马铃薯原原种椰糠基质繁育技术规程

从范围、规范性引用文件、术语和定义、栽培设施、繁育技术、基质重复利用等方面规范了马铃薯原原种椰糠基质繁育技术。     

马铃薯卷叶病毒PLRV RT-LAMP检测方法优化

马铃薯卷叶病毒Potato leafroll virus(PLRV)是目前严重影响马铃薯产量与品质的主要病毒之一,给马铃薯产业造成巨大损失。本研究采用环介导等温核酸扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术建立PLRV的RT-LAMP检测方法。采取单因素变化试验,对RT-LAMP反应体系中多个因素包括引物组合、温度条件及Mg~(2+)、betaine、Bst 3.0 DNA聚合酶、dNTPs、UNG、SYBR GreenⅠ和引物组合的浓度进行一系列试验和优化。采用RT-PCR检测方法进行平行比对试验,对优化后的RT-LAMP反应体系进行了验证。结果表明,最佳引物组合为P3,最适反应温度62℃,25μL反应体系中,Mg~(2+)、betaine、Bst 3.0 DNA聚合酶和UNG的最佳终浓度分别为4 mmol/L、0 mmol/L、0.64 U/μL和0.08 U/μL,dNTPs的最佳用量为1μL(dATP、dGTP、dCTP各0.4 mmol/L,dUTP 1.2 mmol/L),SYBR GreenⅠ(20×)的最佳用量1μL,primer mix的最佳用量2.5μL(PLRV-FIP/BIP、PLRV-F3/B3和PLRV-LF/LB的浓度分别为0.8、0.2μmol/L和0.6μmol/L),RNA模板1μL(2 ng/μL),加DEPC-H_2O至25μL,反应时间50 min。优化后的RT-LAMP检测结果与RT-PCR一致,且可视化判读结果。因此,建立的PLRV RT-LAMP检测方法为进一步开发RT-LAMP检测试剂盒及其实际应用奠定了基础。     

苦水玫瑰快繁技术体系研究

以甘肃苦水玫瑰外植体为试验材料,研究了苦水玫瑰组培苗的诱导、增殖、继代、生根与移栽技术体系。结果表明,甘肃苦水玫瑰组培苗的诱导与增殖培养基以 WPM+6-BA1.5 mg/L最佳,增殖倍数可达 3.56;继代4次后,丛生芽增殖倍数达到5.43倍。瓶内生根培养基以 WPM+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.3 mg/L为佳,生根率可达82.68%。试管苗采用苗床栽培,用腐殖质、田园土和蛭石作基质,在50%遮阴率条件下植株生长量最佳,成活率最高,为91.00%。     

外源SNP对低温下马铃薯试管苗相关酶活性的影响

以陇薯3号和陇薯6号为试验材料,研究了0.05、0.10 mmol/L SNP对4 ℃低温条件下马铃薯试管苗超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明,SNP可促进SOD、POD、CAT活性提高,减轻低温胁迫对细胞的氧化损伤度,加快细胞修复速度,促进试管苗生长。SNP浓度以0.05 mmol/L最佳。     

PEG-6000对低温下马铃薯试管苗相关生理指标的影响

在4℃低温条件下,测定了不同浓度PEG-6000胁迫马铃薯试管苗的丙二醛、可溶性蛋白、脯氨酸、叶绿素含量及超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性.结果表明, PEG-6000胁迫可使低温下马铃薯试管苗丙二醛含量增加,脯氨酸、叶绿素含量发生变化,酶活性表现出不同程度的上升趋势.     

建立陇东旱塬夏播(复种)马铃薯生产基地刍议

分析了甘肃马铃薯生产现状及进一步扩大种植面积存在的困难及问题，讨论了建立陇东旱塬夏播(复种)马铃薯生产基地的必要性和可行性，并提出了建立陇东旱塬夏播(复种)马铃薯生产基地的发展建议:优化品种结构，示范推广优质专用新品种；进一步优化夏播马铃薯丰产栽培技术，规范脱毒种薯繁育体系；组建马铃薯产业联合体，助推马铃薯产业转型升级；完善政策支持机制，保障马铃薯产业发展。     

2014 — 2018年我国马铃薯病虫草害防治农药登记现状分析

为方便马铃薯生产和研究者参考，梳理了2014 — 2018年我国在马铃薯病虫草害防治药剂登记的类型、剂型、防治对象、有效成分、作用机制等。     

PEG与SNP对低温下马铃薯试管苗相关生理指标的影响

研究了在4℃低温胁迫下,5%聚乙二醇PEG-6000和0.10mmol/LSNP分别处理,5%PEG-6000与0.10mmol/LSNP同时处理对陇薯3号马铃薯试管苗的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性和对丙二醛(MDA)、可溶性蛋白、游离脯氨酸及叶绿素含量的影响。结果表明,4℃低温下,PEG-6000和0.10mmol/LSNP都可以胁迫试管苗,导致其酶活性、MDA、可溶性蛋白、脯氨酸和叶绿素含量都有所上升,其中0.10mmol/LSNP可以显著提高上述各项生理指标,并在和5%PEG-6000共同处理时缓解PEG造成的渗透胁迫。     

马铃薯卷叶病毒RT-LAMP检测方法的建立

为建立一种快速准确检测马铃薯卷叶病毒(potato leafroll virus,PLRV)的方法,本研究以PLRV CP(coat protein,CP)基因ORF3保守序列为靶标,建立了PLRV反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测体系,并对建立的RT-LAMP检测体系的特异性、灵敏度、实际应用效果进行评估。结果表明,建立的PLRV RT-LAMP检测方法,在62℃恒温下扩增50 min,扩增产物中加入双链嵌合荧光染色(SYBR Green Ⅰ),阳性样品颜色变为绿色,阴性样品颜色仍为褐色,可直接目测判断待检测样品是否感染PLRV。该方法只特异性检测PLRV,不与马铃薯X病毒(PVX)、马铃薯Y病毒(PVY)、马铃薯S病毒(PVS)、马铃薯A病毒(PVA)和马铃薯M病毒(PVM)等其他5种马铃薯主要病毒发生交叉反应。此外,建立的PLRV RT-LAMP检测方法的灵敏度较反转录PCR(RT-PCR)方法高100倍。田间样品检测验证,该方法与标准RT-PCR方法符合率达100%。本研究建立的以SYBR Green Ι为颜色指示的PLRV可视化检测RT-LAMP方法,特异、灵敏、便捷,成本低,可满足科研、基层单位对该病毒快速诊断和检测的需要。     

苦水玫瑰快繁技术体系研究

以甘肃苦水玫瑰外植体为试验材料,研究了苦水玫瑰组培苗的诱导、增殖、继代、生根与移栽技术体系。结果表明,甘肃苦水玫瑰组培苗的诱导与增殖培养基以WPM+6-BA1.5 mg/L最佳,增殖倍数可达3.56;继代4次后,丛生芽增殖倍数达到5.43倍。瓶内生根培养基以WPM+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.3 mg/L为佳,生根率可达82.68%。试管苗采用苗床栽培,用腐殖质、田园土和蛭石作基质,在50%遮阴率条件下植株生长量最佳,成活率最高,为91.00%。