利用 DDRT-PCR 鉴定芸芥自交不亲和系与自交亲和系的差异表达 cDNA

芸芥与芸薹属植物具有亲缘关系，也是芸薹属植物的重要育种资源。自交亲和性是芸芥的一种重要变异性状。为了探明芸芥自交亲和基因的表达器官，并分离与自交亲和性有关的 cDNA 片段，以芸芥的一对近等基因系，自交亲和系（SC）与自交不亲和系（SI）为试材，利用差异显示 RT-PCR 技术分别对开花前和开花后的叶片、花药和柱头进行鉴定。结果表明，不论开花前还是开花后，芸芥自交亲和系与自交不亲和系的叶片或花药间的扩增带型是一样的，但在近等基因系的柱头间得到了差异表达条带。这证明芸芥自交亲和基因不是组成型表达，而是组织特异性表达，柱头是其唯一的表达器官。在开花前的自交亲和系中共得到了2条 cDNA 片段，一条小于100 bp，另一条为750～1000 bp，在开花后的自交亲和系中得到了1条300 bp 的 cDNA 片段。据分析这3条 cDNA 片段可能与芸芥的自交亲和性密切相关。在开花前的自交不亲和系中共得到了2条 cDNA 片段，一条为500 bp，另一条为750 bp，同时在开花后的自交不亲和系中得到了1条500～600 bp 的 cDNA 片段。这些 cDNA 片段可以用来区分芸芥的自交亲和系与自交不亲和系，还可用于克隆自交亲和基因。     

羊草自交不亲和性相关基因TrxLc的克隆、表达和酶活性分析

羊草是一种重要的禾本科牧草，主要分布于远东地区。硫氧化还原蛋白H (Trx h) 是一大类广泛分布于动物、植物和微生物中的小分子蛋白。在一些禾本科植物中，一种在成熟花粉中表达的Trx h，与植物的自交不亲和性有关。在本研究中, 我们克隆了羊草花粉硫氧还蛋白基因(TrxLc)的DNA和cDNA序列, 与其他禾本科植物Trx h的cDNA序列相     

普通荞麦自交不亲和两系互交制种技术研究

用自交不亲和性制种,实现普通荞麦杂种优势利用;创新杂交制种生产技术,提高效率,降低生产成本.将育成的近交系亲本矮B系与矮C系等量、混合种植,借助虫媒、风媒授粉,进行杂交制种.成熟后混合收获、脱粒,用机械将矮BF1（正交F1代）与矮CF1（反交F1代）分开,分别用于生产.制种田没有固定的父本,所收获种子95％是杂交种.正交F1代超亲优势为26.1％,反交F1代超亲优势为30.2％,平均优势为38.4％;试验表明,另一组合矮A系与恢3系所配杂交种比对照增产25.64％～44.87％,被审定为‘榆荞4号’品种.制种田省去了父本和按行比种植的工序,不仅提高了制种产量,降低了生产成本,而且制种效果好,在荞麦杂种优势利用上,是一种新的杂交种生产技术,可用于大规模生产杂交种.     

无籽沙糖橘CrS1-1基因的克隆与表达分析

为研究显花植物自交不亲和的分子机理,以无籽沙糖橘为试材,克隆无籽沙糖橘花粉S1基因的cDNA和DNA全长序列,命名为CrS1-1,该基因cDNA和DNA全长均为450 bp。半定量PCR分析结果表明,该基因在花粉中特异表达。Real-time PCR分析表明,该基因在无籽沙糖橘自花授粉72h表达量达到最大,而无籽沙糖橘×有籽沙糖橘异花授粉72 h的表达量最低。     

从中甘11号分离自交不亲和系的研究

从结球甘蓝一代杂种分离自交不亲和系，在理论上是可行的，中甘１１号分离自交不亲和系的研究证明了这一点。分离到Ｆ３，因带有球外叶镶嵌这一不良遗传性状，使研究处于困境。进一步的研究探明了通过自交分离和选择能去掉这一不良性状，已选出３个经济性状好、自交不亲和性基本稳定的株系。     

京白梨等品种S 基因型鉴定及新基因S28 和S30 的核苷酸序列分析

 根据梨S基因高度保守区C1和C3区, 设计1对引物P1和P2, 对梨品种的基因组DNA进行S基因特异扩增、克隆、测序, 并在GenBank中BLAST比较, 确定S 基因特异性片段, 对京白梨等6个供试自交不亲和品种的S基因型比对结果为: 白梨中的‘库尔勒香梨’为S₂₁ S₂₈ , ‘苹果梨’为S₁₇S₁₉ ; 砂梨中的‘台湾蜜梨’为S₁₁ S₂₂ ; 西洋梨中的‘葫芦梨’为S_a S_b; 秋子梨中的‘京白’为S₁₆ S₃₀ , ‘早梨18’为S₄ S₂₈。其中S₂₈和S₃₀为首次登录的新S 基因, 在GenBank的登录号分别为AY562394 (库尔勒香梨) 和AY876945 (京白) 。     

