夏训对优秀皮划艇运动员铁调素等铁营养状况以及IL-6的影响

目的：探讨夏训对优秀运动员铁调素等铁营养状况以及IL-6的影响。方法：广东省优秀皮划艇运动员26人(男15人，女11人)参加测试，调查夏训前和夏训后血红蛋白、铁调素、可溶性转铁蛋白受体、血清铁蛋白、可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白、血清铁、总铁结合力、转铁蛋白饱和度以及白介素6变化情况。结果：夏训后，男运动员组铁调素和可溶性转铁蛋白受体极显著上升(P<0.01)、血清铁蛋白极显著下降(P<0.01)，可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白显著上升(P<0.05)，总铁结合力显著下降(P<0.05)，白介素6极显著上升(P<0.01)。女运动员组血红蛋白显著降低(P<0.05)，铁调素和可溶性转铁蛋白受体极显著上升(P<0.01)，血清铁蛋白极显著下降(P<0.01)，可溶性转铁蛋白受体/log铁蛋白极显著上升(P<0.01)，白介素6极显著上升(P<0.01)。结论：夏训可引起运动员炎症因子升高、铁调素升高，导致功能铁不足；铁调素介导的铁代谢紊乱可能是运动性低血色素发生的重要原因。     

鳜hepcidin cDNA的分子克隆及序列分析

Hepcidin是近年来发现的一类具有独特性质的抗菌肽，根据C-enBank中收录的鱼类抗菌肽hepcidin的cDNA序列设计一对简并引物，用RT-PCR方法从鳜（Sinipercachuatsi）肝脏组织中克隆到hepcidin的cDNA，并构建pMD18-T-hep-cidin载体进行序列测定和分析。结果表明，该cDNA长为381bp，其中第20-277位是该基因的开放阅读框（ORF），编码86个氨基酸，形成由信号肽（24个残基）、前肽（42个残基）和成熟肽（20个残基）3部分序列组成的前体肽，与已报道的其他鲈形目鱼类hepcidin相比较，核苷酸序列的同源性为72．2％-92．0％，所推导的成熟肽与包括人类在内的其他生物hepcidin成熟肽的同源性在50％-86．4％，都含有8个保守的cys残基，可形成4个链内二硫键。鳜hepcidin cDNA片段的获得为以后的重组表达奠定了实验基础，也为抗菌肽hepcidin家族找到了新的成员。     

牙鲆抗菌肽hepcidin基因在成鱼组织和不同发育时期胚胎中的表达分析

抗菌肽hepcidin是由hepcidin基因编码产生的小分子多肽,是机体天然免疫的重要因子。本文利用RT-PCR的方法分析表明,抗菌肽hepcidin基因在牙鲆成鱼不同组织和不同发育时期胚胎中普遍表达,但是表达水平存在着明显的差异。     

大菱鲆抗菌肽基因酵母表达载体的构建及表达

将大菱鲆（Scophthalmus maxinus）hepcidin基因成熟肽序列经过部分改造后采用PCR方法克隆到毕赤酵母胞内表达载体pGAPZB中,构建了重组胞内表达载体pGAPZB—tbhep6his。用BlnI线性化重组质粒后,电击转化毕赤酵母SMD1168。经过Zeocin筛选和PCR扩增转化子基因组筛选,得到了数株基因工程酵母菌。通过SDS—PAGE和Western blot鉴定,发现目的蛋白与预期蛋白的分子量相吻合,并能与特异抗体antihis特异性结合,表明大菱鲆抗菌肽hepcidin基因在酵母菌中进行了表达。大菱鲆抗菌肽酵母表达载体的构建和表达为进一步研究该抗菌肽的功能并开发新型鱼类饵料奠定了理论基础。     

Feeding ragworm (Nereis virens Sars) to common sole (Solea solea L.) alleviates nutritional anaemia and stimulates growth

