斑点叉尾趋化因子SCYA126基因及其可变剪接

通过探针杂交筛选斑点叉尾(Ictalurus punctatus)BAC基因组文库,利用引物步移的方法对阳性克隆BAC047 K12进行序列测定,得到2 815 bp的SCYA126基因组序列。序列分析表明,SCYA126基因由2个外显子和1个内含子组成;外显子拼接的序列与SCYA126cDNA序列完全一致,编码92个氨基酸,在N端含有2个相邻的半胱氨酸(CC)和2个不相邻的半胱氨酸,为典型的CC趋化因子亚家族成员;其上游调控序列包含TATA框启动子序列和一些与免疫相关的转录因子结合位点。另外,根据与GenBank接收号为BM029630的EST序列的比较分析,发现SCYA126基因组中的内含子没有被剪接,导致翻译后可能产生N端部分缺失的SCYA126蛋白。在胰脏和肝脏中确认了高表达的包含内含子的mRNA的存在,而且其表达量要明显高于正常剪接的SCYA126mRNA。[中国水产科学,2007,14(1):1-7]     

斑点叉尾鮰趋化因子SCYA126基因及其可变剪接

通过探针杂交筛选斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）BAC基因组文库，利用引物步移的方法对阳性克隆BAC047_K12进行序列测定，得到2815bp的SCYA126基因组序列。序列分析表明，SCYA126基因由2个外显子和1个内含子组成；外显子拼接的序列与SCYA126 cDNA序列完全一致，编码92个氨基酸，在N端含有2个相邻的半胱氨酸（CC）和2个不相邻的半胱氨酸，为典型的CC趋化因子亚家族成员；其上游调控序列包含TATA框启动子序列和一些与免疫相关的转录因子结合位点。另外，根据与GenBank接收号为BM029630的EST序列的比较分析，发现SCYA126基因组中的内含子没有被剪接，导致翻译后可能产生N端部分缺失的SCYA126蛋白。在胰脏和肝脏中确认了高表达的包含内含子的mRNA的存在，而且其表达量要明显高于正常剪接的SCYA126mRNA。     

H9N2亚型禽流感病毒感染TC-1细胞诱导的免疫反应

为了更好地了解宿主对禽流感病毒(AIV)感染后的免疫反应,本试验以TC-1细胞为模型,感染H9N2亚型AIV。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了3种模式识别受体(TLR-3、RIG-I和MDA-5)和5种炎性细胞因子(IL-6、RANTES、IP-10、TNF-α和IFN-β)。结果显示:3种模式识别受体中MDA-5上调最为明显,5种炎性因子中RANTES和IP-10上调最为明显;而IL-6、TNF-α和IFN-β上调相对较平缓。本研究结果表明:在病毒感染过程中MDA-5反应较TLR-3和RIG-I更为强烈,而在炎性反应过程中RANTES和IP-10反应更加剧烈,IL-6、TNF-α和IFN-β反应则相对较温和一些。本研究在一定程度上反映了机体对流感病毒的免疫反应机制,为在生产中疫苗的使用具有一定的指导意义。     

马立克氏病病毒编码的类白细胞介素8研究进展

马立克氏病(Marek's disease,MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的一种淋巴细胞增生性肿瘤疾病，病毒的许多成分参与了致肿瘤过程。最近的研究结果发现，MDV编码一种类似于白细胞介素-8的产物，称之为病毒性白介素-8（VIL-8)。这种vIL8与人类IL-8在结构上十分相似，但它对异嗜细胞的趋化作用微弱，而对外周血单核细胞有很好的趋化性，且在MDV溶细胞感染中起重要作用。vIL-8是否能象人类IL-8具有激活单核细胞、增强其吞噬作用、增进毛细血管增生和肿瘤生成等功能尚有待探索，本文就有关vIL-8的作用及作用机制进行了讨论。     