果梅花不同发育阶段花粉原位萌发及花粉管生长特性

为探明自花、异花花粉在果梅花的不同发育阶段原位萌发及生长的特性,以细叶青果梅为材料,取开花前6、4、2d、开花当天和花后2d的花(花蕾),分别于自花、异花授粉(莺宿)后12、24、48、72、96h切取花柱,用FAA固定液处理,荧光染色后压片观察。结果表明,自花花粉在柱头上的萌发率略低于异花(开花前4d存在显著差异),开花前6、4d极显著低于其他各阶段,花蕾越幼小花粉萌发越差,开花当天花粉萌发率超过80%;开花前4d之前的花柱内异花花粉管数量显著低于开花前2d及之后各期的,果梅开花前4d以前的花发育不充分;开花后2d生长到花柱基部的异花花粉管数量较多,属于有效授粉期。果梅在开花前4d开始具备抑制自花花粉管生长的能力,并且随着花的发育逐渐增强,开花当天最强,开花后开始减弱。果梅自交授粉期以开花前2～3d为宜。     

杏(Prunus armeniaca)自交不亲和强度及其授粉受精相关特性

为了解杏自交不亲和性强度与授粉受精相关特性的关系,以自交亲和(Self-compatibility:SC)品种凯特(Prunus armeniaca L．cv．Katy)和自交不亲和(Self-incompatibility:SI)品种新世纪(P.armeniaca L.cv．Xinshiji)及凯特×新世纪杂种群体为试材,荧光显微镜观察自交亲和与自交不亲和杏花粉管生长动态。结果表明,授粉后初期,自交亲和性与自交不亲和性的杏花粉都能正常萌发、生长,但是在花粉管生长延伸到花柱1／2以后,自交亲和性的花粉管能顺利进入子房,而自交不亲和性的花粉管多数顶端膨大呈球形,停止向下生长,只有极个别能正常生长到达子房;杂种后代的可溶性蛋白含量和RNA酶比活力,与亲本相比无明显的趋中变异表现,而且在自交亲和与自交不亲和杏之间无显著性差异。     

Identification of S-alleles in pear (Pyrus communis L.) cv. ‘Rocha’ and other European cultivars

In this work we report the cloning and identification of S-RNase alleles responsible for gametophytic self-incompatibility (GSI) of ‘Rocha’ pear and of 13 other European pear cultivars that might be used as its pollinators. Partial sequences of S-RNase alleles were amplified by PCR with specific primers hybridising in conserved regions of previously identified S-RNase alleles of Pyrus communis, cloned and sequenced and the S-genotype of eight pear cultivars was fully determined. Three cultivars (‘General Léclerc’ (SqSl), ‘Tosca’ (SbSl) and ‘Alexandrine Douillard’ (SbSk)) shared no S-alleles with ‘Rocha’ (SaSe) and shall be totally compatible with this cultivar. None of the cultivars analysed showed an identical amplification pattern to the one observed in ‘Rocha’, so the other cultivars shall be at least semi-compatible. One new allele was identified in P. communis cv. ‘Beurré d’Avril’ (designated as St). The determination of both S-RNase alleles of cvs ‘Rocha’, ‘Beurré Precoce Morettini’ (SeSk) and ‘Tosca’ and the identification of one S-RNase allele in cvs ‘Carapinheira’ (Sb), ‘Amêndoa’ (Se), ‘Pérola’ (Sk) and ‘Beurré d’Avril’ (St) are important contributions for the effort recently developed worldwide to establish groups of sexual compatibility among European pears.     

梨自交不亲和强度不同品种花柱S糖蛋白含量的差异

 提取梨( Pyrus) 自交不亲和强度不同品种花柱可溶性蛋白质, 应用等电聚焦电泳法在凝胶板上分离出S 糖蛋白, 用图像解析法进行定量。结果表明, 花柱总S 糖蛋白含量因品种而异, 自交不亲和强、弱及自交亲和的品种每1 􀀁g 花柱可溶性蛋白中含总S 糖蛋白分别为􀀂1. 3 ng 、0. 7 ~ 0. 9 ng、 0. 7 ng 。不同的S 基因所表达的S 糖蛋白量差异显著, 即使是同一S 基因所对应的S 糖蛋白量也因品种而异。