猪胸膜肺炎放线杆菌结构蛋白基因ApxIVA特异性片段的表达和纯化

以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清8型分离株Hpn-405株基因组DNA为模板,PCR方法扩增ApxIVA特异性片段,PCR产物经纯化后与载体pMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建成重组表达质粒pET-ApxIVA3,转入到大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导重组蛋白的表达,SDS-PAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为18 ku,与预期片段大小相符;将经过超声破碎的菌液离心取沉淀经尿素洗涤溶解后用镍金属螯合层析柱进行纯化。Western-blot分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。     

几种草坪草对SO_2的净化效果研究

贵州省瓮福磷肥厂内因SO2污染,建植的草坪成坪后20~30 d开始出现SO2污染伤害症状,但伏生臂型草、假俭草、狗牙根、根丛型高羊茅和黔草1号高羊茅表现出一定的抗SO2污染和吸收净化能力。从含硫量的相对值分析,吸收和积累硫的能力依次为:狗牙根>黔草1号高羊茅>根茎型高羊茅>假俭草>伏生臂型草。结果表明草坪草对SO2的吸收和积累与距离污染源的远近有关,与草坪草在污染的空气条件下暴露时间的长短成正相关关系。     

牛隐孢子虫卵囊分离和纯化方法的比较试验

运用3种粪便漂浮法、3种染色法和2种分离提纯法对10头犊牛的粪便进行卵囊检查、分离纯化，对这些方法进行比较。试验结果显示：饱和硫酸锌漂浮法结合姬姆萨氏染色法检查隐孢子虫卵囊，检出率最高、效果最佳；蔗糖密度梯度离心法分离纯化隐孢子虫卵囊。收集的卵囊最多，效果最好。     

人工模拟自然醇化的库房设施建设与应用

笔者通过对烟叶人工模拟自然醇化的可行性和优势及今后的发展趋势的分析,引进了人工模拟自然醇化的先进库房建设及技术应用,它采用国际先进的技术对烟叶醇化库的温湿度进行实时监测,实现了对监测数据的对比、分析、存储、显示、打印、报警等多项功能。改变了以往手工抄表的状况,减轻了工作人员的劳动强度,在仓库监控管理领域具有很高的推广和应用价值。     

洞庭湖湿地净化污染物的研究

利用洞庭湖水文观测站、环境监测站和实地考察资料,分析了洞庭湖湿地对水污染的净化功能。结果表明:每年输入湿地TN 67 0132.47 t,TP 41 103.85 t;输出与净化TN 116 033.27 t,TP 6 892.25 t;贮留净化率分别为17.31%和16.77%;COD输入317 849.26 t,输出3072641.97 t,贮留净化率3.086%;重金属元素、有污染的无机和有机化合物输入量10156.616 t,输出量9732.775 t,贮留净化率4.36%;在输入洞庭湖湿地的污染物中,有54.76%N,44.30%P,81.83%COD和95.59%重金属元素和化合物来自四水(湘、资、沅、澧4条江河)和三口(长江分洪流入的松滋、藕池和太平3口),有94%～99%的污染物是由面源污染引起,点源污染只占1%～6%,因此,在洞庭湖湿地水污染的治理上,控制系统外水系输入比控制湿地周边更重要,控制面源污染比点源污染更重要。     

生活污水的处理过程与景观营建的关系

居住区的环境影响人们生活,如何将居住区的污水处理和景观营建结合起来,营建廉价而优质的住区景观是值得思考的课题.现介绍生活污水处理和景观营造相结合的方法,在减轻城市污水处理的压力的同时营造丰富多样的水景景观.     

免疫球蛋白G(IgG)三种提取方法比较

比较3种提取猪血清中免疫球蛋白IgG方法的提取效果。分别用辛酸沉淀法,硫酸铵分步沉淀法,辛酸-硫酸铵沉淀法粗提猪血清免疫球蛋白IgG,并通过SDS-PAGE凝胶电泳、AlphaEaseFC凝胶成像分析软件、Bradford蛋白浓度测定法等比较3种方法的提取纯度和得率,同时比较3种方法的时效性和经济性。辛酸沉淀法提取IgG所用时间最短,只需1h,得率较高但纯度不高;硫酸铵盐析法提取的IgG纯度较高、得率也高,但时间较长;辛酸-硫酸铵分步沉淀法所得IgG纯度很高,但所用时间较长,得率也较低。3种提取方法各有特点,可根据不同的实验条件和目的选择不同的提取方法。     

真菌源壳聚糖酶的纯化及其特征

真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义.自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析.本文从以下3个方面阐述了真菌壳聚糖酶的近期研究进展1)从Aspergillus fumigatus KH-94, Fusarium solani, Mucor rouxii A*B, Penicillum islandicum, P. spinulosum, Rhodotorula gracilis, Trichoderma reesei, A. oryzae, A. fumigatus Y2K 和 A. fumigatus S-26等真菌中获得的胞内壳聚糖酶的纯化及其特性;2)从T. reesei, A. oryzae, A. fumigatus and Cordyceps sp. MET 1504等真菌中获得的胞外壳聚糖酶的纯化及其特性;3)从T. reesei, Metarhizium anisopliae, A. oryzae and A. fumigatus S-26等真菌中获得的壳聚糖酶氨基酸序列的分析.     

中国麇鹿朊蛋白核心片段的原核克隆表达与纯化

从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5′和3′端引入EcoRⅠ和HindⅢ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAAT从变成两个终止密码子。通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a（＋）,转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求。测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a（＋）,阳性质粒命名为MPrP-pET-32a（＋）,阳性质粒转化E.coli BL21（DE3）,进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定。     

三种大孔吸附树脂纯化茶黄素的研究

采用NKA-9、AB-8和ADS-7 3种不同极性的大孔吸附树脂研究纯化茶黄素的工艺条件。比较大孔树脂的类型、pH值、上样速度、除杂液质量分数、样品洗脱液质量分数和体积对茶黄素纯度的影响,初步确定工业纯化茶黄素的工艺。结果表明,NKA-9的纯化效果明显优于AB-8和ADS-7,采用NKA-9纯化茶黄素的最佳工艺条件为：pH值为3,上样速度2BV/h,先用1BV 15%的乙醇除杂,再用3BV 90%的乙醇洗脱。纯化后茶黄素的纯度为44.1%。各单体纯化条件与上述纯化条件不尽相同,单体纯度与纯化条件密切相关。