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【目的】对小鼠胚胎干细胞(mESCs)转染条件进行优化。【方法】分别将0.5×105,1×105,2×105,4×105个细胞接种24孔板(各细胞量均接种2孔),培养48h在其细胞融合度分别为30%,50%,70%,90%左右时,分别设置相同的(0.8μgDNA/2μL脂质体)和不同的DNA/脂质体用量(DNA量(μg)/Lipo量(μL)分别为0.4/1,0.8/2,1.6/4,3.2/8),采用脂质体(LipofectamineTM2000)转染法,将pEGFP-N1报告基因载体转染到mESCs中,48h后通过荧光观察和流式分析检测各组EGFP荧光强度,比较转染效率。【结果】在质粒及脂质体用量相同(0.8μgDNA/2.0μL脂质体)的条件下,随着细胞融合度的增加,EGFP荧光强度逐渐减弱,在细胞融合度为30%,50%,70%,90%左右时转染,各组EGFP阳性细胞率分别为56.4%,51.8%,40.8%和23.3%。提高转染质粒及脂质体量可在一定程度上提高转染效率,但脂质体的细胞毒性也随之增加,不利于细胞生长。【结论】低融合度(30%~50%)条件下,使用0.8μgDNA/2.0μL脂质体对mESCs进行转染,可获得较高的转染效率(50%),同时可维持良好的细胞状态。 相似文献
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基于数据的可获得性和指标的可比性等基本原则,构建了包括3个一级指标和6个二级指标的湖北省农村三产融合评价指标体系,并利用熵值法和逼近理想解排序法(Technique for Order Preference by Similarity to Ideal Solution,TOPSIS),对当地农村三产融合水平进行测度。结果表明:2016—2020年,湖北省16个市(州)的农村三产融合程度不断加深,其中荆门市农村三产融合度最好,鄂州市农村三产融合度最差,各地区间农村三产融合发展水平虽然都呈现波动上升的趋势,但发展水平不均衡。基于此,提出推进湖北省农村三产融合的措施:正视地区间差异、注重农产品精细加工、完善农村基础设施、鼓励发展乡村旅游业等。 相似文献
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以新型城镇化为背景,基于河西走廊五个地级市城乡社会经济面板数据,利用熵权法并结合德尔菲法确定指标权重,采用线性加权法计算城乡关联度、城乡协调度和城乡融合度,对河西走廊各地市的城乡关系进行综合评价。结果表明,2001-2012年河西走廊五市城乡关联度水平整体不断提高,关联度值平均提高0.266,但各城市之间存在差异,其中武威市从0.174提高到0.406,关联度最低,嘉峪关市从0.495提高到0.793,关联度最高。城乡协调度呈不同程度递增的趋势,武威市协调度最低,2012年仅为0.287,嘉峪关市由0.486增长到0.629,协调度最高,城乡关系趋于良性互助。城乡融合度普遍较低,但均呈增长趋势。总体而言,嘉峪关市城乡关联度、城乡协调度以及城乡融合度水平最高,之后依次为金昌、酒泉、张掖、武威。河西走廊各市城乡关系以2004-2012年期间嘉峪关市的"强中型"为最优,以2001年武威市的"双弱型"为最弱。 相似文献
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城乡一体化是一个长期、复杂、渐进的过程。在这个过程中,既表现出纵向演进的阶段性,又表现出横向发展的地区差别性。因此,科学测评城乡融合度,有利于客观展现城乡一体化综合水平的发展趋势和地区差异。合作市是甘南州州府所在地,是全州的政治、经济、文化活动中心,其城乡协调的发展态势对全州具有很强的示范带动作用。采用主成分分析法与层次分析法,计算了合作市2000~2008年间的城乡协调度,结果表明:2000~2008年,城乡经济融合度的指数值从3.09持续扩大到15.58,城乡经济差距逐年拉大;人口融合度指数由0.32逐渐提升到0.42,城镇化进程缓慢;社会融合度由0.70提升到1.46,社会融合度较好,但城乡社会事业发展整体较低;生活融合度由4.49下降到2.60,城乡差距逐渐缩小,但城乡差距依然较大。 相似文献
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以湖北十堰市为研究对象,构建农村一二三产业融合度测评体系,运用灰色关联分析法对其农村一二三产业融合度进行测评,得出了十堰市农业与其他17个细分产业12年平均的灰色关联度以及排序,从完善各参与主体准入制度、加强基础配套设施建设和连篇产业融合协同发展等方面提出了十堰市农村一二三产业融合发展的对策建议。 相似文献
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为应对高等教育改革和就业压力,工商管理专业的建设需要专业教育与创业教育并重发展,而课程体系最为其核心环节之一显得尤为重要,因此本文在分析了工商管理专业+创业课程体系的重要性,从知识结构、实践体系、融合度等方面探讨了工商管理专业+创业课程体系建设的问题,提出了优化知识体系,加强实践体系建设和专业与创业的融合的路径选择,希望对改革专业发展方向,提升教育质量有所裨益。 相似文献