Culture and Identification of Myoblasts Isolated from Duck Embryos

Using embryonic myoblasts to research the formation and de-velopmental mechanisms of skeletal muscle is becoming a research hotspot. This study aimed to establish a method of isolation, culture and identification of my-oblasts in duck embryos. [Method] Pectoral and leg muscle samples were isolated from the embryos of Gaoyou duck at 13 d of hatching, then disassociated with col-lagenase and trypsin and purified via differential adhesion. The isolated cells were cultured in vitro and detected for the expression of Pax7 protein using immunofluo-rescence technique. [Result] Myoblasts were obtained successful y both from pectoral and leg muscles in duck embryos and these cells proliferated strongly and differen-tiated wel . Immunofluorescence staining showed that more than 95% cells could express Pax7 protein. [Conclusion] In summary, we report the successful establish-ment of a complete system for the isolation, purification, identification and culture of myoblasts from duck embryos.     

黄条鰤仔稚幼鱼消化酶活性变化研究

为了解黄条鰤(Seriola aureovittata)早期发育阶段的消化生理特性，测定了黄条鰤胚胎、仔稚幼鱼阶段脂肪酶、淀粉酶、胰蛋白酶和碱性磷酸酶活性变化。结果显示，在黄条鰤仔鱼出膜前胚胎阶段，即能检测到脂肪酶、淀粉酶和碱性磷酸酶活性；初孵仔鱼体内(1 d)初次检测出胰蛋白酶的活性。脂肪酶和碱性磷酸酶比活力在仔鱼孵化后迅速增强(P<0.05)，在4 d开口时，2种酶比活力达最高值；淀粉酶比活力在7 d时达最大值；胰蛋白酶比活力在仔鱼阶段缓慢上升，15 d时比活力最大。稚鱼阶段内脏团中脂肪酶、碱性磷酸酶和胰蛋白酶活性基本维持稳定，幼鱼阶段内脏团脂肪酶、碱性磷酸酶和胰蛋白酶活性都呈现上升趋势；稚鱼和幼鱼阶段内脏团中淀粉酶活性下降并基本稳定于较低水平。研究表明，黄条鰤仔稚幼鱼发育过程中，各种消化酶活性变化明显，且与其发育阶段和食性密切相关。在尚未摄食饵料的早期仔鱼体内已存在消化酶，认为其是母源传递而来，不是由外源性饵料所致；幼鱼阶段内脏团脂肪酶、碱性磷酸酶和胰蛋白酶比活力明显提高，这反映出随苗种生长发育，其肠道结构和消化机能逐渐完善，并且对脂肪、蛋白质的需求逐渐增强。     

转MsLEA4-4基因拟南芥株系的耐盐性分析

为了深入研究紫花苜蓿（Medicago sativa）MsLEA4-4基因的抗逆性，本试验对前期获得的转MsLEA4-4基因的拟南芥（Arabidopsis thaliana）株系进行不同浓度盐胁迫处理，以验证MsLEA4-4基因在拟南芥植株体内的耐盐性。试验结果表明：盐胁迫后转基因株系的发芽率达到55%，比对照植株（Control plant，CK）高81%；转基因株系的鲜重、叶绿素含量均高于CK（P<0.05）；盐胁迫后转基因株系的存活率比CK提高75.0%~81.3%；盐胁迫明显抑制根系生长，但转基因植株的侧根数量比CK多4~5根（P<0.05）；盐胁迫后转基因株系体内的可溶性糖含量（P<0.05）和超氧化物歧化酶（P<0.01），过氧化氢酶（P<0.01），过氧化物酶（P<0.05）活性均高于CK，脯氨酸（P<0.01）和丙二醛（P<0.05）含量均低于CK。综上可得，MsLEA4-4基因参与了拟南芥体内的耐盐性调控，提高了转基因拟南芥对盐胁迫的耐受性。本研究为进一步探索MsLEA4-4在转基因紫花苜蓿盐胁迫中的功能及培育耐盐性紫花苜蓿品种提供依据。     

