金鱼草组织培养技术研究

以金鱼草"将军"幼嫩侧芽为外植体,采用不同培养基对不定芽诱导、生根进行研究,以建立金鱼草组培快繁体系。研究结果表明:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂是金鱼草不定芽诱导最佳培养基;1/2MS+NAA0.2mg/L+活性炭300mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂是金鱼草生根最佳培养基。     

光皮桦叶片再生体系的建立

【目的】建立光皮桦叶片高效再生体系,为光皮桦的良种培育及遗传转化研究提供依据。【方法】以光皮桦无菌叶片为外殖体,分别用含0.6 mg/L TDZ 的MS、WPM和1/2MS培养基进行不定芽诱导分化,筛选最佳基本培养基;向筛选出的最佳基本培养基中添加0.05 mg/L NAA及不同质量浓度（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2 mg/L）TDZ的激素组合组成不定芽分化培养基,用于诱导不定芽分化,筛选最佳不定芽诱导分化培养基;以1/2MS培养基为基本培养基,分别附加0,0.05,0.1,0.5,1.0,2.0 mg/L的IBA或0.5,1.0,2.0,3.0 mg/L的NAA组成生根培养基,用于再生苗生根,筛选最佳生根培养基,建立光皮桦叶片再生体系。【结果】光皮桦无菌叶片诱导不定芽的最适基本培养基为MS培养基,其诱导的不定芽最多,且芽生长状况良好,颜色深绿;最适不定芽诱导分化培养基为：MS+TDZ 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上叶片丛生芽诱导率可达到80.00%,平均不定芽数高达12.00个,且芽生长健壮,呈深绿色;最适再生苗生根培养基为：1/2MS+IBA 1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,在该培养基上再生苗的生根率达100%,平均根数为14.5个,平均根长为11 cm,根较粗壮,基部无愈伤组织,且产生了很多毛细根。【结论】建立了光皮桦无菌苗叶片的高效再生体系。     

金线莲原球茎的诱导与快速繁殖

[目的]寻求金线莲原球茎诱导、增殖、分化与生根的最佳培养基及影响原球茎增殖与分化的主要因子。[方法]以金线莲茎段为外植体,MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA、NAAT、DZ和S-3307,对原球茎的诱导、继代增殖、苗的分化、生根等进行研究。[结果]原球茎诱导的最佳培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L,诱导率达93.3%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+S-33071.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系数达9.4;芽分化的最佳培养基为MS+S-33071.5 mg/L+TDZ 0.4 mg/L+NAA 1.5 mg/L+琼脂0.7%,分化率达91.7%;最佳的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.7%,生根系数达4.4;组培苗移栽30 d后,存活率均达93%左右。[结论]S-3307是金线莲原球茎增殖的主要因子,TDZ是原球茎分化的主要因子。     

杂交构树组培快繁体系的建立

通过对杂交构树的组织培养,研究不同的灭菌方法和激素配比对愈伤组织的诱导、芽的增殖、壮苗及生根的影响。结果表明,最佳灭菌剂为0.5%的Hg Cl2,灭菌15 min后除菌率达到68.2%;诱导愈伤组织分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;最佳壮苗培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;移栽的最佳基质为蛭石,移栽后成活率达到88%。     

725杨组培繁殖技术研究

以美洲黑杨725杨树(Populus deltoides cl.‘725’)叶片为材料,对其再生体系的建立及其分化和生根苗对潮霉素B的浓度筛选进行了研究。结果表明,叶片的最佳消毒体系为75%的酒精消毒时间8 s,0.1%的升汞消毒3 min,最佳诱导愈伤的培养基是MS+6-BA 0.2 mg·L-1+2,4-D 1.5 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳诱导分化培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.3 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;适宜的继代增殖培养基为MS+6-BA 0.3 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖25 g·L-1+琼脂6 g·L-1;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg·L-1+IBA 0.7 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+琼脂6 g·L-1;对725杨叶片分化和不定芽生根进行了潮霉素B的敏感性试验,确定叶片分化的临界浓度为2.5 mg·L-1,生根的临界浓度为1.5 mg·L-1。     

皂角的组织培养

为建立皂角的快繁体系,以皂角幼嫩叶片为外植体进行组织培养,研究不同激素配比对愈伤组织诱导、芽的增殖、壮苗及生根的影响。结果表明,诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;发芽生长的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA+0.8%琼脂+3%蔗糖;但皂角生根的最适培养基不明显。皂角幼苗生长一段时间后,叶片及根部逐渐干枯甚至死亡,未能移栽成功,故皂角幼苗的大量繁殖未能完成。今后可以从改变生根培养基中激素浓度配比、抑制生根培养过程中有害物质的释放或去除有害物质等方面进一步研究。     

