培养液中不同浓度肝素对蓝狐精子体外获能的影响

采用上游法分离优化精子,以mTyrod's液作为基础培养液检测培养液中不同质量浓度肝素对蓝狐精子体外获能的影响,试验设4个肝素质量浓度:0,10,20,50 μg/mL,38.5℃、5%C02培养箱进行孵育,获能培养时间为6h.利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率,观测法检测精子活力...     

酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布

为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前35%增至获能1.5 h时的88%,酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。     

二甲基亚砜对蓝狐精子活率和体外获能的影响

DMSO是一种有机溶剂,影响精子体外获能的孕酮、肝素、钙离子载体多溶于此溶剂,因此确定蓝狐精子最适合的DMSO浓度及其作用时间是十分必要的.试验将分离、优化的蓝狐精子置于BO液中,在38.5 ℃、5%CO2培养箱中进行获能培养,然后分别在6个浓度(0%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、2.0%)的DMSO中和4个时间(15分钟、30分钟、60分钟、120分钟)进行考马斯亮蓝染色和伊红-苯胺黑染色,检测并统计精子顶体反应率、精子活率,利用SPSS11.0统计分析软件分析试验数据.试验结果显示:蓝狐精子在DMSO浓度为0.2%和120分钟时体外获能效果最好.     

咖啡因对马鹿精子体外获能作用的研究

为研究不同浓度咖啡因对马鹿精子体外获能的作用,取健康马鹿冻精,分别以0、1.0、2.5、5.0、10.0 mmol/L咖啡因处理液作用精子,在孵育0、15、30、60、120、240 min的各个时间点取样,观察精子活力,并用考马斯亮蓝染色法检测各组精子的顶体反应(AR)。结果表明:咖啡因浓度为5.0 mmol/L时精子活力最高(80.19±0.52%),马鹿精子顶体反应率最高(61.94±1.50%),与对照组相比差异极显著(P<0.01),咖啡因作用30 min时各组的顶体反应率达到最高值。     

不同培养液对蓝狐精子体外获能效果的比较试验

采用上游法分离优化精子,用mTyrod’s液(T)、BO液(B)以及高渗液(HIS)3种不同培养液,在5%CO2的培养箱中进行获能培养,获能培养时间为6h。利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率以及观测法检测精子活力。在培养的0、1、2、4、6h时分别检测上述指标并统计分析,从而筛选出适合蓝狐精子体外获能的培养液。结果显示:B培养液优于T、HIS培养液,最佳获能培养时间t≥6h;HIS可以提高精子顶体反应率,但较高的渗透压不利于精子保存,不建议使用。     

不同种、品种牛精子长度的研究

通过染色固定，用显微镜、目尺测定不同种、品种牛精子的总长、头长及头宽，比较黄牛、肉牛、奶牛及水牛精子的长度差异。测定结果精子的总长黄牛为74．62μm，肉牛为72．37μm．奶牛为72．48μm，而水牛为64．84μm。黄牛、肉牛、奶牛精子的总长与水牛精子总长相比差异都极显著，而黄牛、肉牛、奶牛之间没有多少差异。     

肝素浓度对辽宁绒山羊精子体外获能的影响

在TALP液中添加不同浓度(25、50、100μg/mL)的肝素对辽宁绒山羊精子进行获能处理,在显微镜下检测处理1、2、3、4、5h后的精子活力,用考马斯亮蓝染色法检测获能处理0.5、1、2、4h后的精子获能状况,探讨肝素浓度对绒山羊精子活力、存活时间、获能率的影响。结果发现,在38.5℃、5%CO2、饱和湿度条件下,精子活力随肝素浓度升高而下降,3 h以后25μg/mL肝素组精子活力显著高于其它肝素组(P<0.05)。添加肝素组获能率显著高于对照组(P<0.05),各肝素组精子获能率差异不显著(P>0.05)。对照组精子存活时间最长,25μg/mL肝素组精子存活时间为10.12 h,显著高于其它两组(P<0.05)。表明25μg/mL肝素处理辽宁绒山羊精子体外获能较为适宜。     

不同来源的牛皮肤成纤维细胞原代培养效果对核移殖胚发育的影响

培养延边黄牛不同部位(耳部和腹部)和不同品种(黑白花、利木赞、延边黄牛)耳部的皮肤成纤维细胞,观察原代培养效果并用其核移植,探讨原代培养效果与囊胚发育率的关系。以组织块贴壁率、组织块发育率、组织块的细胞贴壁率作为原代培养效果的衡量标准;传3～5代后进行核移植,分别统计囊胚发育率。结果表明:延边黄牛腹部皮肤的生长效果明显好于耳部皮肤,并且囊胚发育率高于耳部皮肤。利木赞牛皮肤生长效果明显好于延边黄牛和黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。与之对应,利木赞囊胚发育率显著高于延边黄牛与黑白花,延边黄牛与黑白花差异不显著。     

