家蚕卵黄原蛋白受体BmVgR的体外表达

【目的】克隆家蚕卵黄原蛋白受体（vitellogenin receptor, VgR）,分析其在昆虫细胞中的表达特征,了解正常VgR和突变VgR的表达模式,为阐明其生物学功能提供参考依据。【方法】基于家蚕VgR的基因编码序列设计特异引物,扩增的目的片段连接到载体pET28a上,构建原核表达载体,转化E. coil BL21（DE3）表达菌株,IPTG诱导获得目的蛋白;用镍柱亲和层析方法纯化诱导表达的家蚕VgR肽蛋白;将纯化后的肽蛋白制备BmVgR的兔源多克隆抗体;PCR扩增获得大造和突变型白妙卵（scanty vitellin,vit）的LBD1+EGF1结构域（C11D和C11V）片段,连接到细胞表达载体上,通过细胞转染表达目的蛋白,采用细胞免疫组化检测大造和突变型vit的VgR在细胞里的表达情况;通过Western blot检测细胞培养液中大造和突变型vit VgR的表达量。【结果】原核表达获得了一个大小约为22 kD的融合蛋白,以包涵体形式表达;镍柱亲和层析初纯化得到BmVgR的肽蛋白,进一步切胶纯化后,以此为抗原制备BmVgR的兔源多克隆抗体,其抗体效价＞1﹕512 000,纯度为95%以上。转录水平检测表明Sf9和Spli221昆虫细胞中没有BmVgR和BmVg内源基因的表达;在Sf9昆虫细胞中成功表达了家蚕野生型和突变型vit BmVgR的结构域SP+LBD1+EGF1肽段,家蚕突变型vit在BmVgR第1个表皮生长因子同源区域的第3个ClassB区域有编码50个氨基酸残基的核酸序列缺失;细胞免疫组化试验表明,突变型和正常型的C11V和C11D都能在Sf9细胞质中正常表达;制备的BmVgR兔源多克隆抗体和Myc标签抗体同时检测到细胞表达的目的蛋白,表明试验所制备的VgR抗体特异性较好;由于SP+LBD1+EGF1肽段存在信号肽,细胞表达的蛋白会分泌进入细胞培养液中,Western blot对培养液进行蛋白检测,表明突变型vit存在氨基酸缺失,但并不影响肽蛋白的正常表达,且表达量没有明显差异。【结论】EGF1结构域的缺失并不影响SP+LBD1+EGF1肽蛋白的正常表达,可能是其蛋白功能异常导致突变型vit表型产生。     

甘肃河西走廊出口洋葱质量安全风险及防控关键技术

洋葱在我国各地广泛种植,它不仅调剂蔬菜供应,而且是出口创汇的重要品种之一,2004年我国洋葱出口创汇8572.1万美元。近十年来,由于受内外销市场的拉动,我国洋葱产业发展突飞猛进,种植面积由1992年的25.6万hm2增加至2007年的90万     

天然多功能土壤给养保养剂TYS在小麦上的试验结果初报

在景泰县芦阳镇西林村小麦上进行的天然多功能土壤给养保养剂 (TYS)与尿素配施的小区试验结果表明 ,以基施 TYS2 4 0 kg/ hm2、尿素 6 0 kg/ hm2和追施 TYS12 0 kg/ hm2、尿素 30 kg/ hm2处理的小麦产量最高 ,较不施肥对照增产 10 .0 % ,小麦籽粒粗蛋白含量为 14 .6 % ,其次为基施 TYS180 kg/ hm2、尿素 12 0 kg/ hm2和追施TYS90 kg/ hm2、尿素 6 0 kg/ hm2处理 ,较不施肥对照增产 9.4 % ,小麦籽粒粗蛋白含量为 15 .4 3%。同时在武威市、景泰县进行的 TYS在小麦上的大区试验结果表明 ,基施 TYS180 kg/ hm2 、尿素 12 0 kg/ hm2 和追施 TYS90 kg/hm2、尿素 6 0 kg/ hm2时 ,小麦可比尿素基施 30 0 kg/ hm2、追施尿素 15 0 kg/ hm2的处理增产 3.2 %～ 10 .0 %。     

