牛活体采卵技术研究进展

应用活体采卵技术可以从活体母牛反复采集大量系谱明确的卵母细胞,用于胚胎的体外化生产。本文将对牛活体采卵技术的研究进展和操作方法进行综述,分析影响活体采卵效果的因素和存在问题,并论述活体采卵在家畜育种和胚胎生物技术等方面的应用前景。     

影响水牛活体采卵效果的因素分析

水牛活体采卵是继水牛体外受精(IVF)、胚胎移植(ET)等技术之后推出的一项良种胚胎产业化生产的关键技术。本文叙述了水牛活体采卵技术在水牛繁殖中的应用概况,并分析了影响水牛活体采卵回收效果和胚胎生产的各项因素。这套技术可以充分挖掘优良母水牛的繁殖潜力,缩短世代间隔,加速育种进程,同时也能为水牛的胚胎生物工程、基因工程等研究提供大量的试验材料,从而促进水牛科学研究和相关产业的持续发展。     

活体采卵(LOPU)技术及在动物育种中的应用

活体采卵（Laparoscopic ovum pick-up，LOPU）是继动物体外受精、胚胎移植技术之后应运而生的一项胚胎工程技术，目前在一些畜牧业发达的国家，如日本、加拿大、美国、荷兰均已实现商业化生产.采用活体采卵（LOPU）-卵母细胞体外受精（IVF）-胚胎移植（ET）配套技术，可以克服传统的胚胎体外生产和胚胎移植技术存在的一些缺点，大大降低优质胚胎的生产成本，在动物育种上表现了广泛的应用前景。     

羊活体采卵技术研究进展

随着羊胚胎生物技术的发展,尤其是胚胎体外生产、转基因的研究,科研生产中对卵母细胞的需求越来越大。传统的从屠宰场卵巢获得卵母细胞有许多不足,因此,发展活体采卵技术显得迫切。国内有关羊活体采卵的报道较少,文章介绍了羊活体采卵方法的基础分析影响活体采卵效率的各种因素。     

牛活体采卵技术的研究进展

牛活体采卵是继牛体外受精（IVF）、胚胎移植（ET）技术之后推出的一项新的胚胎工程技术。文章就目前牛活体采卵技术最新进展及其几种常用方法的使用效果进行了阐述,综述了影响牛活体采卵效果的因素,最后对牛活体采卵技术的前景作了展望。     

影响牛非手术法活体采卵效果因素的分析

利用非手术法活体采卵技术结合体外受精技术和胚胎移植技术,能够更大限度的发挥良种母牛的繁殖潜力,并能够用于患有生殖道疾病良种母牛的扩繁,使良种资源得以充分利用;通过活体采卵技术还可以为核移植、转基因、胚胎干细胞移植等生物工程技术提供必要的材料。本文综述了年龄、发情周期、非手术法活体采卵方法等五个方面对牛非手术法活体采卵效果的影响,为探索更加有效的活体采卵程序和方法,提高非手术法活体采卵的生产效率提供依据。     

通过活体采卵(OPU)的方法来进行牛体外胚胎生产的研究

近年来，体外胚胎生产的技术日益提高，尤其是在牛上应用比较广泛，在1988年由体外生产的胚胎最后可移植到受体的数目达到30000枚，靠超声波引导从活体上采集卵母细胞（OPU）进行体外胚胎的生产的方法现在被广泛采用，这种方法可以使活体持续性的生产胚胎，大大地提高了繁殖效率。且活体采卵是一项非常灵活、方便的技术，通常1周可以采集2次，连续许多周，都不影响供体的繁殖潜力，通常依靠活全采卵的方法（OPU）所获得的平均每8～10个卵母细胞中就可生产出2枚可移植的胚胎，从而提高了胚胎的生产效率，缩短了世代间隔，而且用活体采卵的方法（OPU）所生产的胚胎质量也要好于屠宰的卵巢上所获得的卵母细胞生产的胚胎。目前，这种方法除在牛上应用外、也在其它动物如水牛，马上采用。     

牛活体采集卵母细胞技术研究进展

活体采卵是良种胚胎产业化生产的关键技术，具有生产胚胎成本低、效率高，对供体母畜生产和繁殖性能无不良影响的特点。本文综述了牛活体采卵方法、影响采卵效果因素及存在问题等方面内容，并对其前景做了展望。     

影响牛活体采卵效果因素的研究进展

利用活体采卵技术可以连续采卵数周，每周两次，而不影响供体的正常生产，而且几乎在任何体况下都可以采卵，因此，活体采卵是目前唯一一种可以替代超数排卵的技术。目前活体采卵主要用于牛，在羊、马、水牛等体型较大的家畜也有应用，但应用相对较少，在这以牛为例总结一下影响活体采卵的各种因素，主要包括以下四个方面。     

雪龙黑牛活体采卵与屠宰采卵在体外受精技术中的应用研究

利用超声波活体采卵技术(ovum pick-up,OPU)对12头纯种雪龙黑牛间隔4d采卵2次,对51头F2代遗传性能优秀的雪龙黑牛每周采卵1次,并对活体采卵与屠宰采卵及体外受精后胚胎的发育进行了对比分析.结果表明,活体采卵第2次卵泡数比第1次多82个,而获得的卵母细胞数第2次比第1次少1 2枚;屠宰采卵优秀卵母细胞率高于活体采卵,并且囊胚发育率高于活体采卵.     