家畜精(子)细胞染色方法的比较与评价

为进一步提高家畜精子形态检验的科学性和客观性,本文结合种公畜精液生产和质量检验,对精子形态的检验应用姬姆萨染色法、考马斯亮蓝染色法和伊红—苯胺黑染色法进行了比较、分析。结果表明,三种方法中姬姆萨染色法对精子细胞的染色效果最好,可视精液质量检验的不同要求选择不同方法。     

豆粕蛋白溶解度与肉仔鸡生产性能关系的研究

本实验以未经加热的生豆粕为原料，用高压蒸锅在１０８℃、２４０Ｐａ压力下处理０、１２、２０分钟，以及在１２１℃、７２０Ｐａ压力下处理５、２０、４０、６０分钟，加上生豆粕共得到８种不同加热程度的豆粕，进行脲酶活性（ｐＨ增值法、ＩＳＯ法）、蛋白溶解度（ＰＳ）、考马斯亮蓝值（Ｃｏｏｍａｓｉｅ）、可利用赖氨酸（ＤＢＬ）测定。用上述８种不同加热程度的豆粕按等能等蛋白原则配成８种生产型日粮，用１日龄的ＡＡ公雏进行了４周的饲养实验，饲养实验采用随机区组设计。试验结果表明，在本实验的蛋白和赖氨酸水平下，蛋白溶解度在５６３６％至８０６１％之间、考马斯亮蓝值在３６１９％至５３３０％的豆粕在体增重、饲料效率、进食量上差异不显著。过生或过熟的豆粕都降低肉仔鸡的生产性能。蛋白溶解度和考马斯亮蓝值是评价豆粕加热程度的可信指标。如蛋白溶解度在６０％～８０％之间、考马斯亮蓝值在３５％～５５％之间，则表明加热适度。     

利用EP218增重剂促进延边黄牛幼牛放牧期增重的试验研究

前言放牧育肥技术是近年来国内外在养牛业上广泛应用的一种生产技术。放牧育肥能充分利用草原,以降低饲养成本,提高经济效益。延边黄牛是我国著名的地方良种之一,它不仅具有很高的役用性能,而且肉质柔软多汁,鲜美适口。为了探讨 EP218增重剂在我州放牧饲养条件下,对延边黄牛幼牛的增重效果,我们从1990年4月18日至7月17日期间,在龙井市朝阳川镇吉成村和龙浦村进行了增重试验,取得了显著效果。     

精子活率与精子完整率和质膜完整率的相关性分析

采用考马斯亮蓝（R250）染色法和低渗膨胀试验（HOST试验）检测精子顶体反应和质膜完整性,以检测和评价这2种方法在猪精液质量检测中的实际应用价值。结果表明,冷冻复苏后,精子活率为37.97%,精子平均速度为55.72μm/s,顶体完整率和质膜完整率分别为51.01%和39.95%。经相关性分析得出,猪精子顶体反应率和质膜完整性与精子活率相关系数为0.904 0和0.817 6,呈显著相关（P〈0.01）,而精子的平均游动速度与顶体反应率和质膜完整性相关系数为-0.056 2和-0.151 8,无明显相关性（P〉0.05）,精子活率与精子平均游动速度间也无明显相关性（P〉0.05）。     

浅谈延边州肉牛生产的现状与出路

一、生产现状清道光年间(1820——1850年)及至清末,随着朝鲜人的不断涌入,也把朝鲜牛带进延边。后经朝鲜族人民的辛勤培育,发展成为延边黄牛役用牛。其后,人们逐渐发现延边黄牛的肉质鲜美,只是产肉量低,纤维含量高。于是,便开始了延边黄牛的役、肉牛培育工作。下面从四个方面来看一下肉牛生产的现状。     

酵母源生物饲料蛋白质含量检测方法评估

酵母源生物饲料是以酵母为载体,依托现代生物技术,运用微生物发酵和酶解工艺,而获得的具有特定功能和营养性的饲料和饲料添加剂产品。本试验分别采用了凯氏定氮法、Folin-酚法和考马斯亮蓝法对饲用高活性干酵母、酵母细胞壁多糖和复合酵母进行蛋白质含量的测定。     

