水牛SND1基因克隆及生物信息学分析

试验旨在利用电子克隆法对水牛SND1（staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1）基因进行克隆和序列分析，为探究该基因对水牛泌乳性能的作用机制奠定基础。以奶牛SND1基因（GenBank登录号：NM_205784.1）作为种子序列，利用Primer Premier 5.0设计3对引物，以水牛基因组DNA为模板，PCR扩增水牛SND1基因mRNA序列，扩增获得序列连接pMD18-T载体，通过测序拼接获得水牛SND1基因mRNA全序列，并对其进行生物信息学分析。结果显示，水牛SND1基因完整编码序列长为3 503 bp，包含长为2 733 bp CDS序列，编码910个氨基酸，蛋白分子式为C₄₅₂₃H₇₁₈₃N₁₂₈₁O₁₃₅₄S₂₆，分子质量为102.01 ku，理论等电点（pI）为6.74，不稳定系数为42.07，平均亲水性为-0.419，属可溶酸性蛋白。二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主，其中α-螺旋占37.80%，无规则卷曲占34.18%。结合Protfun 2.2在线软件对SND1的功能进行预测分析表明，该蛋白在嘌呤和嘧啶、中央中间代谢、能量代谢、氨基酸生物合成发挥功能的可能性分别为0.449、0.401、0.303和0.262。SND1基因编码区序列与黄牛、绵羊、山羊、猪、马、人的同源性分别为98.7%、97.8%、97.8%、93.8%、93.1%和91.7%，物种之间同源性较高，系统进化情况与其亲缘关系远近一致。利用SMART在线软件预测蛋白结构域，结果显示，水牛SND1蛋白包含有4个SN区域，说明SND1基因编码区在进化过程中较为保守。     

山羊尿中嘌呤衍生物排出规律的研究

测定瘤胃微生物蛋白质的传统方法为标记法,标记物分内源标记物和外源标记物两类.常用的内源标记物主要有二氨基庚二酸(DAPA)、核糖核酸(RNA)、氨基酸序列(AAP)、三磷酸腺甙(ATP)、磷脂胆碱(P-C)、D-丙氨酸,常用的外源标记物主要有15N、35S和32P等同位素标记[1].上述方法都需要瘘管动物,而且测定步...     

白酒糟对奶水牛泌乳性能及乳品质的影响

为验证白酒糟替代部分能量蛋白类饲料对奶水牛的泌乳性能及乳品质的影响。试验选取24头泌乳中期奶水牛,随机分成2个试验组(精料中分别添加15%和30%的白酒糟)和1个对照组,每组8头,试验期40天(其中预试期10天)。试验结果,与试验前相比,试验期间对照组与试验组的产奶量均有所下降,且随着替代量的增加,产奶量的下降幅度亦随着增大,但差异不显著(p0.05);试验组与对照组间的乳成分差异不显著(p0.05),但总体品质有所下降,且下降幅度随替代量的加大而有所增大。结论:奶水牛精饲料中添喂白酒糟虽对乳品质有所降低,但对乳的产量及乳品质的影响均不显著(p0.05),白酒糟可替代部分能量蛋白饲料应用于奶水牛饲养,但替代量不宜过大,应控制在15%左右。     

水牛MFSD2A基因多态性及其与产奶性状的关联分析

【目的】研究水牛主要促进因子超家族成员2a(major facilitator superfamily domain containing 2a,MFSD2A)基因多态性,并筛选与水牛产奶性状相关联的SNP。【方法】采集383头健康水牛血液DNA,利用PCR扩增和Sequenom MassARRAY飞行时间质谱技术对SNP位点进行筛选及基因型检测,并进行遗传多样性、连锁不平衡(LD)和单倍型分析,以及对不同基因型和单倍型与水牛产奶性状进行关联分析。【结果】在水牛MFSD2A基因中检出7个SNPs位点,多态信息含量(PIC)均在0.25~0.40之间,属于中度多态,除g.8290 T＞C位点外,其余位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05);关联分析结果表明,这7个SNPs位点与305 d产奶量均显著关联(P＜0.05),且突变杂合子基因型的305 d产奶量是3种基因型中最低的,g.568 C＞G和g.701 A＞G位点与乳脂率显著关联(P＜0.05),乳脂率从大到小依次为突变纯合子＞野生纯合子＞突变杂合子,g.568 C＞G、g.3326 G＞A、g.8290 T＞C和g.8523 C＞G位点与乳蛋白率显著关联(P＜0.05),7个SNPs位点与乳尿素氮关联均不显著(P＞0.05);连锁不平衡和单倍型分析结果明,g.568 C＞G、g.701 A＞G和g.3203 T＞G位点可组成一个单倍型模块(Block 1),g.8523 C＞G和g.9138 G＞T位点可组成另一个单倍型模块(Block 2)。其中g.568 C＞G和g.701 A＞G、g.568 C＞G和g.3326 G＞A、g.8523 C＞G和g.9138 G＞T位点的r²分别为0.87、0.37和0.48,处于强连锁不平衡状态。Block 1中的H1(CAG)单倍型乳蛋白率显著高于H2(CAT)和H3(GCT)(P＜0.05),Block 2中的D3(GG)单倍型305 d产奶量极显著高于D1(CG)和D2(CT)(P＜0.01)。【结论】筛选出的MFSD2A基因7个SNPs位点与305 d产奶量均显著关联,g.568 C＞G和g.701 A＞G位点与乳脂率显著关联,g.568 C＞G、g.701 A＞G、g.3326 G＞A、g.8290 T＞C和g.8523 C＞G位点与乳蛋白率显著关联,这7个SNPs位点与乳尿素氮均无显著关联。纯合子的基因型在高305 d产奶量和乳脂率的选择上更有优势,H1(CAG)和D3(GG)单倍型是提高水牛305 d产奶量和乳蛋白率的有利单倍型。     

