石斛的复水特性越好。     

铁皮石斛DoAGL6基因及启动子克隆与分析

AGL6基因是MADS-box转录因子家族中的一员,是植物特有的转录调控因子,参与花器官形成,对唇瓣的形成起到关键作用。获得铁皮石斛DoAGL6基因及其启动子,并进行生物信息学分析,对DoAGL6基因启动子进行瞬时表达活性验证,可为进一步研究DoAGL6基因的功能提供参考。本研究克隆DoAGL6基因及其上游的启动子序列,利用在线软件对克隆得到的目的基因序列、启动子序列进行预测,分别构建由全长启动子和5'端缺失启动子驱动GUS的重组表达载体并瞬时转化拟南芥及铁皮石斛原球茎,探究其表达活性。结果表明,成功克隆了DoAGL6基因及其启动子,DoAGL6基因编码区长729 bp,编码243个氨基酸,编码蛋白分子式为C₁₂₁₃H₁₉₅₅N₃₅₉O₃₇₅S₁₂,预测亚细胞定位于细胞核中;保守结构域分析表明,DoAGL6具有保守的MADS-box和K-box两个结构域,属于MADS基因家族MIKC亚家族。启动子序列长度为1891 bp,顺式作用元件分析结果显示,DoAGL6基因启动子中除了核心启动元件TATA-box、CAAT-box外,还有许多其他顺式作用元件,如脱落酸响应元件（ABRE）、光反应顺式调节元件（G-Box）、茉莉酸甲酯响应元件（TGACG-motif）、MADS-box蛋白结合位点（GArG-Box）等。成功构建融合表达载体pCAMBIA1300-A1-promoter::GUS、pCAMBIA1300-A2-promoter::GUS、pCAMBIA1300-A3-promoter::GUS,拟南芥和铁皮石斛原球茎瞬时转化及GUS组织化学染色结果表明,随着启动子5'端缺失片段的增长,GUS活性逐渐降低,启动子活性逐渐减弱,即全长启动子A1（-1891~1）的活性最强,5'端缺失片段A2（-1488~1）次之,A3（-784~1）活性最弱。瞬时转化后的拟南芥和铁皮石斛原球茎GUS染色均呈现蓝色,但与对照相比均较浅,说明全长启动子和2个5'端缺失启动子都具有驱动GUS的活性,但启动活性都比CaMV35S启动子的启动活性弱。     

基于衍生化GC-MS法分析不同栽培基质对铁皮石斛代谢的影响

栽培基质是影响铁皮石斛生长的主要因素之一,本研究拟选用松树皮(PB)、椰糠(CC)和松树皮:椰糠(PC,1:1)的复合基质栽培铁皮石斛,基于代谢组学思路探究栽培基质对铁皮石斛茎生长代谢的影响.通过环刀法测定3种基质的物理性质,利用苯酚-硫酸比色法测定铁皮石斛茎的多糖含量,采用硅烷化衍生化法结合气相色谱-质谱法检测铁皮石...     

水稻淀粉合成对夜温变化的响应

目的 探究夜温变化对水稻淀粉形成的影响及其生理机制【方法】以优质软米浙禾香2号为材料,在灌浆初期设置31℃/20℃ (LT)、31℃/24℃ (NT)、31℃/28℃ (HT)3个夜间温度模式,测定其直链淀粉和支链淀粉含量及合成关键酶活性及相关基因的表达。结果 1)与NT相比,LT和HT处理显著降低粒重和淀粉积累,降低糊化温度和胶稠度,并影响支链淀粉链长,降低支链淀粉含量,提高直链淀粉含量,HT的影响要大于LT;2) LT和HT处理对白天叶片净光合速率的影响不显著,但显著降低籽粒中非结构性碳水化合物积累,抑制蔗糖转运基因OsSUT1、OsSUT2和OsSUT4在夜间和白天表达;3) LT 和HT处理降低夜间和白天蔗糖水解相关酶活性,增加淀粉水解酶活性,导致可溶性糖含量升高,籽粒中糖利用受阻;4)与NT相比,LT和HT处理下腺苷二磷酸葡萄糖含量呈现白天降低而夜晚升高的趋势,腺苷二磷酸葡萄糖积累及利用受到抑制,颗粒结合淀粉合酶活性随处理时间延长而显著降低,且白天酶活性也受夜间温度的影响;5)与NT相比,LT和HT处理降低了夜间支链淀粉合成相关酶活性,抑制了夜间相关基因的表达,导致支链淀粉合成受阻,但对白天酶活及相关基因表达的影响不大。结论 夜间高温对淀粉积累的影响要大于夜温降低,夜间高温/低温抑制全天蔗糖转运及代谢,进而抑制淀粉积累;支链淀粉合成受阻是导致直链淀粉相对含量升高的主要原因,直链淀粉合成相关酶活性(白天)受夜温变化影响,而支链淀粉合成相关酶活性(白天)受夜温变化的影响不显著。     