Common sole fed with commercial pellets develop anaemia and are restricted in their growth performance. The anaemia can be the result of a difference in feed intake, a nutritional deficiency, an inflammatory response to infection or combinations of these aspects. In this study, it was investigated whether feeding ragworm would alleviate the anaemia and stimulate growth. Sole were fed one of three diets: a commercial feed, a commercial feed treated with ragworm extract or chopped ragworm. By comparing groups, three hypotheses were tested: (1) feeding ragworm alleviates the anaemia and positively affectS the sole's metabolic performance reflected in feed intake, feed efficiency and growth; (2) anaemia is alleviated by a higher feed intake when feeding ragworm and (3) anaemia is caused by an inflammatory response to infection. The sole fed with a commercial diet suffered from anaemia. Feeding sole with ragworm alleviated the anaemia as the average haematocrit level nearly doubled in these fish as compared to fish fed pellets. Investigation of the expression of genes in the liver indicated that the anaemia in sole fed pellets is a nutritional anaemia and not an anaemia due to an inflammatory response. Sole fed ragworm showed improved growth which may be a consequence of the higher haematocrit levels in these fish increasing their oxygen carrying capacity. Addition of ragworm extract to the pellets levelled the feed intake between pellets and ragworm, but did not improve the anaemic state of sole and had only a limited effect on growth.     

铁过量或缺乏对新生仔猪血清生化指标及肝脏hepcidin mRNA表达量的影响

本试验旨在研究铁过量或缺乏对新生仔猪血清生化指标及肝脏hepcidin mRNA表达量的影响.挑选新出生的“杜长大”三元杂交仔猪15头[平均体重为(1.22±0.13)kg],随机分为3组,即缺铁组、正常组和铁过量组,每组5个重复,每个重复1头猪.3和7日龄时,缺铁组分别注射1 mL生理盐水,正常组分别注射1 mL右旋糖酐铁(含铁150 mg),铁过量组分别注射3 mL右旋糖酐铁(含铁450 mg).7日龄时,将所有仔猪全部处死,采集血清,并分离肝脏和脾脏,以测定血清生化指标、机体铁含量和肝脏hepcidin mRNA表达量.结果表明:肝脏、脾脏和血清中铁的含量均随着注射铁量的增加而显著或极显著增加(P ＜0.05或P＜0.01).与正常组相比,铁过量组血清中血红蛋白、球蛋白、总蛋白、丙二醛含量以及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化物酶活性显著或极显著升高(P＜0.05或P＜0.01),超氧化物歧化酶活性显著降低(P＜0.05);而缺铁组血清中血红蛋白、球蛋白、总蛋白、丙二醛含量以及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性则显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),超氧化物歧化酶活性显著升高(P＜0.05).与正常组相比,铁过量组仔猪肝脏中hepcidin mRNA表达量极显著升高(P＜0.01),而缺铁组则极显著降低(P＜0.01).由此得出,铁过量或缺乏均会影响新生仔猪机体的免疫功能和抗氧化功能;铁过量可提高新生仔猪机体铁含量和肝脏中hepcidin mRNA表达量,铁缺乏则会降低新生仔猪机体铁含量和肝脏中hepcidin mRNA表达量.     