泌乳前期水牛能量代谢及其需要量初探

本试验旨在通过析因法获得泌乳前期水牛能量需要量.选用30头体况良好、上一泌乳期泌乳量相近、产犊胎次(2、3胎)接近、健康的泌乳前期水牛,随机分为3组,每组10头,采用等粗蛋白质(13.3%)、3种能量水平的精饲料,产乳净能分别为6.0、6.6和7.2 MJ/kg.预试期15 d,正试期30 d.于正试期第24、28天分...     

日粮阴阳离子水平对围产期奶水牛泌乳性能的影响

本试验研究了日粮阴阳离子(DCAD)水平对围产期的泌乳水牛采食量、尿液pH值、泌乳初期泌乳性能的影响。选择32头2胎以上、品种、上期泌乳量、健康体况相似的处于围产期的泌乳水牛,随机分成4个组,分别饲喂DCAD水平为+139.89、+54.22、-29.11和-110.21mmoL/kg的4种日粮进行试验,试验期为产前21 d开始至产后30 d。结果表明:随着日粮DCAD水平的降低,各组间试验水牛干物质采食量无显著差异,尿液pH值随之显著降低。各组产奶量无显著差异,但可提高水牛产后泌乳量2.50%～4.86%,极显著降低水牛乳体细胞数(P<0.01);乳蛋白率、乳脂率、乳糖率均有显著提高(P<0.05)。综上所述,泌乳水牛日粮适宜DCAD水平为-110.21 mmoL/kg左右。     

日粮钙水平对泌乳水牛生产性能的影响

为了探讨日粮钙水平对泌乳水牛生产性能的影响,本试验选用12头胎次、泌乳时间、泌乳量相近的水牛,随机分成4组,每组3头水牛。采用4×4拉丁方试验方法,4组水牛基础日粮中钙含量分别占基础日粮干物质的0.47%、0.62%、0.78%、0.93%,其他营养成分均相同,其中磷占采食干物质比例为0.50%;共4期试验,每一试验期21 d,其中预饲期7 d,正饲期14 d。试验结果表明:1、不同钙水平日粮对泌乳水牛的产奶性能影响不显著(P>0.05),但0.78%钙水平日粮组水牛的产奶量分别比其他3组提高5.4%、5.5%、3.9%,不同钙水平对水牛奶营养成分影响不显著(P>0.05)。2、不同钙水平日粮对水牛血浆中钙含量影响差异显著(P<0.05);随着日粮钙水平的上升,水牛血液甲状旁腺素和1,25二羟基维生素D呈显著下降趋势(P<0.05)。综合各指标,日粮钙占采食干物质的比例为0.78%能进一步提高泌乳水牛产奶量。     

B超在水牛繁殖中的应用

<正>在畜牧生产上,国外起步较早,B超已广泛应用到早期妊娠诊断、胎儿性别鉴定及对胎儿状况、产后子宫恢复状况、卵巢状况的监测,还用于MOET受体的黄体检查和持久黄体鉴定及AI合适时间的建立与活体采卵等方面[1~3]。在国内由于经济上和技术上的原因,兽用B超诊断仪并没有得到普遍应用,B超诊断仪只限于几所院校和某些公司拥有,     

水牛胚胎分割技术的研究

为探讨水牛桑椹胚去致密化和不同分割方法对水牛切割胚发育效果的影响,将体外受精获得的水牛桑椹胚(第5d)和囊胚(第6~7d)分割后进行体外培养,观察其发育情况.结果显示:(1)水牛桑棋胚经去致密化处理后,其分割成功率(67.69% vs.51.71%)和囊胚发育率(58.30% vs.41.13%)均显著高于未处理组(P<0.01),但囊胚细胞数差异不显著(P>0.05);(2)以直接分割法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率、囊胚发育率和囊胚细胞数三者均无显著差异(P>0.05).可见,水牛桑椹胚去致密化有利于切割胚的成活和发育,而直接分割法和单臂分割法均可用于水牛桑椹胚和囊胚的分割.     

水牛胚胎分割技术的研究

为探讨水牛桑椹胚去致密化和不同分割方法对水牛切割胚发育效果的影响,将体外受精获得的水牛桑椹胚（第5d）和囊胚（第6～7d）分割后进行体外培养,观察其发育情况。结果显示：（1）水牛桑椹胚经去致密化处理后,其分割成功率（67．69％vs．51．71％）和囊胚发育率（58．30％vs．41．13％）均显著高于未处理组（P〈0．01）,但囊胚细胞数差异不显著（P〉0．05）;（2）以直接分割法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率、囊胚发育率和囊胚细胞数三者均无显著差异（P〉0．05）。可见,水牛桑椹胚去致密化有利于切割胚的成活和发育,而直接分割法和单臂分割法均可用于水牛桑椹胚和囊胚的分割。