琉璃苣体外培养技术研究

以琉璃苣茎段、叶片和茎尖为外植体进行体外培养,结果表明,茎尖是琉璃苣进行体外培养的最佳外植体,最适宜培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+ZT 3.0 mg/L+蔗糖30%+琼脂0.6%。并在1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30%+琼脂0.6%上进行继代培养,长势较好。而后转到生根培养基1/2MS+IBA 1.0 mg/L上进行诱导生根。该研究结果表明,利用琉璃苣茎尖进行无性繁殖,扩大种苗栽培是有效的技术方法。     

金边虎尾兰组织培养的研究

以金边虎尾兰(Sansevieria trifasciata var.laurenttii)肉质叶片作为外植体材料,进行组织培养研究。结果发现,金边虎尾兰叶龄与叶片部位对愈伤组织的诱导有影响,其中采用一年生叶片中部的组织诱导率最高;诱导叶片愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导芽分化最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导试管苗生根最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖。     

白鹤芋试管苗丛芽增殖与生根诱导试验

以白鹤芋甜芝、美酒2个品种蘖芽为外植体,在MS 培养基中添加不同种类和浓度的激素,进行组培快繁试验.试验结果表明：MS+IBA 0.25 mg/L+TDZ 0.2 mg/L或6-BA 2 mg/L+IBA 0.5 mg/L为甜芝、美酒适宜芽增殖培养基,最适合甜芝生根诱导培养基：1/2MS+1.5%蔗糖+0.4%琼脂+IBA 0.3 mg/L ,最适合美酒生根诱导培养基：1/2 MS+1.5%蔗糖+0.4%琼脂+IBA 0.1 mg/L.     

石榴新品种“九州红”组织培养及快繁技术研究

[目的]研究石榴新品种"九州红"的组织培养及快繁技术。[方法]以"九州红"石榴当年生新梢茎段为外植体,以MS培养基为基本培养基,研究不同浓度激素配比对"九州红"芽分化、增殖及生根的影响。[结果]"九州红"最佳芽分化培养基为MS+0.8 mg/L6-BA+0.3 mg/L IAA+3.0%蔗糖+1.3%琼脂条,约40 d后可诱导出丛生芽,成芽率达61.2%;在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA+3.0%蔗糖+1.3%琼脂条培养基上丛生芽的增殖速度最快,增殖系数达3.62,且芽生长健壮;"九州红"的最佳生根培养基为1/2MS+0.6 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+3.0%蔗糖+1.3%琼脂条,此时生根率可达91.2%,平均每株生根达3.8条,且植株生长健壮,适于移栽。[结论]该研究为"九州红"石榴种苗的大规模生产提供了技术支持。     

永椿香槐组织培养研究

经过愈伤组织的诱导，不定芽和根系的培养，最终培养形成永椿香槐完整植株．经过筛选，使用新长出的茎段作为外植体培养材料，在Ms 6-BA 1．50 mg／L NAA 0．20 mg／L 3％蔗糖培养基中培养愈伤组织和不定芽，在White IBA 1．00 mg／L 1．5％蔗糖培养基中诱导根突，在 1／2 MS IBA 1.00 mg／L 1.5％蔗糖培养基中培养根，是永椿香槐组织培养最适宜的组合．     

蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究

以残败花梗为外植体进行组织培养,建立了蝴蝶兰的无菌繁殖体系,研究了培养基中不同种类植物生长调节物质及其浓度比例对休眠芽的萌发、丛生芽的诱导以及试管苗生根的影响,筛选出了最佳培养基组成;研究了活性炭、PVP、温度、暗培养对培养基褐化的影响。结果表明:在1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上休眠芽的诱导效果最好,诱导率可达87.5%;在1/2 MS+6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上丛生芽的诱导效果最好,增殖系数可达3.15;在1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭1 000 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上生根效果最好,生根率可达95%,平均每株生根3.11条左右,炼苗后移植成活率可达90%。     

栝蒌雌株快繁技术研究

以栝蒌雌株腋芽为材料,对其诱导培养、丛生苗增殖培养及生根培养等方面进行研究。结果表明:MS+6-BA 1.5 mg/L最适合诱导栝蒌茎段腋芽形成;MS+GA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L为最佳继代增殖培养基;1/2MS+NAA 1.0 mg/L为最佳生根培养基。     

