球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟取食行为的影响

为明确球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟幼虫取食行为及取食选择性的影响，本文通过室内控制试验，采用培养皿叶盘法，研究了共生体对亚洲玉米螟初孵幼虫和3龄幼虫的选择、非选择性取食的影响。结果表明，在48 h非选择性试验中，亚洲玉米螟初孵幼虫在球孢白僵菌-玉米共生体叶片组织（处理组）上的取食率显著低于未接种球孢白僵菌玉米叶片（对照组），第48 h时在共生体和对照玉米上的幼虫取食率分别为35.7%和62.5%，差异极显著；3龄幼虫在共生体茎秆组织上的取食率与对照组玉米差异不显著。在48 h选择性试验中，初孵幼虫在共生体玉米叶片组织上的取食率显著低于对照组，共生体玉米叶片组织上的幼虫取食率随时间的增加呈下降趋势，第48 h时在共生体和对照玉米上的幼虫取食率分别为6.3%和20.6%，差异极显著；3龄幼虫在共生体和对照组玉米茎秆组织上的幼虫取食率随时间的增加呈上升趋势，其中对照组幼虫取食率显著高于处理组，第48 h时在处理组和对照组玉米上的幼虫取食率分别为33.1%和45.6%，差异极显著。本研究初步表明，球孢白僵菌-玉米共生体对亚洲玉米螟幼虫的取食行为有显著的抑制和忌避作用。     

利用荧光观测明确载球孢白僵菌松毛虫赤眼蜂对亚洲玉米螟的防控增效作用

载球孢白僵菌松毛虫赤眼蜂能够显著提高对亚洲玉米螟的防控效果，为了明确其对亚洲玉米螟卵期及幼虫期可持续防控的作用机理，采用松毛虫赤眼蜂吸附绿色荧光蛋白（GFP）标记的球孢白僵菌分生孢子，进行赤眼蜂载菌情况，以及亚洲玉米螟卵和幼虫的寄生、侵染过程观察。结果表明，赤眼蜂羽化后能够吸附柞蚕卵表面粘附的白僵菌分生孢子，并将其携带至亚洲玉米螟卵块表面，并吸附于未被赤眼蜂寄生的亚洲玉米螟卵孵化的幼虫体表，实现侵染并致死，幼虫带菌率达60.00%，网室内杀虫生物测定僵虫率达27.00%。本研究表明，载菌赤眼蜂在提高杀虫效率的同时实现害虫可持续防控，该方法为其他载菌天敌的应用提供了依据。     

松毛虫赤眼蜂携带球孢白僵菌防治亚洲玉米螟技术研究与应用

高效的载菌技术是提高载菌赤眼蜂防治效果的重要基础。本研究对比了不同吸附助剂对松毛虫赤眼蜂羽化时间、羽化量、存活时间及载菌量影响，证明了不同助剂及吸附球孢白僵菌分生孢子后对赤眼蜂无不利影响。试验结果表明，0.1%（w/v）淀粉溶液作为吸附助剂可显著提高赤眼蜂的载菌量，达3.6×10⁴孢子/蜂以上，并应用该助剂建立了赤眼蜂高效携带白僵菌方法。从被害株数、蛀孔数、活虫数和僵虫数4个方面测定了载菌赤眼蜂田间防治玉米螟效果。结果表明，载菌赤眼蜂较单一使用赤眼蜂防治效果显著提高，被害株数、蛀孔数和活虫数均显著降低，分别降低了28.1%、22.8%和24.5%，并且载菌赤眼蜂处理组中僵虫数量显著高于单独使用赤眼蜂处理组，说明载菌赤眼蜂对玉米螟具有协同防控作用。利用该方法进行玉米螟田间防治，能够降低防治成本，提高防治效率，节约劳动力，具有巨大的应用和推广价值。     

公主岭霉素在水稻育秧期应用技术研究

研究了公主岭霉素对水稻发芽率和幼苗建成主要生长指标的影响及其不同施药方式下公主岭霉素在室内模拟条件中水稻育秧期生长指标的差异,初步确定了不同施药方式的最佳施药量,并在实际生产中从幼苗长势和苗期主要病害发生状况两方面综合考虑,探讨了公主岭霉素在水稻育秧期应用的可行性。实验结果表明,公主岭霉素在水稻育秧期施用,对水稻幼苗建成的影响主要表现在促进种子发芽率和幼苗株高的提升上,对根的伸长略表现出抑制作用,对苗鲜重和根鲜重影响不显著,其中对于株高的影响以2 000倍稀释液作用效果最为显著,比清水对照提高26.09%,比芸苔素内酯1 000倍稀释液提高17.57%;比较公主岭霉素浸种、喷施和拌土三种不同施药方式,公主岭霉素最适施药量略有不同,公主岭霉素拌土最适比例为1∶1 000～1∶1 500,浸种最适浓度为500倍稀释液,播种后喷雾浇灌最适浓度为2 000倍稀释液。大棚生产性育秧公主岭霉素最适施药浓度较实验室模拟条件略高。公主岭霉素在水稻育秧期施用对于苗期恶苗病具有一定的防治效果,本研究中对恶苗病的防效最高为65.50%。     

