| 应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位 |
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| 引用本文： | 刘文博,焦新安,高崧,张扬,潘志明,王芳,张如宽,刘秀梵.应用噬菌体肽库技术定位沙门氏菌鞭毛蛋白上属特异性共同抗原表位[J].畜牧兽医学报,2003,34(2):183-187. |
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| 作者姓名： | 刘文博 焦新安 高崧 张扬 潘志明 王芳 张如宽 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 ( 396 70 0 5 7)，霍英东青年教师基金，江苏省应用基础研究资助项目 (BJ2 0 0 0 0 2 8)。 |
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| 摘 要： | 用生物素标记的沙门氏菌属特异性单克隆抗体de7作为分子探针，应用亲和筛选法从噬菌体肽库中筛选该单抗所针对的表位克隆，最终进行定位。经三轮筛选后，用斑点印迹法检测，得到良好的富集效果。通过免疫筛选法从第三轮筛选物中桃取了24个阳性克隆，再以斑点印迹、竞争ELISA进一步鉴定阳性克隆，证实已获得了沙门氏菌鞭毛属特异性共同抗原的模拟表位。测得的序列为SRRSFTTE，将其与沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列相比较，同源性较小，但在不同血清型沙门氏菌鞭毛蛋白氨基酸序列的Ⅰ区高度保守序列中，发现61-65位氨基酸的RSXXT序列与所得的线性表位有相同的排列，而大肠杆菌鞭毛蛋白氨基酸在此段的序列为RAXXT，且这种序列排列的几率为1/20^5，因此推断该单抗所针对的表位在该区段上。此外，以阳性克隆免疫Balb/c小鼠，并制备高免血清进行间接荧光检测和竞争ELISA鉴定，结果表明其具有优良的免疫原性和高度的特异性，这亦为模拟表位疫苗的研究提供了新思路。
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| 关 键 词： | 沙门氏菌 鞭毛蛋白 属共同抗原位表位 模拟表位 噬菌体肽库 表位定位 |
| 文章编号： | 0366-6964(2003)02-0183-05 |
Mapping of the Generically-specific Common Epitope on Salmonella Flagellins Using Phage-displayed Peptide Libraries |
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| LIU Wen-bo,JIAO Xin-an,GAO Song,ZHANG Yang,PAN Zhi-ming,WANG Fang,ZHANG Ru-kuan,LIU Xiu-fan.Mapping of the Generically-specific Common Epitope on Salmonella Flagellins Using Phage-displayed Peptide Libraries[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2003,34(2):183-187. |
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| Authors: | LIU Wen-bo JIAO Xin-an GAO Song ZHANG Yang PAN Zhi-ming WANG Fang ZHANG Ru-kuan LIU Xiu-fan |
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| Keywords: | Salmonella Flagellin Generically-Specific common epitope Minotope Phage-displayed pepetide library Epitope mapping |
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