甲氰菊酯在番茄和甘蓝上的残留消解特性

研究了20%甲氰菊酯乳油不同剂量、不同栽培条件下茎叶喷洒后在番茄、甘蓝上的残留消解动态和最终残留。结果表明,甲氰菊酯在日光温室和露地栽培番茄、甘蓝中初始沉积量存在较大差异,施药剂量越大,初始沉积量越高;残留消解动态符合一级动力学方程。茎叶喷洒剂量为450 g/hm~2和900 g/hm~2时,2种施药剂量在番茄和甘蓝上的降解速率基本相似,在露地番茄上的半衰期分别为3.8、3.4 d;在日光温室番茄上的半衰期分别为4.1、4.6 d;在露地甘蓝上的半衰期为1.6、1.2 d,在日光温室甘蓝上的半衰期分别为2.5、2.8 d。2种剂量喷洒后的残留量降解到最大限量标准值所需要的时间分别为露地番茄1.6、2.9 d,日光温室番茄3.0、4.2 d;露地甘蓝3.2、3.5 d,日光温室甘蓝6.8、6.9 d。     

天然多功能土壤给养保养剂TYS在玉米上的试验初报

在景泰县芦阳镇进行的天然多功能土壤给养保养剂 (TYS)在玉米上的小区试验结果表明 ,以玉米大喇叭口期追施 TYS 36 0 kg/ hm2 、尿素 2 4 0 kg/ hm2 的处理产量最高 ,为 6 778.6 kg/ hm2 ,较对照 (空白 )平均增产16 .2 % ,粗蛋白含量为 10 .6 7% ,较对照平均增加 1.4 7个百分点 ;同时在白银市、武威市、景泰县进行的 TYS在玉米上的大区试验结果表明 ,玉米大喇叭口期追施 TYS36 0 kg/ hm2、尿素 2 4 0 kg/ hm2 ,玉米较单施尿素增产 3.7%～9.7%。说明玉米追施 TYS可降低尿素化肥用量。     

乙酰甲胺磷在辣椒上的残留消解动态研究

[目的]了解乙酰甲胺磷在辣椒上的残留消解规律。[方法]采用田间试验和气相色谱分析方法,研究了30%乙酰甲胺磷乳油在辣椒上的消解动态和最终残留。[结果]乙酰甲胺磷在辣椒中的初始沉积量因不同施药剂量存在较大差异,施药剂量越大,初始沉积量越高;残留消解动态符合一级动力学方程;1 000倍液和500倍液2种施药量的降解速率基本相似,半衰期分别为1.6和1.7 d;乙酰甲胺磷在辣椒上的最大残留量(MRL值)推荐值为1 mg/kg,1 000倍液和500倍液茎叶喷雾后,农药残留量降解到该值时所需时间分别为1.5和2.3 d,符合蔬菜质量安全标准。[结论]为乙酰甲胺磷在甘肃河西走廊及相似地区的科学合理使用提供了理论依据。     

旋幽夜蛾生物学特性与防治研究

旋幽夜蛾为杂食性害虫。通过室内外系统饲养观察,此虫在当地一年发生3代。以蛹在甜菜、胡麻、豌豆、首蓿等作物土壤中越冬,田间杂草、地埂下也能越冬,深度达10～20cm;前两代幼虫主要危害豌豆、胡麻、蚕豆等,第三代幼虫以危害甜菜为主。化学防治采用二嗪农1000倍液、水胺硫磷800～1200倍液喷洒,防效达90％。     

干旱灌溉农区蔬菜农药残留特点与控制对策

采用随机抽样的方法,于2008年每季度采集武威市蔬菜生产基地蔬菜,共150份样本,采用气相色谱法测定其中18种有机磷、13种有机氯和拟除虫菊酯类农药残留。结果表明,禁用、限用农药甲胺磷、甲拌磷、六六六、DDT是影响本地区蔬菜质量安全的主要因素,辛硫磷、乙酰甲胺磷等允许使用农药在露地蔬菜上风险较大,毒死蜱在茎类和叶菜类蔬菜中存在潜在风险。     

湛河平顶山市区段水质监测

2010年3～5月份对湛河平顶山市区段水质理化指标和微生物学指标进行监测,结果表明：湛河的水质在不同地区存在不同程度的污染,从上游到下游污染逐渐恶化。需加强水质监测与治理工作。