“三苗两点”注射法在生猪免疫工作中的应用试验

<正>近年来,生猪强制免疫病种猪O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫苗均为单价苗,需分时段多次注射,耗时费力,生猪应激反应较大,防疫阻力增大。为进一步提高动物疫病免疫工作效率,降低动物免疫成本和村级动物防疫人员劳动强度,2013年我们应用"三苗两点"注射方法对猪O型口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病3种疫病免疫进行了探索试验,现将试验情况报道如下。1材料与方法1.1试验范围春季集中免疫期间在沙厂乡、达溪     

七彩山鸡混合感染巴氏杆菌和大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

山鸡是集肉用、药用和观赏于一身的野味珍禽。紫云县山鸡养殖是利用森林下面的虫和草资源,以放牧为主、补饲为辅的一种可持续发展的生态饲养方式,是养殖业中一种科技含量较高、成本低、有市场、效益好,能帮助农民增收、易推广的项目,通过山鸡养殖能起到使农民致富增收。     

猪瘟RT-PCR-步法检测技术的建立及应用

为了建立一种早期猪瘟病原诊断方法,试验采用RT-PCR-步法检测技术,根据猪瘟病毒(CSFV)E2基因序列合成1对特异性引物,通过确定最佳PCR反应条件对其特异性、敏感性进行测定,并对12份可疑猪瘟病毒感染的病料进行了检测.结果表明:RT-PCR-步法检测技术快速、敏感性高、特异性好,可以用于猪瘟病原的早期诊断.     

贵州省羊口疮病例分子生物学诊断

为了更好地鉴别诊断疑似羊口疮病例,采用PCR技术、分子克隆技术和生物信息技术对毕节地区羊口疮疑似病例进行实验室诊断。结果显示,从疑似病例组织病料中扩增出与预期大小相符的1137bp的B2L基因片断,且该基因核苷酸同源性与GenBank中已发表羊口疮病毒序列间的同源性为97．1％～99．1％。试验结果表明,该病例为羊口疮...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和链球菌混合感染的诊治

为快速诊断猪繁殖与呼吸综合征和猪链球菌病的病因及其有效防治提供参考,对2010年7月贵州省某猪场送检病猪(5例)进行了流行病学调查、剖检病变观察、细菌学和PCR检测,并进行了致病性和药敏试验.结果表明:经流行病学调查和剖检病变观察,该病例为疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒和细菌感染所致;细菌分离、生化鉴定为链球菌,猪繁殖与呼...     

羊口疮的PCR检测及病理组织学观察

对自然感染疑似羊口疮的4只病羊的嘴角皮进行采样,采用石蜡包埋,H.E染色,在显微镜下进行病理组织学观察。结果显示:上皮细胞发生"气球样变";"气球样变"的细胞破裂,与细胞间脓性水肿液融合成水疱或脓疱;并可见到出血现象。     

山羊痘病毒和羊口疮病毒双重PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank发表的山羊痘病毒（goatpox virus,GPV）和羊口疮病毒（orf virus,ORFV）基因序列,分别合成针对GPV ITR和ORFV H2L基因片段的2对引物,以GPV和ORFV的核酸混合物作为模板,经优化反应条件,成功建立了快速鉴别检测GPV、ORFV的双重PCR方法。特异性试验结果显示,该方法对GPV与ORFV核酸的扩增能获得289和507 bp的特异性目的片段,而对FMDV、FPV、BTV、健康山羊皮肤的核酸扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对GPV核酸的最小检出量为4 pg,对ORFV核酸为0.4 pg;对临床采集的12份病料进行双重PCR扩增,GPV检出率为25%（3/12）,ORFV的检出率为75%（9/12）。结果表明,建立的双重PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于GPV或/和ORFV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断。     

鸡马立克氏病的诊断与防治

贵州省某鸡场送检发病鸡6只,根据流行病学、剖解病变疑似马立克氏病,经肝脏进行细菌分离培养24 h后观察无细菌生长,琼脂扩散试验为阳性,马立克氏病毒核酸的PCR检测能扩增出目的条带,表明该病为马立克氏病病毒感染所致。     

贵州地区羊口疮病毒B2L基因克隆及原核表达载体构建

用H2L基因特异性引物对羊口疮临床疑似病料进行鉴定,采用PCR扩增出阳性样品羊口疮病毒结构蛋白B2L基因,回收纯化PCR产物,克隆至pMD18-T,测序结果表明插入的片段为目的基因,全长1137 bp。将目的基因定向克隆至pET-32a构建了B2L基因原核表达载体pET-32a-B2L,经PCR鉴定、酶切及进一步测序证明表达载体构建成功,为下一步的表达及基因工程疫苗的研究奠定了良好基础。