| 猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 劳秀杰,王静静,郑东霞,邵春艳,何海建,王晓洁,王志亮,王晓杜,宋厚辉.猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].中国动物检疫,2016,33(1):62-66. |
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| 作者姓名： | 劳秀杰 王静静 郑东霞 邵春艳 何海建 王晓洁 王志亮 王晓杜 宋厚辉 |
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| 摘 要： | 根据Gen Bank报道的N基因高度保守核苷酸序列,设计并合成一对引物。上下游引物与Gen Bank中登录的153株猪流行性腹泻病毒(PEDV)N基因全长序列匹配度分别是100%和97%。以本实验室分离流行毒株为模板,利用SYBR Green I荧光染料法进行RT-PCR扩增,获得扩增产物构建重组质粒作为阳性对照,建立检测猪流行性腹泻病毒核酸的方法。同一样品进行3次重复试验,变异系数0.9%。通过对临床样品进行检测和测序验证,核酸检测结果中的阳性样品准确率为100%。本研究所建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏、准确等优点,可用于临床PEDV的检测及分子流行病学调查。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 N基因 实时荧光定量RT-PCR 检测 |
Development of Real-time Quantitative RT-PCR Method for Detecting Porcine Epidemic Diarrhea Virus |
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| Lao Xiujie,Wang Jingjing,Zheng Dongxi,Shao Chunyan,He Haijian,Wang Xiaojie,Wang Zhiliang,Wang Xiaodu,Song Houhui.Development of Real-time Quantitative RT-PCR Method for Detecting Porcine Epidemic Diarrhea Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2016,33(1):62-66. |
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| Authors: | Lao Xiujie Wang Jingjing Zheng Dongxi Shao Chunyan He Haijian Wang Xiaojie Wang Zhiliang Wang Xiaodu Song Houhui |
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