| 凡纳滨对虾酚氧化酶原激活因子基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 赵永贞,陈秀荔,曾地刚,杨春玲,彭敏,何苹萍,李咏梅,彭金霞,韦嫔媛,陈晓汉.凡纳滨对虾酚氧化酶原激活因子基因的克隆及表达分析[J].水产学报,2014,38(8):1068-1078. |
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| 作者姓名： | 赵永贞 陈秀荔 曾地刚 杨春玲 彭敏 何苹萍 李咏梅 彭金霞 韦嫔媛 陈晓汉 |
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| 作者单位： | 广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院,广西壮族自治区水产科学研究院 |
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| 基金项目： | (2012GXNSFDA053015)；现代农业产业技术体系建设专项（CARS-47）；国家现代农业产业技术体系广西南美白对虾产业创新团队项目（nycytxgxcxtd-03-14）通讯作者：陈晓汉,Tel：0771-5316577；E-mail：chnxhn@163.com |
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| 摘 要： | 为研究酚氧化酶原激活因子(prophenoloxidase-activating factor,PPAF)在凡纳滨对虾感染传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)过程中所起的免疫作用,实验采用逆转录聚合酶链式反应和cDNA末端快速扩增技术克隆了凡纳滨对虾PPAF基因的全长cDNA序列,并通过实时荧光定量PCR技术分析了该基因在正常凡纳滨对虾和感染IHHNV凡纳滨对虾不同组织的表达情况。结果显示,克隆获得了1 986 bp凡纳滨对虾PPAF基因cDNA全长序列(GenBank登录号JQ684529),其中含有一个1 629 bp开放阅读框(ORF),两翼分别存在21 bp(5'端)和336 bp(3'端)的非翻译区。该基因的开放阅读框共编码542个氨基酸,氨基酸序列269~517处存在功能结构域——丝氨酸蛋白酶结构域,氨基酸序列494~502区域存在一个ALPHA-2巨球型免疫蛋白功能位点,316~321区域有一个组氨酸酶活性位点;定量PCR分析发现,该基因无论在正常对虾还是感染IHHNV对虾的心脏、肝胰腺、肠、胃和肌肉中的表达量均较低,在血液和鳃腺中的表达量明显高于其他组织,但感染IHHNV对虾不同组织中PPAF基因的表达量均低于正常对虾相应组织中的表达量。定量检测PPAF基因在对虾鳃腺组织中的表达情况显示,对虾感染IHHNV后,PPAF基因的表达量急剧降低,3 h时至最低,之后表达量逐渐上升,48h时达最高值。研究表明,IHHNV可抑制PPAF基因的表达,因而抑制酚氧化酶原免疫系统的有效激活,或是其感染对虾并在对虾组织内增殖的原因之一。
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| 关 键 词： | 凡纳滨对虾 酚氧化酶原激活因子 IHHNV 克隆 |
| 收稿时间： | 2013/11/13 0:00:00 |
| 修稿时间： | 6/9/2014 12:00:00 AM |
Cloning and analysis of full length cDNA of prophenoloxidase activating factor in Litopenaeus vannamei |
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| ZHAO Yongzhen,CHEN Xiuli,ZENG Digang,YANG Chunling,PENG Min,HE Pingping,LI Yongmei,PENG Jinxi,WEI Pinyuan and CHEN Xiaohan.Cloning and analysis of full length cDNA of prophenoloxidase activating factor in Litopenaeus vannamei[J].Journal of Fisheries of China,2014,38(8):1068-1078. |
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| Authors: | ZHAO Yongzhen CHEN Xiuli ZENG Digang YANG Chunling PENG Min HE Pingping LI Yongmei PENG Jinxi WEI Pinyuan and CHEN Xiaohan |
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| Institution: | Guangxi Academy of Fishery Sciences,Guangxi Academy of Fishery Sciences,,,,,,Guangxi Academy of Fishery Sciences |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Litopenaeus vannamei Prophenoloxidase-activating factor IHHNV Clone |
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