血红素铁对妊娠母鼠繁殖成绩及组织铁调基因表达的影响

本试验旨在探索血红素铁与硫酸亚铁(FeSO_4)对妊娠母鼠繁殖成绩,妊娠母鼠组织与胎鼠铁含量,妊娠母鼠组织铁调素(hepcidin)、膜铁转运蛋白(Fpn)、猫白血病病毒C亚类受体(Flvcr)、转铁蛋白受体1(Tfr1)、转铁蛋白受体2(Tfr2)、二价金属转运体1(DMT1)和血红素转运蛋白(HCP)表达的影响。随机选取2月龄体况接近的昆明小鼠母鼠80只,随机分为8组,分别为对照组、缺铁组、血红素铁组(15、60、90 mg/kg血红素铁)、FeSO_4组(75、300、450 mg/kg FeSO_4),每组10只。配种受孕起对照组饲喂正常饲粮(基础饲粮中添加400 mg/kg FeSO_4);其他各组均饲喂基础饲粮,妊娠第10~13天注射40 mg/kg去铁胺(DFO),诱导妊娠母鼠缺铁模型;妊娠第14天血红素铁组和FeSO_4组开始在基础饲粮中添加血红素铁或FeSO_4,缺铁组不添加。试验期为妊娠后1~20 d。结果表明:1)60 mg/kg血红素铁组胎鼠重最高,极显著高于对照组与缺铁组(P0.01)。2)60 mg/kg血红素铁组与450 mg/kg FeSO_4组母鼠血液血红蛋白(HGB)含量、红细胞数(RBC)和红细胞容积(HCT)极显著高于缺铁组(P0.01)。3)60 mg/kg血红素铁组胎鼠铁含量最高,极显著高于对照组与FeSO_4组(P0.01);450 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏、脾脏和胎盘铁含量均为最高。4)90 mg/kg血红素铁组和450 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏hepcidin表达量较高,极显著高于缺铁组与对照组(P0.01);15 mg/kg血红素铁组母鼠肝脏Fpn、Tfr2表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01);60 mg/kg血红素铁组母鼠肝脏Tfr1、Flvcr表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01);75 mg/kg FeSO_4组母鼠肝脏Tfr1表达量较高,极显著高于对照组和缺铁组(P0.01)。5)缺铁组母鼠十二指肠Fpn、HCP、DMT1、Flvcr表达量均极显著高于对照组(P0.01)。6)缺铁组母鼠胎盘Fpn、Tfr1、DMT1、Flvcr、HCP表达量极显著高于对照组(P0.01);90 mg/kg血红素铁组和450 mg/kg FeSO_4组母鼠胎盘hepcidin表达量较高,极显著高于缺铁组与对照组(P0.01)。7)饲粮血红素铁添加量为61.00 mg/kg或FeSO_4添加量为336.11 mg/kg时,胎鼠铁含量最高;饲粮血红素铁添加量为93.49 mg/kg时,母鼠肝脏铁含量最高。综合得出,母鼠饲粮中添加适宜量的血红素铁或FeSO_4均可显著促进胎鼠增重,诱导母鼠靶组织铁调基因的表达,提高母鼠组织和妊娠20 d胎鼠机体铁含量;HCP和Flvcr在母鼠肠道对血红素铁吸收或胎盘转运起至关重要的作用,但肠道吸收或胎盘转运FeSO_4主要以DMT1和Tfr2为主。关键词:妊娠母鼠;血红蛋白;铁含量;铁调素;血红素铁     

铁调素在慢性牙周炎性牙槽骨吸收中的作用

目的 探讨铁调素（Hepcidin）在慢性牙周炎性牙槽骨吸收过程中的作用,阐明铁离子及其相关调节蛋白在牙槽骨吸收中的重要生物学意义,以期为探索出有效地防治牙槽骨吸收的方法提供理论基础。方法 检测慢性牙周炎患者龈沟液（GCF）中铁离子、核因子KB受体活化因子配体（RANKL）、骨保护素（OPG）的表达水平,分析铁离子的含量与RANKL和OPG表达的相关性以及铁离子的含量与牙周炎性牙槽骨吸收的关系。结果 20例慢性牙周炎组受检牙GCF中铁离子、Hepcidin和RANKL的浓度高于健康对照组（P<0.05）,OPG的浓度低于健康对照组（P<0.01）。慢性牙周炎组GCF中RANKL和OPG的浓度与该受检牙4项临床指标：牙周探诊深度（PD）、附着丧失（AL）、菌斑指数（PLI）、龈沟出血指数（SBI）无相关（P>0.05）,铁离子浓度与Hepcidin浓度呈正相关（P<0.01）,与RANKL浓度呈正相关（P<0.05）,与OPG浓度无相关（P>0.05）。结论 慢性牙周炎导致的牙槽骨吸收与局部Hepcidin升高和发生铁过载有关。     

大口黑鲈hepcidin真核表达载体构建及表达的初步研究

将大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗菌肽hepcidin cDNA定向插入真核表达载体pPICZαA,通过SacI酶切线性化重组表达质粒pPICZαA-hepcidin,电转化毕赤酵母P.pastoris GS115,PCR扩增筛选,甲醇诱导表达等进行了hepcidin真核表达工程菌株的构建及诱导表达。结果显示:hepcidin cDNA成功插入表达载体pPICZαA,并整合到酵母基因组中;经甲醇诱导,RT-PCR检测显示hepcidin cDNA在酵母细胞中成功转录。