大豆细胞质雄性不育系配套保持系线粒体基因组BAC文库的构建

以大豆细胞质雄性不育系配套保持系材料(JLCMSl)的黄化苗为材料,纯化得到线粒体.低熔点琼脂糖包埋线粒体成胶块,消化裂解后用HindⅢ部分酶切,通过脉冲场电泳回收40～60kb酶切片段.将回收产物连接到载体pIndigo-BAC 5,通过电击转化大肠杆菌DH10B感受态细胞,获得的BAC文库包含2 000个单克隆,平...     

白三叶基因工程改良研究进展

白三叶（Trifolium repens L.）作为优良牧草和地被植物具有重要的应用价值。但其耐盐碱、干旱能力差等原因致使应用受到广泛限制,转基因技术的快速发展为白三叶种质创新提供了有效技术手段,为开展白三叶分子育种奠定了基础。本文就近30年来有关白三叶组织培养、转化方法、转基因遗传改良方面的研究进展进行了综述,并对其应用进行了展望。     

一株铰链孢属真菌培养条件及激活蛋白的提取

本研究以PD培养液为测定培养基,对一株铰链孢属(Alternaria spp.)真菌的培养条件进行了初步研究,通过正交试验设计,确定其最佳培养条件为26℃,160 r/min,装液量120 mL/250 mL,培养72 h时菌丝干重量最高。使用超声波破碎法,从所培养的铰链孢属真菌中提取到分子量为42～43kD的激活蛋白。     

吉林省球孢白僵菌遗传多样性与亚洲玉米螟化性相关性分析

利用ITS序列分析和ISSR分子标记对吉林省玉米主产区的49株寄生亚洲玉米螟的球孢白僵菌进行了遗传多样性分析。ITS序列分析表明,各菌株间的亲缘关系与其地理来源无关。分别根据9个采集地,以及寄主化性类型划分供试菌株类群,利用ISSR分子标记技术进一步分析表明,不同地理类群中榆树地区的遗传多样性最高,双辽地区最低;双辽和通化地区间的遗传分化系数最高,梨树和通化地区间的遗传距离最大。根据寄主化性类型划分类群得出一代玉米螟分离菌株遗传多样性指数最高,一代兼二代区最低;一代兼二代区菌株遗传分化系数最高,而一代区和二代区的遗传距离最大。由此可见,吉林省球孢白僵菌遗传多样性水平较高,种群的异质性较强,遗传多样性同地理位置无关,与寄主化性类型存在相关性。     

球孢白僵菌分离培养基的筛选及应用

为获得理想的白僵菌分离培养基,以PPDA培养基作为基础培养基,通过观察白僵菌和杂菌在不同抑菌剂和不同抑菌剂浓度的菌落数,筛选出白僵菌生长良好,杂菌被尽可能抑制的培养基配比。结果表明,在PPDA培养基中添加70 mg/L的多果定,125 mg/L头孢霉素和138 mg/L硫酸卡那霉素为最适筛选培养基。用筛选出的培养基检测白僵菌悬乳剂和颗粒剂在田间施药后30天内的含菌量变化,发现在空气中孢子含量,白僵菌悬乳剂比颗粒剂含量更持久,证明本研究获得的筛选培养基具有实际的应用价值。     

放线菌769抑菌谱及液体培养生长曲线的测定

离体抑菌实验表明,放线菌769对植物病原真菌具有广谱的抑制活性。不同种类病原菌对其敏感性有一定的差异。对水稻稻瘟病病菌、玉米大斑病病菌、高粱散黑穗病病菌、玉米穗腐病病菌、葱紫斑病病菌、番茄炭疽病病菌等16种植物病原真菌均有明显抑制效果。同时,首次对放线菌769的液体培养条件进行了探索,通过比浊法、测菌丝体干重法、抑菌圈直径等方法,测定了放线菌769的生长曲线。其在YEME培养基中摇床振荡培养时的生长曲线,0～36 h为生长延迟期,36～84 h为对数生长期,84～108 h为稳定期,108 h以后为衰亡期。