苹果果肉总蛋白提取及双向电泳分析

以苹果果肉为试材,通过比较总蛋白不同提取方法 (TCA-丙酮沉淀法、匀浆法以及改良酚抽提法),建立适于苹果果肉总蛋白提取技术。从所得双向电泳图谱分离效果来看,改良酚抽提法所得蛋白点个数最多、图谱背景清晰,分离效果好,明显优于TCA-丙酮沉淀法和匀浆法。同时,通过对各图谱分离效果的综合比较,认为在现有研究条件下,苹果果肉总蛋白双向电泳分析的理想上样量为250μg。     

苹果属植物寄主应答病原菌胁迫的蛋白质组学研究进展

苹果基因组研究的不断深入,为苹果属植物蛋白质组学研究奠定了基础。近年来,蛋白质组学分析方法在探讨苹果属植物应答病原菌胁迫时,所启动的抗病相关蛋白的差异表达,以及相关抗病机制方面发挥了重要作用。本文针对近年来蛋白质组学研究技术在果树上的应用,综述了苹果属植物应答火疫病、褐斑病、黑星病等主要病害胁迫的蛋白质组学研究进展,分析了蛋白质组学分析技术在苹果属植物相关研究中存在的问题,以期为进一步探究苹果属植物抗病的分子机制提供参考。     

苹果LIM基因家族生物信息学及表达分析

【目的】在苹果全基因组中鉴定LIM,通过分析启动子作用元件、保守结构域、基因聚类、基因结构、染色体定位以及组织表达模式,为研究和利用苹果LIM奠定基础。【方法】利用苹果基因组数据库GDR和PLAZA,获得苹果LIM家族成员并进行编号。苹果LIM蛋白氨基酸序列的基本信息通过ExPASy Proteomics Server进行预测,利用Cell-PLoc进行亚细胞定位预测,利用CD-Search Tool进行LIM结构域分析,采用MEGA 7软件构建进化树,采用GSDS绘制基因结构,并利用TBtools软件对鉴定得到的MdLIM进行染色体定位,通过实时荧光定量RT-PCR对MdLIM的组织表达进行分析,并利用SPSS 18.0软件分析差异显著性。【结果】共鉴定得到11个苹果LIM家族成员,这些MdLIM蛋白包含96—222个不等的氨基酸残基,等电点分布在6.14—9.01。亚细胞定位结果显示,MdLIM蛋白在细胞核中均有分布。启动子作用元件分析表明,11个MdLIM启动子上分布有响应激素、环境适应性和逆境诱导的元件。蛋白保守结构域分析表明,11个MdLIM蛋白中除MdLIM8具有单LIM结构域外,其余10个均具有双LIM结构域。根据聚类分析结果可将MdLIM分为4组。染色体定位结果显示,MdLIM分布在苹果17条染色体中的7条,且MdLIM在7条染色体上的分布不均匀。花、叶、果皮和茎中的实时荧光定量RT-PCR结果显示,4个组织中均能检测到MdLIM的表达,且表达量具有一定差异。【结论】苹果LIM基因家族包括11个成员,进化上可分为4组,11个基因分布于7条染色体上,在不同组织中的表达具有多样性和特异性。     

苹果MADS-box转录因子的生物信息学及其在不同组织中的表达

【目的】分析已知苹果（Malus×domestica）MADS-box基因基本信息,研究其在不同组织中表达情况。【方法】利用NCBI数据库查询并获得苹果MADS-box基因,采用CLC Combined Workbench version 6、WebLogo 3、MEGA4.1、MapInspect和MEME等软件对其蛋白序列进行生物信息学分析。采用RT-PCR技术研究MdMADS基因在不同组织中的表达情况。【结果】共得到26个苹果MADS-box基因。MADS-box结构域分析显示,氨基酸10（I）、16-19（RQVT）、22-23（KR）、29-31（KKA）、33（E）、37-39（LCD）、42（V）和48（S）是保守不变的。保守元件分析表明,苹果MADS-box基因包含4个保守元件：元件1、3为MADS盒;元件2、4为K盒。所有苹果MADS-box蛋白都包含有MADS盒（除MdMADS9）和K盒。进化树分析结果显示,苹果MADS基因共分为5个亚组。MdMADS1、3、4、6、7、8、11、18属于SEP亚组;MdMADS2、5、12属于AP1亚组;MdMADS10、14、15、19、22和MdAGL属于AG亚组;MdMADS16、17、21、MdSOC1、MdSOC1a和MdSOC1c属于SOC1亚组;MdMADS13、23和MdPI属于AP3亚组;MdMADS20属于SVP亚组。染色体定位分析显示,MdMADS在8号染色体上分布最多,共有4个;其次是染色体2、14和17,均分布3个;染色体1、5、6、7、11和16均分布1个;染色体3、4、12和15则没有分布。RT-PCR结果分析显示,SEP和AGL亚组表达模式较为一致,主要在花和果实中表达;AP1亚组除在花和果实中表达外,在其它组织器官中也有表达。【结论】苹果MADS-box基因结构高度保守,多数成员参与调控花和果实发育过程。     