牛活体采集卵母细胞技术研究进展

活体采卵是良种胚胎产业化生产的关键技术,具有生产胚胎成本低、效率高,对供体母畜生产和繁殖性能无不良影响等特点,本文综述了牛活体采卵方法、影响采卵效果因素及存在问题等方面的研究进展,对当前肉牛、奶牛发展具有重要指导意义。     

体外胚胎生产技术在国内肉羊快繁中的应用分析

为了进一步提升活体采卵和体外受精技术(OPU-IVF)在肉羊商业化快繁的作用，明确今后研发方向和商业化模式，本研究以国内代表性体外胚胎工厂化生产基地为对象，对2019—2021年基地肉羊体外胚胎生产的部分数据和应用效果及其与高校、科研院所的产学研合作情况进行了分析与总结。结果表明：2019—2021年黑头萨福克、黑头杜泊等优质品种肉羊胚胎生产规模持续扩大，生产效率明显提升；不同品种之间的采卵效率、卵子受精后的发育效率差异明显；腹腔镜法的整体效率比手术法更具优势，并可缩短采卵间隔，从而提高体外胚胎生产效率。以上结果说明，通过技术研发，近年来国内肉羊体外胚胎生产规模和技术水平发展迅速，使我国在国际上率先实现了肉羊OPU-IVF技术的大规模商业应用。     

奶牛活体采卵-体外受精效率的影响因素研究

为建立稳定高效的活体采卵-体外受精技术体系,提高体外胚胎生产效率,本研究先利用屠宰场采集的新鲜卵巢卵母细胞进行体外受精,通过胚胎发育潜力来筛选最佳的体外胚胎培养液;再进一步研究不同种公牛精液和供卵母牛对活体采卵-体外受精效率的影响。结果显示,CR1aa培养液和mCR1aa培养液卵裂率差异不显著（P>0.05）,但mCR1aa组的囊胚发育率显著提高（28.1% vs 20.6%,P<0.05）;选取的3头荷斯坦种公牛精液的活体采卵-体外受精胚胎的卵裂率差异不显著（P>0.05）,但1号种公牛精液体外受精后囊胚率（38.7%）显著高于2号和3号（23.8%&22.9%）（P<0.05）;随机选择的3头活体采卵供体母牛（H1、H2、H3）获得的头均可用卵母细胞数无显著差异,但H1和H2供体母牛体外受精胚胎的卵裂率和囊胚率均显著高于H3供体牛（P<0.05）,且H1供体牛体外受精囊胚率显著高于H2供体牛（P<0.05）。结果表明,mCR1aa培养液能显著提高体外受精囊胚发育率,适用于体外胚胎生产;种公牛精液和供体母牛个体差异会直接影响活体采卵-体外受精胚胎的生产效率,为奶牛活体采卵-体外受精生产技术体系的优化提供参考。     

采卵间隔时间对山羊活体采卵效果的影响

目前从离体卵巢采集卵母细胞是体外受精研究所需卵母细胞的主要来源之一.一般是从屠宰场采集母畜的卵巢,抽取卵巢上的卵母细胞.但我国缺乏良种羊的卵巢资源,故所采卵母细胞种质一般较差,而且其系谱不明.而活体采卵技术(Ovum Pick-up OPU)正是解决当前我国体外受精研究中存在的卵母细胞资源缺乏、系谱不明等问题的有效手段.羊的活体采卵主要有三种方法:常规手术法、B型超声波法和腹腔镜法.腹腔镜法活体采卵(Laparoscopic Ovum Pick-up LOPU)操作相对简便,对羊的伤害较小,可重复采卵;而常规手术法对羊的伤害较大,较难重复采卵; B型超声波法活体采卵技术需要大量的练习才能掌握,可见卵泡数和获卵数较少.因此羊的活体采卵在国外应用最为广泛的方法当属LOPU.Snyder和Dukelow在1974年首先将腹腔镜用于绵羊的活体采卵,获得了6枚卵母细胞,然而当时并没有得到充分的发展,随着胚胎体外生产技术的发展,直到近些年在国外才逐渐得到应用.而在国内,这方面的研究甚少,因此本实验开展了山羊LOPU的探索研究.     