蝴蝶兰亲环素基因PhCyP的克隆及表达分析

为研究蝴蝶兰对低温胁迫分子调控的机理,采用RT-PCR和RACE方法,从蝴蝶兰叶片中克隆到一个亲环素基因PhCyP（登录号为MH992514）,其基因cDNA全长序列为829 bp,开放阅读框长度为522 bp,编码173 个氨基酸,其编码蛋白含有一个类亲环素（CLD）保守结构域,为碱性亲水性蛋白。系统进化分析显示,蝴蝶兰PhCyP蛋白与兰科植物小兰屿蝴蝶兰、万带兰、深圳拟兰、铁皮石斛等亲环素蛋白亲缘关系较近。转录表达分析表明,PhCyP基因在蝴蝶兰不同发育时期的根、叶、花梗、花器官、子房、种子等组织中有高丰度表达。在13 ℃/8 ℃（昼/夜）温度条件下,PhCyP基因的表达水平先降低,处理6 d时降至最低,随后逐渐升高至恢复培养。在4 ℃低温条件下,PhCyP基因的表达水平升高,在处理4 h升至最高,然后逐渐下降,在处理48 h其表达低于处理前水平。以上结果表明,PhCyP基因参与蝴蝶兰对低温胁迫的响应,且对不同低温胁迫具有不同的分子调控机制。     

高温胁迫下8个绣球品种的生理生化响应

中国南方地区夏季高温是限制绣球在该地区引种栽植与园林应用的重要因素之一,探讨绣球在高温胁迫下生理生化的响应机理,对绣球在特殊立地条件下的应用有重要参考意义.试验以8个绣球品种为材料,利用人工气候箱模拟高温胁迫44℃/33℃(昼/夜)下9项指标的生理生化指标变化.结果表明,高温胁迫下,8个绣球品种的热害指数呈上升趋势,且...     

Response of Rice Starch Synthesis to Night Temperature Changes

【Objective】To clarify the effect of night temperature changes on rice starch accumulation, and to explore circadian changes of physiological characteristics of rice amylose/amylopectin formation at various night temperatures.【Method】High-quality japonica rice ‘Zhehexiang 2’ was subjected to three night temperature gradients of 31℃/20℃ (LT), 31℃/24℃ (NT), and 31℃/28℃ (HT) at the beginning of grain ripening stage, and the amylose and amylopectin contents, the key enzyme activities involved in amylose and amylopectin formation and the expression of related genes were measured at noon and midnight. 【Result】 The results showed that 1) compared with NT, LT and HT treatments significantly reduced grain weight and starch accumulation, LT and HT both reduced amylopectin content and increased amylose content, meanwhile the effect of HT was greater than LT. LT and HT treatments decreased grain pasting temperature and gel consistency, and had a significant influence on branched chain length. 2) The net photosynthetic rate of leaves under LT and HT presented no significant difference compared to NT, but LT and HT significantly reduced the accumulation of non-structural carbohydrates, meanwhile down-regulated the expression level of sucrose transporter genes OsSUT1, OsSUT2, and OsSUT4 both at noon and midnight. 3) LT and HT treatment reduced sucrose hydrolysis-related enzyme activities, meanwhile promoted starch hydrolase activities, resulting in increased soluble sugar contents, sugar utilization in grain was blocked. 4) Compared with NT, the adenosine diphosphate glucose content showed a downward tendency during the day and a rising trend at night under the treatment of LT and HT, which presented that the accumulation and utilization of adenosine diphosphate glucose were inhibited. And the granules bound starch synthetase activity were significantly reduced under LT and HT compared to NT with the prolongation of the treatment, and the enzyme activity at daytime was significantly influenced by temperature changing at night. 5) Compared with NT, LT and HT reduced the activities of night-time amylopectin synthesis-related enzymes and inhibited the expression of night-time related genes, which retarded formation of amylopectin, but the enzyme activities related to amylopectin synthesis was not significantly influenced by night temperature changing. 【Conclusion】High night temperature had a less effect on starch accumulation than low night temperature. High or low night temperature inhibited sucrose transport and metabolism, resulting in declined starch accumulation. The retarding of amylopectin formation was the main reason for the increase of relative content of amylose at high or low night temperature. Night temperature changes directly affected the metabolic process of starch formation at night, but the daytime activities of amylose-related enzymes were affected by night temperature changes, while the daytime activities of amylopectin-related enzymes were not significantly affected by night temperature changes.     

降香黄檀叶枯病菌的鉴定及其生物学特性

近年来,降香黄檀叶枯病的危害越来越严重,为深入了解该病菌特征,本研究对该病原菌进行鉴定,以期为制定更有效的防治措施提供依据。本研究对降香黄檀叶枯病病株进行病原菌分离,并对病原菌进行了形态学观察及rDNA-ITS序列测定,确定该病原菌为天门冬拟茎点霉菌[Phomopsis asparagi (Sacc.) Bubak]。通过观察该病原菌在不同培养基、温度、pH、光照等4种环境因素中的生长情况,发现该病原菌在马铃薯果糖琼脂培养基（PFA）中菌丝生长最快;菌丝在10~30 ℃均能生长,最适宜的生长温度为25~30 ℃;最适宜的pH为6;光照对该病原菌的生长没有显著影响。     

Responses of Photosynthetic Functions to Low Temperature in Flag Leaves of Rice Genotypes at the Milky Stage

The low temperature is one of the major constrains in rice (Oryza sativa L.) production that reduces the grain yield all over the world. In different geographical regions rice varieties often get chilling injury of various degrees and types, especially in the south China, which is double-season rice area in China [1]. Thus, it is crucial to control the abnormal seeding resulting from low temperature and heavy rain [2]. The average temperature of the earth is continuously rising in the past 1…