黄色苹果新品种‘华月’

‘华月’苹果是以‘金冠’为母本,‘华富’为父本杂交育成的新品种。果实圆柱形,平均单果质量230g;果皮黄色,阳面带红晕;果肉肉质,似‘富士’风味。晚熟,抗寒,高抗苹果早期落叶病、果实轮纹病。     

温室膜下滴灌灌水控制下限与番茄产量、水分利用效率的关系

 【目的】在探讨温室膜下滴灌不同生育时期灌水控制下限与番茄产量、水分利用效率的关系的基础上，找出适宜的番茄生育前、后两时期灌水控制下限组合。【方法】采用了日光温室小区作物栽培试验的方法，对试验数据做多元回归分析。【结果】番茄的耗水量多少、产量的高低是番茄生育前期和后期灌水控制水平综合作用的结果；后期灌水控制下限的高低对于全生育期灌水量的影响要高于前期，而前期灌水控制下限对产量的影响比后期更加明显；水分利用效率随番茄产量增加呈抛物线型变化，当产量为9.69 104 kg·ha-1时，水分利用效率有最小值62.28 kg·m-3。【结论】温室覆膜滴灌栽培番茄，应将各个生育时期的灌水控制下限控制在适宜范围内，综合考虑节水、增产和提高劳动生产率等多种因素，番茄生育前期和后期灌溉控制下限土壤水吸力值分别控制在20和60 kPa左右为宜；与番茄生育后期相比更应加强对番茄生育前期的水分调控管理。研究结果可为温室覆膜滴灌蔬菜栽培的水分合理调控提供理论依据。     

苹果实生树阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析

 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS-PAGE）分析了6株苹果实生树（‘红玉’ב金冠’）叶片中蛋白质随节位升高的动态变化。结果表明,随节位升高蛋白质带发生变化,共发现了3条阶段转变特异蛋白质带,分子量分别为55 kD、19 kD和17 kD。其中55 kD蛋白质表现为定性变化,有5株实生树在36～75节出现,到101～126节消失;19 kD蛋白质在实生树低节位含量高,在86～100节之后含量突然降低;17 kD蛋白质在实生树低节位含量低,随着植株的发育蛋白质在36～50节含量突然增加并保持稳定,到91～105节后含量突然下降。认为这3种蛋白质是苹果实生树阶段转变的特异蛋白质。     

我国猪肉贸易条件变化及影响因素

猪肉贸易条件的变化决定着我国参与国际生猪产业国际分工的收益。分别计算我国猪肉价格贸易条件与收入贸易条件,发现我国猪肉贸易条件总体呈现恶化趋势。我国是猪肉进口大国,猪肉贸易条件恶化增加了居民猪肉消费开支。我国是猪肉出口小国,猪肉贸易条件恶化不利于猪肉出口企业收入的增加。我国可以充分利用他国对生猪产业的补贴政策,适度进口优质猪肉,提高消费者福利水平。同时,加大猪肉进出口促进力度,获取猪肉自由贸易的收益。     

奶牛胎衣不下发生原因分析与防控措施

本文结合笔者多年的临床总结和理论研究,对奶牛胎衣不下的发病机理、发病原因及针对不同类型胎衣不下的防控措施进行了较系统的总结分析,以供奶牛养殖一线兽医工作者参考。