雷公藤甲素对哮喘小鼠白介素13和嗜酸性粒细胞趋化因子表达的影响

目的观察雷公藤甲素(TL)对哮喘小鼠肺组织中白介素13(IL-13)和嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达的影响,探讨TL治疗哮喘的作用机理。方法40只雄性昆明小鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘未治疗组、地塞米松治疗组及TL治疗组,以卵清蛋白致敏和激发方法建立哮喘小鼠动物模型并给予相应治疗。24 d后处死小鼠,检测各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸性粒细胞(Eos)计数;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肺组织匀浆中IL-13、eotaxin mRNA的表达量;采用免疫组化法检测各组小鼠肺组织切片中IL-13、eotaxin蛋白的表达水平;并探讨他们之间的关系。结果哮喘未治疗组小鼠肺组织IL-13、eotaxin mRNA及蛋白的表达量均明显高于正常对照组(P<0.01),TL治疗组及地塞米松治疗组低于哮喘未治疗组(P<0.01或<0.05)。肺组织IL-13蛋白的表达与BALF中的白细胞总数、Eos计数及肺组织eotaxin蛋白的表达呈正相关(r分别为0.513、0.604、0.625,P<0.01)。肺组织eotaxin蛋白的表达与BALF中的白细胞总数、Eos计数呈正相关(r分别为0.679、0.718,P<0.01)。结论TL抑制哮喘气道炎症的机制可能与其抑制肺组织中IL-13及eotaxin的表达有关。     

羊传染性脓疱病毒趋化因子结合蛋白（CBP）基因的克隆及表达分析

参照GenBank中ORFV的毒力因子CBP基因的核苷酸序列设计合成1对特异性引物,采用PCR方法扩增该基因片段,并克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,经PCR、酶切鉴定和测序正确后,转入E.coli BL21（DE3）感受态细胞中,经IPTG进行诱导表达,并通过生物信息学软件进行分析。SDS-PAGE结果可见大小...     

猪伪狂犬病活疫苗(HB-98株)的分子特性与免疫效果分析

伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是危害全球养猪业最严重的急性传染病之一。猪伪狂犬病的临床症状主要表现在:(1)母猪流产、产死胎、木乃伊胎;(2)公猪感染睾丸肿胀、萎缩,失去种用能力;(3)新生     

CXCR2基因与奶牛乳房炎

CXCR 2基因是目前定位于牛2号常染色体上的与奶牛乳房炎有关的基因,CXCR 2是趋化因子CXC类的受体之一,它能介导趋化因子趋化免疫细胞定向迁移使机体产生免疫应答。奶牛乳房炎是奶牛业中常见的难以治疗的疾病,目前科学家正试图从遗传角度对其进行遗传控制。     

干扰素在促进流感后细菌继发感染中的作用机制研究进展

流感发生后细菌的继发感染通常导致更高的发病率和病死率。流感病毒感染后机体产生的干扰素虽然在抗病毒感染中发挥了重要作用,但同时也可促进细菌的继发感染。干扰素可抑制趋化因子和IL-17等细胞因子的产生来抑制巨噬细胞和中性粒细胞的募集,从而降低机体对细菌的清除能力,促进细菌的定植和感染。明确干扰素在促进流感后细菌继发感染中的作用可为临床防治提供参考。     

猪淋巴细胞趋化因子XCL1的电子克隆和编码区序列RT-PCR验证

淋巴细胞趋化因子（XCL1）是C族趋化因子的一员,可由CD8＋T细胞、NK细胞、γδT细胞、肥大细胞等多种细胞产生,其趋化性主要作用于CD8＋T细胞和NK细胞。根据猪的EST数据库中猪XCL1基因序列,设计引物采用RT—PCR的方法从猪胸腺中扩增猪XCL1全基因序列,将其连接到pMD-19T载体上并测序,得到猪XCLl基因（GenBank登录号为EU743945）。猪XCL1cDNA大小为333bp,编码由110个氨基酸残基组成的多肽。该多肽序列含Chemokine-C、Chemokine、Chemokine-CC和SCY等功能域,与羊和人的氨基酸序列相似率分别为81．6％和68．4％。预测分析其为分泌蛋白,信号肽剪切位点在21A和22V。猪XCL1基因定位于猪4号染色体（CU468871）,基因结构与人XCL1的相似,都由3个外显子组成。该基因ORF翻译起始处基本符合Kozak规则,ORF起始密码子上游同一相位有终止密码子,ORF后有1个加尾信号,预测得到4个可能的启动子,可能性高达85％～98％。总之,通过电子克隆与试验验证,成功地克隆了猪新基因XCL1。