“试管山羊”在河北农大顺利降生初生重3．2公斤

6月15日。应用腹腔镜活体采卵技术的“试管山羊”——“庆庆”。在河北农业大学试验牧场顺利降生。专家认为，该技术不仅有利于充分挖掘优良母畜的繁殖潜力，对体外“工厂化”生产谱系清楚的试管家畜有重要意义。而且也为动物胚胎克隆、转基因、胚胎干细胞等胚胎生物技术研究提供了丰富的实验材料和必要的研究手段。     

牛体外受精胚胎工厂化生产技术的探讨

牛体外受精胚胎工厂化生产的目的是获得大量优良遗传性状的胚胎,用于胚胎移植。作者就该技术的5个主要环节,即活体采卵、体外成熟、体外受精、体外培养、胚胎冷冻及发展前景等作一综述。     

水牛胚胎移植技术在其繁殖生产中的应用

为了加快良种水牛的扩繁和奶业的发展,试验对广西水牛进行活体采卵—体外胚胎生产—胚胎移植技术,同时选择2批杂交水牛群作为受体,进行同期发情试验,发情后第6天进行胚胎移植。结果表明:进行同期发情组的水牛发情率为63.64%、利用率为71.43%、妊娠率为60%,说明将水牛活体采卵—体外胚胎生产—胚胎移植技术应用于水牛生产中是切实可行的,也是加快良种水牛扩繁的有效途径。     

采卵季节对水牛活体采卵及其体外受精效果的影响

为探讨采卵季节对水牛活体采卵及其体外受精效果的影响,本研究选自2006-2008年78批次的626头牛活体采卵收集3143枚卵母细胞数据和同一操作者的51批次共培养1366枚卵母细胞的体外受精生产胚胎数据,并根据水牛繁殖特点和发情规律,每年分为3个阶段,即春季(1～4月),夏季(5～7月)和秋冬季(8～12)3个季节进行统计分析。结果发现,水牛活体采卵和体外受精效果受季节影响较大。在秋冬季进行活采时,平均头次获卵母细胞总数和可用卵母细胞数分别为(5.88±2.84)枚和(3.56±1.51)枚,平均头次卵母细胞总数明显高于夏季的(3.72±1.58)枚(P<0.01),但与春季的(4.80±1.77)枚差异不显著(P>0.05),而头均可用卵母细胞数则高于春季的(2.77±1.19)枚(P<0.05)和夏季的(2.11±1.11)枚(P<0.01);季节之间卵母细胞可用率没有差异(P>0.05);虽然每个季节活体采卵体外受精卵分裂率没有差异(P>0,05),但在秋冬季采卵时,其囊胚率(27.09%)则明显高于春季(20.95%)和夏季(20.45%),P<0.05,而春季和夏季之间没有差异(P>0.05)。研究表明:一年四季都可以进行水牛活体采卵体外生产胚胎,但从采卵效果和胚胎生产效率上看,在秋冬季进行活体采卵效果最好。     

影响羔山羊活体采卵的因素

目前,从离体卵巢采集卵母细胞是体外受精研究所需卵母细胞的主要来源之一,羊的活体采卵技术(laparoscopic ovum pick-up,LOPU)始于1974年,由于当时胚胎体外生产技术滞后,其后的20年里,羊活体采卵技术未得到较好发展[1].但我国缺乏良种羊的卵巢资源,所以所采集的卵母细胞种质一般较差,而且其系谱不明.     

淘汰牛连续活体采卵效果及影响因素分析

为挖掘利用具有优秀遗传性能的淘汰母牛的卵泡资源，本实验开展淘汰牛连续活体采卵的效果及影响因素研究。选取6头5～6岁无卵巢疾病的淘汰西门塔尔牛，分别于7、10、11月和12月每间隔4 d进行1次活体采卵，每月最高进行5次活体采卵，记录每头次的卵泡抽吸次数、获卵数、优质卵数，并对影响活体采卵效果的因素进行分析。结果表明：平均头次获卵数和优质卵数分别为4.61枚和2.22枚，卵子回收率和优质卵率分别为47.21%和49.13%；试验牛的平均头次获卵数无显著差异，但第1次活体采卵的卵子回收率高于第2～5次（P<0.05），第2次活体采卵的优质卵率显著高于第5次；采卵月份对平均头次获卵数、回收率和优质卵率无显著影响；采卵次数与采卵月份间无交互作用（P>0.05）。综上，淘汰牛连续活体采卵的效果相对稳定，连续采卵次数对卵子回收率、优质卵率具有一定影响。