蓬莱松组培无菌体系的建立

为了建立蓬莱松组培无菌体系,比较了不同消毒时间、外植体类型、启动和继代培养基配方等对蓬莱松无菌体系建立的影响。结果表明,外植体宜选用蓬莱松幼嫩的茎段,采用0.1%升汞消毒8 -10min即可；启动培养基配方为MS + 6-BA 0.5mg/L + IBA1.0mg/L + 蔗糖30g/L + 琼脂4.5g/L,其腋芽诱导率可达60%。继代培养基最适配方为MS + 6-BA 0.6mg/L + IBA1.0mg/L + 蔗糖30g/L + 琼脂4.5g/L,启动培养基上诱导出的芽可在该培养基上正常生长,培养90天后,可形成丛生芽。组培无菌体系的建立可为后续蓬莱松组培快繁体系的完善提供前期基础。     

二球悬铃木的组织培养和体外植株再生研究

以秋季休眠的二球悬铃木枝条的单芽茎段为外植体,接种于MS培养基上。结果表明：MS＋6-BA0.5mg/L＋IBA0.25mg/L（附加0.6%琼脂＋3%蔗糖）最有利于诱导出不定芽,丛生芽诱导期培养温度为28±1℃。MS＋IBA0.25mg/L＋NAA0.1mg/L（各附加0.6%琼脂＋2.7%蔗糖）诱导生根效果相对较好。不定根诱导期培养温度为26±1℃;光照度500～1000lx,光照时间6h/d。     

荞麦子叶节再生体系的建立

实验以荞麦子叶节为研究对象,摸索其再生所需的最适条件,建立荞麦的再生体系,为荞麦的转基因研究奠定基础.实验结果表明：种子萌发条件为去掉外种皮的种子用0.1％升汞灭菌1min,30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉的固体培养基培养.子叶节诱导生芽最适培养基为MS＋2.5mg/L6-BA＋0.05mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉,芽诱导生根的培养基为1/4MS ＋6-BA （2.0mg/L） ＋NAA （0.05mg/L） ＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉.     

薰衣草离体培养技术研究

以薰衣草(Lavandula angustifolia)带芽茎段或顶芽为外植体,探讨不同激素种类与水平等对其愈伤诱导、不定芽增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质。结果表明薰衣草离体培养适宜的培养基分别为,不定芽启动培养基,MS+BA 1.0～2.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;继代增殖培养基,MS+BA 1.0～2.0 mg/L+IBA 0.25 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L;生根培养基,White+IBA0.4 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L或White+NAA 0.8 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。以等体积的泥炭与珍珠岩混合后作为基质驯苗,幼苗成活率可达96.9%。     

罗汉果子叶高效再生体系的建立

以无菌萌发罗汉果子叶为外植体,进行罗汉果高效离体再生体系的研究。探讨了不同MS、琼脂含量、不同激素浓度配比、种子萌发时间和活性炭在罗汉果种子萌发、子叶诱导不定芽及试管苗生根方面的影响。结果表明：1／4 MS、0．5％-0．6％的琼脂含量比较适合罗汉果种子萌发,萌发率达89．2％;降低无机盐和蔗糖浓度有利于罗汉果试管苗的生根;最适生根培养基为1／2 MS＋IBA0．5mg／L＋1．5％蔗糖;罗汉果子叶直接诱导不定芽最适合培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋IBA0．1mg／L,分化率达94．8％,平均每块子叶出芽10个;培养基中添加低浓度（0．2％）活性炭有利于生根,但不利于子叶不定芽的诱导;子叶不定芽的分化率还受种子萌发时间的影响,萌发时间以2—4d为宜;试管苗经过炼苗2～4d能极大提高移栽成活率,达91．7％。     

金柑组织培养与快速繁殖体系的建立

为了建立金柑(Fortunella japonica (Thunb.) Swingle)组织培养与快速繁殖体系,本研究以金柑胚根、子叶、茎段、叶片等不同外植体为材料,采用器官发生型以及短枝扦插型为主要培养途径,进行金柑的组织培养,研究不同浓度的植物生长调节剂对金柑快速繁殖体系建立的影响以及愈伤组织诱导和分化的最适条件,筛选出诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体与最适培养基。研究结果表明,金柑诱导愈伤组织形成不定芽的最佳外植体为幼嫩的茎段,诱导金柑子叶形成愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA +1.0 mg/L NAA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂,诱导子叶愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+3% 蔗糖+0.7% 琼脂。由此证明上述组织培养途径是可行的。     

不同培养基对秦党叶片及茎段培养的效应研究

试验研究了不同培养基对秦党叶片及茎段培养的效应。结果表明,在光照强度1600 lx,温度25℃的条件下,利用组织培养技术快速繁殖秦党时,适宜的外植体为幼苗的茎段。茎段培养时,诱导愈伤组织并促进分化的适宜培养基组分为:MS+2,4-D 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。仅促进芽生长适宜的培养基组分为:MS+BA2.0 mg/L+IAA1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。仅诱导愈伤组织适宜的培养基组分为:MS+BA1.0 mg/L+IAA1.0 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂8 g/L。