竹山县马铃薯晚疫病发生规律研究

平均气温大于17.1℃开始发病,当平均气温在18℃～23℃,夜间温度在10℃左右,多日阴雨后天晴5天晚疫病大流行,高温高湿发病重,随着温湿系数的增大,流行速度增快.不同品种带菌不同,发病程度不同;海拔对发病程度无影响,只影响发病期;不同播种期发病情况有差异,播种期晚,发病晚.     

日本盛冈地区部分牧场考察报告

2008年3月30日至4月6日．笔者在日本岩手大学学术交流期间．考察了日本盛冈地区的小岩井农场的牧场、花平牧场和御明神牧场。现把考察的基本情况和体会总结如下．以便为从事养牛业的人士提供参考和借鉴。     

新疆垦区奶牛乳房炎致病菌的调查

本试验选取新疆垦区7个试验牛场，经临床调查和试剂诊断，检测奶牛712头，采集奶牛乳房炎阳性乳样314份．其中，奶牛隐性乳房炎阳性检出率平均为36．3％，临床性奶牛乳房炎为16．7％．采集阳性奶样经实验室分离鉴定，革兰氏阳性菌仍是引起奶牛乳房炎的主要致病菌，但金色葡萄球菌已基本取代链球菌成为主要的致病菌，其检出率为78．98％．另外，常见环境性致病菌如沙门氏菌、大肠杆菌已明显减少，检出率仅为21．1％和9．24％．相反，绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌的检出率明显增加，其检出率为5．41％和11．15％，而且绿脓杆菌和隐球菌已经引起临床性乳房炎的爆发，其中隐球菌已经成为造成顽固性乳房炎的又一种新型病原。     

绵羊白细胞内的慢病毒cDNA gag基因的PCR检测

对5只新疆卡拉库尔羊进行绵羊慢病毒免疫琼脂凝胶扩散检测试验,3只阳性,2只阴性,然后采用PCR技术,以绵羊外周血白细胞基因组为模板,扩增绵羊慢病毒gag基因,将该基因克隆到pBS-T载体上,将重组子转入感受态细胞DH5α,用IPTG/X-gel筛选阳性菌落,通过菌落PCR,酶切初步鉴定后测序,结果表明PCR的检测结果和AGIDT的结果一致,所测序列与Genbank中的Visna病毒的gag基因序列有一定的同源性.     

山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株表达载体的构建

PCR扩增山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55的TK（Thymidine kinase）基因作为侧翼序列;用XhoⅠ/NotⅠ消化含有报告基因的质粒pLSEG得到痘苗病毒（Vaccinia virus,VV）p7.5启动子调控大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶（E.coli.gpt）作为报告基因;人工合成VV I1L启动子用于调控表达外源基因,用Overlap PCR的方法将VV I1L启动子和VV p7.5启动子调控的gpt连接但使两启动子转录方向相背,并在VV I1L启动子下游引入XhoⅠ位点作为外源基因的插入位点,构建成表达载体元件I1L-P7.5-GPT。将I1L-P7.5-GPT插入TK基因的Acc65Ⅰ位点,构建成表达载体。将构建的载体转染山羊痘病毒G14-STV44-55株感染的羔羊睾丸细胞,用含有霉酚酸（Mycophenolic acid,MPA）等筛选试剂的培养基筛选重组山羊痘病毒（rGTPV）。结果显示,构建成以TK基因为侧翼、以VV I1L启动子调控目的基因,以gpt为报告基因的表达载体pGEM-TK-I1L-GPT,成功筛选到表达gpt的rGTPV,rGTPV至少可稳定传代15代。结果表明,构建了我国山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株的表达载体;TK基因是GTPV G14-STV44-55疫苗株的复制非必需区,以TK基因为插入位点获得的重组病毒可稳定传代15代以上。     

绵羊白细胞内的慢病毒cDNA GAG基因PCR检测

采用PCR技术,以绵羊外周血白细胞基因组为模板,扩增绵羊慢病毒gag基因全长,将该基因克隆到pBS-T载体上,将重组子转入感受态细胞DH5α,用IPTG/X-gel筛选阳性菌落,通过菌落PCR,酶切初步鉴定后测序,所测序列与Genbank中的基因序列进行比对,所克隆序列与慢病毒gag基因序列一致。实验表明:在绵羊的白细胞慢病毒的cDNAgag基因的PCR检测是可行的。     

新沂市马陵山生态经济林营建模式与效益评价

总结评估新沂市马陵山生态经济林8种营建模式和6种经济林与农作物间作模式生产和经济效益，优化选择出纯桃园、纯梨园、纯柿园等3种营林模式；桃与西瓜＋萝卜、柿与小麦＋花生、桃与花生、梨与小麦＋大豆等4种经济林与农作物间作模式。     

中油4号油桃的引种表现和栽培技术

中油4号油桃为中国农科院郑州果树研究所育成,2003年春引入本地定植.通过连续4年的栽培观察,在我区表现适应性强,早实、丰产、果个大,色泽光洁亮丽,味甜可口,品质优,耐贮运,花期抗低温,耐晚霜,是一个综合性状优良的大果型甜油桃品种.目前已发展100hm2.     

畜产品中布鲁氏菌巢氏PCR快速诊断方法研究

布鲁氏菌是一种兼性细胞内寄生的动物源性致病菌,侵袭力强、传染途径多、宿主种类多。布鲁氏菌病难预防、难根除、易反复发作难治愈,人类对该菌易感,目前还尚无良好疫苗预防本病。该病受到各国政府及医学、兽医学工作者的高度重视,开展了大量的有关布鲁氏菌的研究工作,特别是在该病多发地区和国家,对其研究内容较多而且深入。据近些年报道一些常见的动物产品如肉类产品、乳制品、毛、皮、皮毛制品、动物内脏食品、精液、分泌液、胃液等储菌源,甚至鲜奶、干酪、黄油和冰淇淋都有携带布鲁氏菌的危险。这些带菌的动物产品,大大地增加了畜产品经营、生产、加工人员以及消费者感染布鲁氏菌病的机会。     

新疆绵羊种布鲁氏菌外膜蛋白OMP36的表达蛋白OMP2b基因的克隆与表达

以表达新疆绵羊种布鲁氏菌外膜抗原蛋白OMP36的表达蛋白OMP2b,探索其作为诊断抗原和分子疫苗的可能性。采用PCR扩增技术,从新疆绵羊种布鲁氏菌基因组DNA中扩增出OMP2b基因片段,将该片段克隆于原核表达载体PE-28a(+),构建成重组质粒,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测有无蛋白的表达。结果表明,获得长约1 083bp的PCR片段,序列分析结果与已知绵羊种OMP2b同源性达89.72%;SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量39 ku获得了新疆绵羊种布鲁氏菌外膜蛋白OMP36的表达蛋白OMP2b基因片段,并在大肠杆菌中实现了表达。