不同离心液对猪孤雌激活胚胎的冷冻效果

以猪孤雌激活胚胎为材料,经体外成熟、电激活,选取电激活后3d(6⁸cell)胚胎分别放入0.28mol/L的蔗糖离心液或无蔗糖离心液中离心处理后,继续培养5d,取扩张囊胚进行玻璃化冷冻保存。结果显示,在囊胚形成率上,无蔗糖组(19.86%)略高于蔗糖组(18.83%),差异不显著(P>0.05);胚胎复苏率上两者差异不显著,但蔗糖组(43.33%)明显好于无蔗糖组(29.63%);在解冻后胚胎内细胞破损率上,无蔗糖组(20.18%)低于蔗糖组(29.13%),差异不显著(P>0.05)。因此,离心液中添加蔗糖,对后续囊胚形成无影响,在一定程度上提高了解冻囊胚复苏率,但没有降低内细胞的破损程度。     

培养液中添加物对牛卵母细胞体外成熟、受精和胚胎早期发育的影响

<正>1951年Chang和Austin首次发现哺乳动物精子获能现象,开创了哺乳动物体外受精(IVF)研究的新时代。自Brackett于1982年获得世界上第一头试管犊牛以来,IVF技术得到迅速发展。但牛胚胎体外化生产技术是一个复杂的过程,不仅受各种人为因素的影响,还受到培养液等环境条件的制约,使体外受精胚胎发育率较低。本文就培养液中添加不同物质研究其对牛卵母细胞体外成熟、受     

2细胞期胚胎采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎效率的影响

通过检测牛早期胚胎分裂速率的时间分布,并将体外受精后0~34 h与26~30 h时间段内采集的2细胞期胚胎分别作为电融合对照组与电融合试验组。将对照组与试验组的2细胞期胚胎分别用于电融合,并将电融合后的胚胎继续体外培养至囊胚期,检测并对比分析2组胚胎的融合率、分裂率、囊胚率和四倍体制备率。结果显示,牛2细胞期胚胎在体外受精后28~30 h其内分裂速率达到最高峰(18.9%)。电融合对照组的融合率、分裂率略高于试验组胚胎(85.2%vs.84.2%,82.2%vs.80.9%),试验组的囊胚率略高于电融合对照组(45.4%vs.44.8%),但差异均不显著。而电融合试验组的四倍体制备率显著高于电融合对照组(28.3%vs.14.5%)。结果表明,牛2细胞期胚胎的采集时间对电融合方法体外制备牛四倍体胚胎的效率有显著影响。     

进口荷斯坦牛胚胎的移植效果与遗传物质分析

为了提高荷斯坦牛养殖业生产水平及牧场奶牛遗传品质,试验采用进口荷斯坦牛胚胎移植本地奶牛的方法,进行了受体选择、冻胚移植、基因组检测等技术实施。应用SPSS19.0软件,对2019-2020年的胚胎移植记录及产犊记录进行分析。结果表明,进口冻胚移植的妊娠率为53.11%,达到国内先进水平;秋季移植的妊娠率高于春季和夏季,春季进行胚胎移植的公犊初生重显著高于秋季（P<0.05）,春季和夏季进行胚胎移植的母犊初生重极显著高于秋季（P<0.01）;受体牛为青年牛的妊娠率最高,为54.44%,青年牛进行胚胎移植的公犊初生重高于成年母牛（P>0.05）,成年母牛进行胚胎移植的母犊初生重极显著高于青年母牛（P<0.01）;2020年进口胚胎移植后代的遗传品质均高于2019年的牧场奶牛。本研究对甘肃地区进口荷斯坦牛胚胎的移植效果及所产后代的遗传品质做了系统的分析,为将来筛选出后备核心高产母牛和制定育种方案奠定了基础。     

羊体外胚胎高效生产技术研究现状

体外胚胎生产技术作为胚胎工程技术的基础,在提高繁殖潜力、加速良种繁育等多方面具有重要意义,包括卵母细胞采集、体外成熟、体外受精、体外胚胎培养等技术。文章主要介绍羊体外胚胎高效生产技术研究现状,分析卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养影响因素,并提出了羊卵泡的预测标记、卵母细胞新型质检手段、模拟羊体内环境的培养体系,以期为羊卵母细胞体外培养技术的研究及在胚胎高效生产中的应用提供参考。     

常绿果树体细胞胚胎发生体系研究进展

通过总结国内外常绿果树体胚发生体系研究现状,介绍了体细胞胚胎发生体系的建立,综述了体细胞胚胎发生过程的主要影响因素、生理生化机制及遗传稳定性的研究进展,提出目前体细胞胚胎发生体系研究存在的问题和今后展望,以期为今后常绿果树体胚发生体系研究及实际应用提供参考价值。