不同稀释液对蓝狐精子低温保存的影响

为探讨行之有效的精液保存方法,提高狐人工授精技术的效率,用4种稀释液对4只公蓝狐精液进行体外低温保存,采用伊红-苯胺黑法检测精子活率,低渗肿胀法检测精子质膜的完整性,考马斯亮蓝染色法检测精子的顶体状态。结果表明:低温保存时精子的活率、质膜的完整性、顶体的完整性明显比常温保存时比率高;氨基乙酸稀释液对精子的保存效果优于其他3种稀释液,精子活率为(63.62±2.47)%,质膜完整性为(57.00±3.17)%,顶体完整性为(65.30±2.48)%。     

黄牛规模化移植荷斯坦牛性控冻胚技术的研究

为了廉价地规模化快速繁殖荷斯坦母牛,试验将本地母黄牛作为受体,对屠宰的荷斯坦母牛卵巢中卵母细胞经体外成熟培养、体外X精子受精、冷冻性控胚胎、解冻及移植,使母黄牛受孕而繁殖.结果表明:受体母黄牛1 645头,妊娠率为40％,雌性率为95％,死亡率为1.1％,难产率为8％.     

黄牛规模化移植荷斯坦牛性控冻胚技术的研究

为了廉价地规模化快速繁殖荷斯坦母牛,试验将本地母黄牛作为受体,对屠宰的荷斯坦母牛卵巢中卵母细胞经体外成熟培养、体外X精子受精、冷冻性控胚胎、解冻及移植,使母黄牛受孕而繁殖。结果表明:受体母黄牛1 645头,妊娠率为40%,雌性率为95%,死亡率为1.1%,难产率为8%。     

延边黄牛与韩延F1育成牛血液指标分析

选择体重、年龄相近的延边黄牛育成牛与韩延F1育成牛各12头,公母各半,分析测定了其血液指标并进行了对比研究.结果表明:韩延F1公、母牛的血清总蛋白、清蛋白、钙、磷、葡萄糖、GPT、GOT等含量均高于延边黄牛,但差异不显著(P＞0.05);而韩延F1公、母牛的血清总酯含量显著高于延边黄牛(P＜0.05);韩延一代牛的血清尿素氮含量小于延边黄牛,差异不显著(P＞0.05).     

延边黄牛白细胞介素18基因的克隆及序列分析

本试验旨在扩增延边黄牛白细胞介素18(IL-18)全长cDNA,并对其序列进行进化分析。根据GenBank中已公布的牛IL-18 cDNA序列设计1对引物,利用RT-PCR从刀豆蛋白(ConA)和植物分裂素(PHA)双重刺激36 h活化的延边黄牛脾淋巴细胞中扩增出牛IL-18全长cDNA,进行PCR、酶切和测序鉴定,并做进化分析及二级结构预测。扩增出延边黄牛IL-18全长cDNA,大小为760 bp,其中有两个氨基酸突变。进化分析结果显示,延边黄牛IL-18与牛、山羊、绵羊、马和猪的同源性较高,均大于90%,与同种群牛的同源性最高,而与原鸡的同源性最低,为51.1%。本研究确定了IL-18的种群差异,并预测了二级结构特性,为进一步研究延边黄牛IL-18的基因表达、生物活性及其作为佐剂的应用奠定了基础。     

获能处理对猪精子质量及泛素对顶体酶抑制剂水平调控的影响

【目的】探究猪精子体外获能前后顶体酶抑制剂(AI)表达量以及AI的泛素化水平的变化,了解AI与泛素-蛋白酶体系统(UPS)间的联系,为深入研究泛素-蛋白酶体途径(UPP)在猪精子获能过程中的作用提供参考。【方法】选择18～24月龄的成年健康长白公猪,使用手握法采集公猪精液,将一部分精子进行获能处理,一部分作为对照(鲜精),使用计算机辅助精子分析系统(CASA)、低渗肿胀法(HOST)、考马斯亮蓝染色、Western blotting和锌离子(Zn²⁺)标记检测获能前后精子的动力学参数、质量参数、酪氨酸磷酸化水平和Zn²⁺含量;Western blotting检测获能前后精子中AI和泛素(Ub)的表达量;免疫荧光法检测AI和Ub在精子中的定位;免疫共沉淀分析AI和Ub的结合情况。【结果】与新鲜精子相比,获能精子动力学参数VSL和BCF极显著升高(P<0.01),获能精子的活力、质膜完整性、顶体膜完整性、活率均极显著降低(P<0.01);获能精子蛋白酪氨酸磷酸化水平极显著升高(P<0.01),Zn²⁺极显著...